Sử dụng phương pháp phỏng vấn trên ựồng ruộng ựối với nông dân (30 hộ
tại mỗi ựịa ựiểm nghiên cứu) dựa trên một bộ các câu hỏi (phụ lục). Bộ câu hỏi này nhằm thu thập các thông tin sau:
- Các loại thuốc BVTV nông dân ựã và ựang sử dụng ựể trừ sâu hại rau trên ruộng của họ.
- Tần suất sử dụng thuốc BVTV trên ựồng ruộng. - Số lần phun thuốc trong một vụ raụ
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ẦẦẦ 29
- Phương thức sử dụng thuốc của nông dân.
2.3.3. đánh giá hiệu lực của thuốc trừ sâu ựối với bọ phấn
Phương pháp bố trắ thắ nghiệm ựược thực hiện theo kiểu khối ngẫu nhiên
ựầy ựủ RCB. Số lần nhắc lại: 3, diện tắch ô thắ nghiệm: 30 m2. thuốc xử lý khi mật ựộ bọ phấn ựạt 3-5 con/lá. Xác ựịnh mật ựộ bọ phấn (con/lá) ở trước xử lý và 3, 7, 10 ngày sau xử lý
Các công thức bố trắ thắ nghiệm:
TT Tên thuốc Liều lượng
(lit,kg/ha)
CT I Padan 95 SP 0,12
CT II Confidor 100 SL 0,07
CT III Selecron 500EC 0,08
CT IV Sherpa 25 EC 0,07
CT V Vertimex 1.8EC 0,05
CT VI đối chứng không phun -
Hiệu lực của thuốc ựược tắnh bằng công thức Henderson - Tilton
Ta x Cb
Hiệu lực (%) = ( 1- --- ) x 100
Ca x Tb
Trong ựó: Ta: Số cá thể sống ở công thức xử lý sau phun
Cb: Số cá thể sống ở công thức ựối chứng trước phun Ca: Số cá thể sống ở công thức ựối chứng sau phun
Tb: Số cá thể sống ở công thức xử lý trước phun Hiệu lực của thuốc ựược phân tắch thống kê theo phương pháp so sánh của Duncan bằng chương trình IRRISTAT 4.0 trên máy vi tắnh.
2.3.4. Nghiên cứu về mức ựộ mẫn cảm thuốc trừ sâu ựối với bọ phấn:
- Chỉ tiêu: giá trị LC50 và LC95 - Phương pháp xác ựịnh LC50 và LC95
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ẦẦẦ 30
Sử dụng phương pháp nhúng lá ựể xác ựịnh LC50 và LC95 của ấu trùng bọ
phấn. Việc ựánh giá tiến hành trên ấu trùng thế hệ thứ nhất thu ựược từ các cá thể bọ
phấn ngoài ựồng ruộng. Các bước tiến hành như sau:
- Thu thập mẫu và nuôi ựể thu ấu trùng thế hệ thứ nhất: tại các ựịa ựiểm nghiên cứu các bọ phấn trưởng thành ựược thu thập về phòng thắ nghiệm, thu mẫu trên các ruộng nằm rải rác trong toàn ựịa ựiểm nghiên cứu nhằm ựảm bảo mẫu thu ựại diện cho toàn quần thể nghiên cứụ Tại phòng thắ nghiệm, bọ phấn trưởng thành ựược thả
vào lồng lưới kắch thước 120 cm x 60 cm x 60 cm với số lượng khoảng 300 cặp/lồng.
đưa 40-50 cây ựậu ở giai ựoạn 1-2 lá thật vào lồng trong vòng 16 giờ ựể bọ phấn trưởng thành ựẻ trứng và ựể trong ựiều kiện nhiệt ựộ 26-30 oC. Các cây lấy ra ựược giữ trong ựiều kiện cách ly hoàn toàn với bọ phấn trưởng thành và ựược chăm sóc cho tới khi ấu trùng phát triển tới ựầu tuổi 2, sử dụng ấu trùng này ựể thử với các loại thuốc trừ sâu nghiên cứụ
- Mỗi 1 loại thuốc pha 5 - 6 nồng ựộ. Dung dịch có nồng ựộ cao ựược dùng làm dung dịch mẹ (liều 1) muốn chuyển sang nồng ựộ thấp hơn (liều 2) dùng công thức: C1V1 = C2V2 Trong ựó: C1: nồng ựộ thuốc ở liều 1 C2: nồng ựộ thuốc ở liều 2 V1: thể tắch liều thuốc 1 dùng ựể pha chế V2: thể tắch liều thuốc 2 dùng ựể pha chế - Thử mức ựộ mẫn cảm của ấu trùng
+ Giai ựoạn thử thăm dò: giai ựoạn này ựược tiến hành với các nồng ựộ khác nhau của thuốc trừ sâu thử nghiệm nhằm tìm ra thang với 5-6 nồng ựộ sao cho nồng
ựộ cao nhất sẽ làm chết 90-95% số cá thểựược thử và nồng ựộ thấp nhất sẽ làm chết từ 5-15% số cá thể ựược thử. Sau giai ựoạn thắ nghiệm này thang nồng ựộựạt tiêu chuẩn trên sẽựược chọn ựể dùng cho giai ựoạn thắ nghiệm chắnh thức.
+ Giai ựoạn thắ nghiệm chắnh thức: thang 5-6 nồng ựộựã chọn ựược dùng ựể
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ẦẦẦ 31
khoảng 15 ựến 30 con. Nhúng toàn bộ lá của cây thắ nghiệm vào dung dịch thắ nghiệm khoảng 20 giâỵ Sau khi xử lý 5-7 ngày tiến hành ựếm sốấu trùng, nhộng còn sống.
Ghi chép sốấu trùng và nhộng còn sống của từng lần nhắc lại, từng nồng ựộ
thử nghiệm. Hiệu lực của thuốc ựược thể hiện qua số lượng ấu trùng, nhộng sống sót và ựược sử dụng ựể tắnh LC50 và LC95
Chỉ số kháng Ri ựược xác ựịnh theo công thức của Tào Minh Tuấn (2003) LC95
Ri = ---
LKC
Ri > 50 => Sâu hại có tắnh kháng thuốc
2.3.5 Phương pháp xử lý số liệu
- Số liệu ựược xử lý theo phương pháp thống kê thông thường.
- Các số liệu khác ựược xử lý theo phương pháp ựa biên ựộ của Duncan với ựộ tin cậy 95% bằng chương trình IRRISTAT 4.0 và chương trình Polo Plus 2.0 trên máy vi tắnh.
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ẦẦẦ 32
CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
3.1. Một số ựặc ựiểm hình thái và sinh học của bọ phấn Bemisia tabaci Gennadius Gennadius
Bọ phấn Bemisia tabaci Gennadius thuộc họ rầy phấn Aleyrodidae, bộ cánh
ựều Homoptera, là ựối tượng hại rau phổ biến và nhiều cây trồng ở nước ta và trên thế
giớị Bọ phấn Bemisia tabaci hoàn thành một vòng ựời qua 4 pha phát triển.
3.1.1 đặc ựiểm hình thái
Chúng tôi tiến hành quan sát và ựo ựếm kắch thước các pha phát dục của bọ phấn, kết quả thu ựược thể hiện ở bảng 3.1
Bảng 3.1. Kắch thước các pha phát dục của bọ phấn B.tabaci
Pha phát dục Chiều dài Chiều rộng Sải cánh
Trứng 0,21ổ 0,001 0,11 ổ 0,002 Ấu trùng tuổi 1 0,25 ổ 0,012 0,15ổ 0,001 Ấu trùng tuổi 2 0,35 ổ 0,013 0,21 ổ 0,011 Ấu trùng tuổi 3 0,44 ổ 0,003 0,26 ổ 0,002 Ấu trùng tuổi 4 0,71 ổ 0,004 0,49 ổ 0,003 Trưởng thành ựực 0,83 ổ 0,011 0,24 ổ 0,012 1,78ổ 0,002 Trưởng thành cái 0,95ổ 0,002 0,31 ổ 0,003 2,03 ổ 0,001 Ghi chú: đơn vịựo: mm * Trứng Trứng ựược ựẻ thành cụm 2 - 4 quả hoặc rải rác ở mặt dưới của lá bánh tẻ, cuống của trứng ựắnh vuông góc với bề mặt lá câỵ Quan sát thấy trứng có hình bầu dục thon dài, kắch thước 0,23+0,02 mm, rộng 0,11+0,01 mm. Khi mới ựẻ
trứng có mầu vàng trong suốt, sau ựục dần chuyển sang màu nâu nhạt, sắp nở có màu nâu xám.
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ẦẦẦ 33
- Ấu trùng tuổi 1 có hình ô van, màu vàng nhạt có chân, mắt kép, có râu
ựầu, bò chậm chạp ra xung quanh. Kắch thước dài khoảng 0,21ổ 0,001mm, chiều rộng 0,11+0,002mm,.
- Ấu trùng tuổi 2 có hình ô van mầu vàng nhạt không có chân, mắt kép và râu ựầu nhìn rõ. Chúng nằm cốựịnh ở sát mặt dưới của lá.
- Ấu trùng tuổi 3 có hình ô van không ựều, màu vàng nhạt, mắt kép và râu
ựầu nhìn rõ. Chân trước ngắn, hướng lên trên, chân giữa và chân sau hướng xuống dướị Kắch thước dài 0,43+0,03 mm, rộng 0,26+0,01mm.
- Ấu trùng tuổi 4 (nhộng giả) kắch thước 0,71 x 0,49mm. Chân trở nên cong hướng vào trong, cuối chân có miếng ựệm.
* Trưởng thành
Bọ phấn trưởng thành có thân màu vàng nhạt, toàn thân phủ một lớp bột màu trắng, hai ựôi cánh dài bằng nhau, mắt kép có một rãnh ngang chia hai phần trông giống hình số 8, ựôi râu ựầu có 6 ựốt, hai ựốt ựầu hơi tròn, ựốt cuối có một gai lông nhỏ. Chân dài và mảnh, bụng có chắn ựốt, ựốt thứ nhất hơi thót lại làm cho cơ thể có dạng hình ong. Trưởng thành ựực có kắch thước nhỏ hơn trưởng thành cái, ở cuối bụng có kẹp, trưởng thành cái ở cuối bụng có ống ựẻ trứng.
Bọ phấn Bemisia tabaci có phổ ký chủ rất rộng. Theo Abdon (1973) thì bọ
phấn có phổ ký chủ là 115 loài cây trồng và cỏ dạị Những ký chủ chắnh nguyên thuỷ của bọ phấn là những cây trồng như: bông, cà chua, cúc Châu Phi, cây sắn, thuốc lá, xà lách, dưa chuột, ựậu bắp, ựậu ựỏ, cà tắm, rau họ thập tự, họ bầu bắ,
ựậu tương, ựậu xanh, ựậu rau, ớt, khoai tây ... những ký chủ phụ trên cây hoang dại như cây bông bụt, cây lu lụ
Theo Coudiet và cộng sự (1985) trên thế giới có tới 500 loài cây là ký chủ
của bọ phấn, trong ựó ở Florida có tới 50 loài như khoai lang, dưa chuột, dưa thơm, dưa hấu, bắ ngô, cà tắm, ớt, cà chua, xà lách, suplơ ... Bọ phấn thắch hợp trên cây trồng này hay cây trồng khác tuỳ theo vùng sinh tháị ở Florida bọ phấn thắch sinh sống trên khoai lang, dưa chuột, bầu bắ hơn là trên sup lơ xanh, cà rốt (John 2001). Ở đài Loan thì thứ tự ựó là cà tắm, cà chua, khoai lang, dưa chuột,
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ẦẦẦ 34
tabaci giúp bọ phấn sống sót khi trên ựồng ruộng không có những cây trồng là ký chủ chắnh tạo thành sự gối lứa trên ựồng ruộng. đây là vấn ựề rất quan trọng ựể
xác ựịnh biện pháp phòng trừở từng vùng sinh thái nhất ựịnh. Hình 3.1: Trứng của Bemisia tabaci G. Hình 3.2: Ấu trùng tuổi 1 của Bemisia tabaci G. Hình 3.3. Ấu trùng tuổi 2 của Bemisia tabaci G. Hình 3.4: Ấu trùng tuổi 3 của Bemisia tabaci G. Hình 3.5: Ấu trùng tuổi 4 của Bemisia tabaci G. Hình 3.6: Trưởng thành của Bemisia tabaci G.
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ẦẦẦ 36
3.1.2 Một số ựặc ựiểm sinh học của bọ phấn B.tabaci
3.1.2.1 Vòng ựời của bọ phấn B.tabaci.
Qua các nghiên cứu cho thấy bọ phấn B.tabaci. gây hại trên phổ ký chủ
tương ựối rộng, nó gây hại trên 115 loài cây trồng và cỏ dại (Abdon,1973). Tuy nhiên Bọ phấn thắch hợp trên cây trồng này hay cây trồng khác tuỳ theo vùng sinh tháị Do ựó, tôi ựã nghiên cứu vòng ựời phát triển của bọ phấn B.tabaci trên 2 ký chủ
khác nhau là cà chua và ựậu cove, kết quả thu ựược ở bảng 3.2
Bảng 3.2.Vòng ựời của bọ phấn B.tabaci trên các loại thức ăn khác nhau Thời gian phát dục (ngày) Cà chua đậu Cove Pha phát dục Ngắn nhất Dài nhất Trung bình Ngắn nhất Dài nhất Trung bình Trứng 6 10 8,32ổ0,27 6 9 7,74ổ0,21 Ấu trùng tuổi 1 3 7 4,60ổ0,21 3 6 4,24ổ0,21 Ấu trùng tuổi 2 3 6 4,17ổ0,21 3 5 3,96ổ0,17 Ấu trùng tuổi 3 4 7 5,35ổ0,22 3 6 4,65ổ0,19 Ấu trùng tuổi 4 4 8 5,98ổ0,25 4 6 4,83ổ0,17 Trưởng thành trước ựẻ trứng 2 4 2,77ổ0,16 2 3 2,42ổ0,10 Vòng ựời 23 47 32,20ổ0,57a 23 47 27,87ổ0,47b CV% 2,70 LSD 2,75
Ghi chú: Nhiệt ựộ TB: 26,2oC, Ẩm ựộ TB: 80,3%, Số cá thể theo dõi n=30 cho mỗi cây ký chủ.Các chữ cái giống nhau trong phạm vi hàng không có sự sai khác ở ựộ tin cậy p ≤ 0,05.
Qua bảng 3.2 chúng tôi nhận thấy vòng ựời của bọ phấn có sự khác nhau có ý nghĩa khi nuôi trên 2 ký chủ là cà chua và ựậu covẹ Vòng ựời trung bình của bọ phấn trên cà chua là 32,20ổ0,57 ngày trong khi nuôi trên ựậu cove là 27,87ổ0,47 ngàỵ Các pha phát dục của bọ phấn như trứng, ấu trùng, trưởng
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ẦẦẦ 37
thành trước ựẻ trứng ựều có thời gian phát dục trên ựậu cove ngắn hơn trên cà chuạ Cụ thể là giai ựoạn trứng thời gian phát dục trên cà chua là 8,32ổ0,27 ngày, trên ựậu cove là 7,74ổ0,21 ngày; giai ựoạn ấu trùng tuổi 4 thời gian phát dục trên cà chua là 5,98ổ0,25, trên ựậu cove là 4,83ổ0,17; giai ựoạn trước trưởng thành ở
cà chua là 2,77ổ0,16 còn trên ựậu cove là 2,42ổ0,10 ngàỵ
Kết quả nghiên cứu của chúng tôi phù hợp với nghiên cứu của Trần đình Chiến và Lê Thị Liễu (2004) ựã nghiên cứu ựược vòng ựời của bọ phấn khoảng 20-32 ngàỵ Nhưng kết quả nghiên cứu của chúng tôi lại khác của Sanchez (1997) khi nghiên cứu sinh thái học của bọ phấn Bemisia tabaci trên 5 loại cây trồng khác nhau (ựậu xanh, cà chua, bông, hoa hồng, cây cúc) thì không có sự
khác nhau về thời gian phát dục của trứng thời gian phát triển của ấu trùng và nhộng, tuổi thọ trưởng thành, tỷ lệ sống sót, tỷ lệựực cái trên các cây trồng.
Như vậy bọ phấn thắch ăn trên cây ựậu cove hơn là trên cà chuạ điều này theo chúng tôi có thể giải thắch là do cấu tạo lá của ựậu cove phù hợp với khả
năng chắch hút của bọ phấn hơn là lá cây cà chuạ
3.1.2.2 Nhịp ựiệu sinh sản của bọ phấn Bemisia tabaci G.
để tìm hiểu ựối với các cây ký chủ khác nhau trưởng thành bọ phấn sẽ thắch
ựẻ trứng trên cây ký chủ nào, chúng tôi ựã theo dõi khả năng ựẻ trứng của bọ phấn trên cây cà chua và ựậu covẹ Thắ nghiệm ựược bố trắ 10 cặp bọ phấn trong
ựiều kiện nhiệt ựộ phòng, hàng ngày thay cây ựể theo dõi khả năng sinh sản của chúng. Kết quả thu ựược thể hiện ở bảng 3.3
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ẦẦẦ 38
Bảng 3.3. Nhịp ựiệu sinh sản của bọ phấn Bemisia tabaci G.
Số trứng ựẻ của một trưởng thành cái ( quả/ngày)
Cà chua đậu cove
Ngày sau
ựẻ trứng Ít
nhất Nhinhấềt u Trung Bình nhÍt ất Nhinhấềt u Trung Bình
1 Ngày 0 3 0,47ổ0,51 0 3 0,60ổ0,50 2 Ngày 1 8 3,80ổ0,92 1 8 4,00ổ1,00 3 Ngày 4 21 12,53ổ 2,77 4 22 11,33ổ3,17 4 Ngày 10 21 13,93ổ1,84 12 26 18,53ổ1,99 5 Ngày 8 15 11,53ổ1,43 8 21 14,53ổ2,11 6 Ngày 3 14 7,67ổ1,72 8 14 9,47ổ2,15 7 Ngày 0 10 4,00ổ1,77 0 10 4,33ổ1,68 8 Ngày 0 4 1,20ổ0,81 0 6 1,60ổ1,16 9 Ngày 0 2 0,20ổ0,31 0 2 0,21ổ0,31 Tổng số trứng của 1 TT cái 44 66 55,33ổ3,33 56 74 64,6ổ3,14 Ghi chú: Nhiệt ựộ: 25,320C, Ẩm ựộ: 83,05%
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ẦẦẦ 39
Qua bảng 3.3 và hình 3.7 cho thấy trưởng thành bọ phấn ựẻ tập trung từ
ngày 6-9 sau ngày bắt ựầu ựẻ trứng, tập trung nhiều vào 3-5 ngày, cao nhất là vào ngày thứ 4 với số trứng ựẻ trung bình của một con cái trên cà chua là 13,93ổ1,84 quả, trên ựậu cove là 18,53ổ1,99 quả. Trưởng thành bọ phấn thắch ựẻ trứng trên
ựậu cove hơn là trên cà chuạ Cụ thể, trên cà chua tổng số trứng ựẻ trung bình của