Sơ ựồ 2: điều chế cao EtOAc
Trái mướp ựắng tươi
Bỏ ruột bên trong Phần trái xanh còn lại
1. Xắt lát 2. Phơi tự nhiên
3. đem sấy ở 500C
Nguyên liệu khô
Xay nhuyễn Bột mướp ựắng khô
1. Ngâm với EtOAc 2. Lọc áp suất thấp
3. Làm khan bằng Na2SO4
Dịch chiết EtOAc
đuổi dung môi Cao EtOAc
- Tiến hành:
Cân 300g trái mướp ựắng tươi ựã bỏ phần ruột bên trong, xắt lát, ựem phơi tự
nhiên rồi sấy ở nhiệt ựộ 500C ựến khối lượng không ựổi ựược nguyên liệu khô. đem
34
áp suất thấp, lấy dịch lọc thu ựược làm khan bằng Na2SO4. Lọc, ựuổi dung môi thu
ựược cao EtOAc. - Ứng dụng sắc kắ:
đối với cao EtOAc, hệ dung môi dùng cho SKLM là PE: EtOAc (1:3), hiện màu
với H2SO4 50%.
Ta thấy có một ựường kéo dài từ ựiểm xuất phát ựến vết cuối, ựồng thời cũng có những vết tròn xen vào ựường kéo dài và ựậm hơn ựường nối dài, nhưng rõ hơn so với cao EtOAc của trái mướp ựắng tươi.
Hình 2.2. SKLM cao EtOAc trong hệ dung môi PE: EtOAc (1:3)
Giá trị Rf của cao EtOAc, hệ dung môi PE: EtOAc (1:3)
Vết Rf 1 2 3 4 0,72 0,34 0,28 0,07
Vậy ta thấy các vết thể hiện trên bảng SKLM có ựường chạy sắc nét hơn và ựẹp hơn khi chạy SKLM của cao EtOAc tươi.
- Tiến hành tách các vết bằng sắc kắ cột:
35
Cột sắc kắ ựược sử dụng là cột thủy tinh có ựường kắnh khoảng 1,7cm, chiều cao của cột khoảng 50cm.
Cân 10g chất hấp phụ Silicagel bột (của hãng Merk) ứng với khoảng 0,5g cao EtOAc.
Chất hấp phụ ựược nhồi vào cột sau ựó ổn ựịnh cột bằng dung môi EtOAc chạy liên tục khoảng 2 giờ. Hòa tan cao EtOAc với một lượng ắt dung môi ựủ ựể hòa tan mẫu. Cho mẫu vào cột. Mở khóa bên dưới cho dung dịch mẫu ngấm vào cột. Khi toàn bộ lớp dung dịch mẫu ựã ngấm vào cột, dùng ống hút lấy một ắt dung môi rửa thành cột. Tiếp theo cho dung môi liên tục ựể bắt ựầu quá trình giải ly.
Quá trình giả ly ựược thực hiện liên tục với dung môi EtOAc và ựược theo dõi bằng SKLM thu ựược 22 lọ.
+ Theo dõi quá trình chạy cột bằng SKLM, hiện màu với H2SO4 50%.
Phân ựoạn Số lọ Hệ dung môi Ghi chú
Phân ựoạn 1 Phân ựoạn 2 Phân ựoạn 3 Phân ựoạn 4 1 - 6 7 - 11 12 - 16 17 - 22 PE 100% PE: EtOAc (1:3) PE: EtOAc (3:1) EtOAc 100% Rf = 0,98 Rf = 0,73 Rf = 0,61 Rf = 0,02
36
Hình ảnh tách các hợp chất hữu cơ không phân cực, phân cực yếu và phân cực như sau:
Hình 2.3. Hình SKLM tách các chất ở các phân ựoạn 1
37
Hình 2.5. Hình SKLM tách các chất ở các phân ựoạn 3
Hình 2.6. Hình SKLM tách các chất ở các phân ựoạn 4
Như vậy, ta dùng sắc kắ cột có thể tách ựược các hợp chất không phân cực, phân cực yếu, phân cực. Mặc dù các hợp chất này thể hiện lên bảng SKLM là các vết kéo dài. Tuy nhiên ở phân ựoạn 2 là thể hiện rõ nhất.
38
PHẦN KẾT LUẬN Ờ đỀ XUẤT 1. Kết luận:
Do nghiên cứu trong thời gian có hạn và một số kĩ thuật thực nghiệm còn hạn chế nên tôi nghiên cứu ựược một số vấn ựề sau ựây:
- Trình bày ựược cơ sở lắ thuyết của ựề tài nghiên cứu.
- Từ trái mướp ựắng (momordica charantina Linn) thuộc họ bầu bắ, tôi ựã thực hiện ựược một số kết quả như sau:
+ Thực hiện việc ựiều chế ựược cao EtOAc từ trái mướp ựắng tươi.
+ định tắnh thành phần một số hợp chất hữu cơ bằng phương pháp hóa học cho thấy có sự hiện diện của Sterol, Tanin, Flavonoid, Glycosid trong cao EtOAc.
+ định tắnh bằng SKLM trong dịch cao EtOAc của trái mướp ựắng tươi với hệ dung môi PE: EtOAc (1:3).
+ Ngoài ra tôi ựã ựiều chế cao EtOAc từ bột mướp ựắng khô.
+ định tắnh thành phần một số hợp chất hữu cơ bằng phương pháp hóa học cho thấy có sự hiện diện của Sterol, Tanin, Flavonoid, Glycosid trong bột mướp ựắng khô. + định tắnh bằng SKLM trong cao EtOAc từ bột trái mướp ựắng khô với hệ dung môi PE: EtOAc.
+ Tiến hành tách cột phần cao EtOAc các hợp chất trong bột trái mướp ựắng khô, theo dõi quá trình chạy cột bằng SKLM.
2. đề xuất:
Qua quá trình nghiên cứu và thực nghiệm tôi rút ra một số ựề xuất sau khi nghiên cứu thành phần của trái mướp ựắng:
- Thực hiện với lượng nguyên liệu lớn hơn ựể chiết và tách cột của cao EtOAc ựược nhiều hơn.
- Nghiên cứu bằng một số phương pháp hiện ựại ựể xác ựịnh ựược cấu trúc phân tử các chất.
- Tiếp tục thực hiện tìm dung môi ựể có thể tách ựược các chất ở các phân ựoạn khác nhau trong trái mướp ựắng.
39
TÀI LIỆU THAM KHẢO
1. Võ Văn Chi (1999), Từ ựiển cây thuốc Việt nam, NXB Y Học.
2. Trần Thị đà, Nguyễn Hữu đỉnh (1999), Ứng dụng một số phương pháp phổ
nghiên cứu cấu trúc phân tử, NXB Giáo Dục.
3. PGS.TS Lê Thị Anh đào (chủ biên), TS. đặng Văn Liễu, Thực hành hoá học hữu
cơ, NXB đại học sư phạm.
4. Lê Văn đăng (2005), Chuyên ựề một số hợp chất thiên nhiên, NXB đại học quốc
gia Thành phố Hồ Chắ Minh.
5. Hồ Viết Quý (2001) , Giáo trình phân tắch lắ Ờ hóa, NXB Giáo Dục, Hải Dương
6. Võ Hồng Thái, Khảo sát thành phần Triterpen Glycosid trong hạt mướp ựắng,
Momodica charantina L họ bầu bắ, Luận văn thạc sĩ hóa học, Trường đại học cần Thơ.
7. đào Hữu Vinh (chủ biên), Nguyễn Xuân đang, Trần Thị Mỹ Linh, Phạm Hùng
Việt (1985), Các phương pháp sắc kắ, NXB Khoa học và kỹ thuật Hà Nội.
8. Một số trang web: ww w . g o og l e . c o m . v n ww w . ho a h o c v i e t n a m . c o m . v n h t t p :// c h e m vn . n e t/ c h e m v n / h t t p :// ww w . s u c k h o e 3 60 . c o m / S o n g - k ho e / r a u - c u - 2 / k ho - q u a - c h u a - b e n h . p h p h t t p :// ww w . n i m m . o r g . v n / n g h i e n c u u kh o a h o c _ k y y e u1 9 8 7 - 2 00 0 _0 2 . h t m