γ.6 Ph ng pháp đ nh danh cu kh un Gram d ng
3.8.Th ngh im kháng sinh đ theo ph ng pháp Kirby-Bauer
3.8.1. Nguyên t c
Thu c kháng sinh th m trên đ a, khu ch tán ra môi tr ng xung quanh đ a
ng n ch n s t ng sinh c a vi khu n. ng kính vùng b c ch (đ ng kính
vịng vơ khu n) th hi n đ nh y c m c a vi khu n đ i v i thu c kháng sinh. N u
vi khu n đ kháng v i kháng sinh thì s khơng có đ ng kính vịng vơ khu n ho c
đ ng kính vịng vơ khu n nh h n giá tr cho phép.[6]
3.8.2. V t li u
a kháng sinh: LƠ nh ng đ a gi y th m có b dƠy 1 mm, đ ng kính 6
mm đ c t m m t dung d ch thu c kháng sinh v i n ng đ tiêu chu n.
a kháng sinh ph i đ c gi t l nh, có kèm theo ch t làm khan
n c, ch ng m s c nóng và s ngo i nhi m làm h ng đ a. [6]
Môi tr ng:[10]
Môi tr ng tiêu chu n là MHA, pH: 7,4. V i các vi khu n khó tính ph i cho thêm 5% máu.
Môi tr ng đ c đ vƠo đ a petri v i b dày c a th ch là 4mm.
B o qu n t l nh không đ c dùng sau 7 ngƠy. Tr c khi
dùng, ph i l y ra kh i t l nh vƠ đ cho đ n khi đ t đ c nhi t
đ phòng.
Dung d ch chu n đ đ c 0.5 McF (huy n d ch t ng đ ng đ
đ c khu n 1 - 2.108 CFU/ml)
Môi tr ng BHI đ pha huy n d ch vi khu n 0.5 McF. 3.8.3. K thu t[6]
Ghi mã s phịng thí nghi m, ngày th c hi n lên h p th ch.
Dùng khuyên c y l y vài khu n l c c n th c hi n cho vào l BHI, t o
huy n dch đ đ t đ c đ đ c t ng đ ng v i đ đ c c a ng chu n
Vortex l BHI trong vƠi dơy đ tr n đ u huy n d ch.
Dùng t m bông vô trùng nhúng vƠo huy n d ch vi khu n, sau đó ép nh t m bơng lên thƠnh l đ v t b t n c đ u t m bông.
Ph t đ u đ u t m bông lên b m t h p th ch 3 l n, m i l n xoay h p th ch m t góc 60o , ph t t trung tơm ra ngoƠi, đ khô b m t.
Dùng k p đ t đ a kháng sinh lên b m t th ch (kho ng cách gi a β đ a
kháng sinh ít nh t là 20mm). T i đa trên m i h p th ch lƠ 8 đ a gi y kháng sinh.
t đ a gi y kháng sinh tùy theo lo i vi khu n và lo i b nh ph m theo
”B ng 2.5.1: H ng d n đ t đ a kháng sinh (CLSI β01β)” .
t ng c h p th ch, đáy lên trên vƠ cho vƠo t 30OC trong 24 gi . 3.8.3. Di n gi i và báo cáo k t qu (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
Sau khi 24 gi , th c hi n đo đ ng kính vịng vơ khu n và tr l i k t qu vi
khu n nh y c m (S) hay trung gian (I) hay đ kháng (R) đ i v i kháng sinh th
nghi m.