1.4. Thuốc chống ung thư paclitaxel
Là thuốc chống ung thư được chiết xuất từ cây thông đỏ, paclitaxel (Taxol) thuộc danh mục các loại thuốc thiết yếu của Tổ chức Y tế thế giới WHO.
Paclitaxel được sử dụng trong hóa trị các loại ung thư khác nhau như ung thư buồng trứng, ung thư vú và ung thư phổi khơng phải tế bào nhỏ. Paclitaxel cịn được dùng trong chữa trị ung thư hiếm gặp liên quan đến người mắc hội chứng suy giảm miễn dịch (AIDS) là ung thư Kaposi.
Trong nghiên cứu hệ nano mang thuốc chống ung thư, cụ thể là trong nghiên cứu, paclitaxel được lựa chọn để đại diện cho thuốc có bản chất kém tan trong nước.
1.4.1. Tính chất hóa lý
Hình thức: paclitaxel tồn tại ở dạng bột kết tinh màu trắng đến trắng xám, không mùi, không vị.
Độ tan: thực tế không tan trong nước, tan trong methanol, ethanol, dichloromethan và dễ tan trong methylene chloride.
Tên hố học: 5β,20-Epoxy-1,2α,4,7β,10β,13α-hexahydroxytax-11-en-9-one4, 10-diacetate 2-benzoate 13-ester with (2R,3S)-N-benzoyl-3-phenylisoserine.
Cơng thức phân tử: C47H51NO14. Khối lượng phân tử: 853,918 g/mol.
Dung dịch tiêm đậm đặc phải được pha loãng trước khi truyền tĩnh mạch. Dung dịch tiêm đậm đặc có pH từ 6 – 7 [33].
Hình 1.10. Cơng thức cấu tạo của paclitaxel
1.4.2. Cơ chế tác động
Tế bào khi được xử lý bằng paclitaxel đã được các nghiên cứu cho thấy là gặp khó khăn trong việc phân chia và sự phân ly của nhiễm sắc thể, ngược lại với khi sử dụng thuốc hướng đích đến tubulin khác như colchicine. Điểm khác biệt giữa paclitaxel và colchicine là trong khi colchicine ức chế sự lắp ráp và tổ chức của các vi ống, paclitaxel giúp ổn định bảo vệ mạng lưới các vi ống.
Cơ chế tác động của paclitaxel là tăng trùng hợp các dimer tubulin tạo thành các vi ống và ổn định các vi ống bằng việc ức chế giải trùng hợp. Bên cạnh đó, paclitaxel cũng tạo các cấu trúc khơng bình thường trong các vi ống ở quá trình phân bào. Các thử nghiệm in vitro và in vivo trên các tế bào động vật có vú cho thấy paclitaxel có tác dụng gây đột biến gen. Ngồi ra, paclitaxel gây chết tế bào do phá vỡ động học tạo vi ống trong ung thư mô tiên phát ở buồng trứng, ung thư vú, đại tràng, cổ, ung thư phổi không tế bào nhỏ và bướu thịt Kaposi ở người nhiễm AIDS. Vì vậy, thuốc paclitaxel được lựa chọn trong điều trị bước hai cho bệnh nhân ung thư vú và buồng trứng. Trong thử nghiệm lâm sàng pha II trên những bệnh nhân được hóa trị liệu paclitaxel liều cao, tỷ lệ đáp ứng sớm là 70% và ung thư buồng trứng kháng trị là 30%. Tỷ lệ đáp ứng chung trong thử nghiệm pha I trên những bệnh nhân đã được điều trị ung thư vú di căn là 56% [34].
1.4.3. Dược động học
Hấp thu: liều paclitaxel được truyền vào tĩnh mạch tỷ lệ thuận với nồng độ thuốc trong huyết và giảm theo đồ thị có hai pha. Pha thứ nhất cho thấy mức giảm nhanh thể hiện sự phân tán của thuốc đến các ngăn ngoại biên và sự bài tiết. Tiếp theo pha khởi đầu là việc bài tiết tương đối chậm của thuốc khỏi ngăn ngoại biên.
Phân bố: không bị thay đổi khi dùng cùng với ranitidin, cimetidin, diphenhydramine hoặc dexamethason và có tỷ lệ gắn với protein là 89% (in vitro).
Ở giai đoạn ổn định, thể tích phân bố thuốc là 68 – 162 mL/m2 (5 – 6 L/kg thể trọng). Điều này cho thấy thuốc khuếch tán nhiều ra ngoài mạch hoặc gắn với các thành phần của mơ. Sự chuyển hóa và phân bố thuốc paclitaxel trong cơ thể vẫn chưa được nghiên cứu.
Chuyển hóa: được chuyển hóa bởi CYP2C8 và CYP3A4 (ít hơn). Thời gian bán thải (T ½) của paclitaxel là 5,8 giờ đối với truyền từ 6 đến 24 giờ; 2,33 giờ cho truyền 3 giờ. T ½ paclitaxel gắn albumin là 27 giờ.
Thải trừ: ngồi thận, 2 – 13% lượng thuốc được thải ra ngồi thơng qua nước tiểu dưới dạng ban đầu sau khi truyền tĩnh mạch. Nghiên cứu đánh giá trên động vật cho thấy paclitaxel được chuyển hóa tại gan, 14% bài tiết qua nước tiểu, 70% bài tiết qua phân. Tổng thể độ thanh thải chung của cơ thể sau 1 giờ và 6 giờ truyền là 5,8 – 16,3 L/h/m2; sau 24 giờ truyền là 14,2 – 17,2 L/h/m2 [34].
1.4.4. Dược lực học
Paclitaxel là tác nhân chống u bướu tân sinh tác dụng lên hệ thống vi quản. Thuốc giúp cho sự hình thành vi quản bằng cách thúc đẩy quá trình tạo cao phân tử của tubulin, một đơn vị nhỏ protein của vi quản trong giai đoạn gián phân, ngay cả khi khơng có sự có mặt của các chất trung gian thường cần thiết cho sự hình thành vi quản (như guanosine triphosphate-GTP), do đó đưa đến sự tạo thành các vi quản bền vững và khơng có chức năng. Tuy cơ chế chính xác chưa được hoàn toàn nắm vững, paclitaxel phá hủy sự cân bằng động học trong hệ thống vi quản, chặn đứng tế bào của giai đoạn cuối pha G2 và pha M của chu kỳ tế bào, ngăn chặn sự sinh sản của tế bào và gây tổn hại đến chức năng của mô thần kinh [35].
1.4.5. Tác dụng phụ [36]
- Hầu hết người bệnh đều bị rụng tóc và 90% là bị suy tủy. - Các triệu chứng phổ biến (1%):
Toàn thân: phản ứng quá mẫn như sung huyết, ngoại ban (39%), chán ăn (25%) và phù ngoại biên (10%).
Máu: suy tủy, giảm bạch cầu trung tính lên đến dưới 500/mm3 (27%), giảm tiểu cầu (6%), thiếu máu với Hb < 80 g/lít (62%) trong đó 6% chuyển thành thiếu máu dạng nặng.
Tuần hồn: tuột huyết áp không biểu hiện triệu chứng (22%), nhịp tim chậm khơng biểu hiện triệu chứng (3%).
Tiêu hóa: gây buồn nơn, nơn (44%), rối loạn tiêu hóa (25%), đa tiết chất nhờn (20%), táo bón (18%), gây tắc ruột (4%).
Da: rụng tóc (>90%), gây kích ứng tại nơi truyền thuốc (4%).
Gan: transaminase huyết thanh tăng lên đến hơn 5 lần so với thông thường (5%), tăng photphatase kiềm lên đến hơn 5 lần (5%) và gây tăng mạnh bilirubin huyết thanh (1%).
Cơ – xương: đau cơ-khớp (54%) trong đó 12% là rất nặng. Khác: gây nhiễm khuẩn (18%).
- Triệu chứng ít gặp (0,1% - 1%):
Tồn thân: tụt huyết áp, phù mạch, khó thở, nổi mày đay tồn thân và các phản ứng quá mẫn.
Tuần hoàn: tụt huyết áp kèm hẹp động mạch vành, ngất xỉu.
Máu: giảm bạch cầu trung tính lên đến dưới 500 tiểu cầu/mm3 và không kèm theo sốt (27%); kéo dài tới hơn 1 tuần hoặc lâu hơn (1%). Người bệnh bị giảm tiểu cầu có số lượng tiểu cầu dưới 50000 tiểu cầu/mm3 ít nhất là một lần trong quá trình điều trị bệnh (1%).
Thần kinh: bệnh thần kinh có thể xuất hiện phụ thuộc vào liều dùng của paclitaxel và có liên quan tới việc tích lũy thuốc.
1.4.6. Những thách thức trong sử dụng paclitaxel
Taxol® cùng với các hợp chất có nguồn gốc từ paclitaxel được sử dụng phổ biến trong điều trị ung thư buồng trứng di căn, khi các biện pháp điều trị bằng platin và các anthracyclin không hiệu quả hay bị chống chỉ định. Tuy nhiên, hai nhược điểm chính của việc sử dụng nó vẫn chưa được giải quyết: (1) việc sản xuất paclitaxel khá tốn kém và (2) các cơ chế mà tế bào khối u phát triển khả năng chống lại paclitaxel vẫn chưa được làm rõ hoàn toàn [37].
Bên cạnh đó, tình trạng kháng thuốc của nhiều bệnh nhân được điều trị bằng paclitaxel vẫn đang được nghiên cứu. Nhiều nghiên cứu đã được thực hiện trong việc hiểu về cơ chế tác động của PTX nhưng các cơ chế này vẫn chưa được làm rõ. Theo kết luận cho đến nay, sự kháng thuốc này có thể là do các con đường khác nhau được kích hoạt bởi thuốc, vì vậy khiến việc kháng thuốc trở nên khó khăn hơn. Để đạt hạn chế được các nhược điểm này, việc kết hợp hai hay nhiều loại thuốc hóa trị đang được sử dụng trong một số phác đồ điều trị căn bệnh ung thư. Trong đó, hố trị liệu kết hợp paclitaxel và carboplatin được sử dụng phổ biến trong điều trị ung thư phổi không phải tế bào nhỏ và ung thư buồng trứng. Sự kết hợp này còn được gọi là PC và CarboTaxo [36]. Liều dung hai thuốc hoá trị như sau: truyền riêng rẽ paclitaxel (dung dịch không màu) truyền nhỏ giọt trong 3 giờ, tiếp theo đó, carboplatin (dung dịch khơng màu) cũng được truyền nhỏ giọt và trong khoảng thời gian là một giờ. Tổng thời gian điều trị lên đến 4 giờ. Hóa trị liệu bằng paclitaxel và carboplatin thường theo chu kỳ điều trị. Mỗi chu kỳ thường kéo dài 3 tuần (21 ngày). Người bệnh sẽ được chỉ định dùng paclitaxel và carboplatin, như đã mô tả ở trên, chỉ trong một ngày trong những ngày đầu. Tiếp đó, người bệnh được ngưng sử dụng thuốc hóa trị trong ba tuần tiếp theo. Và tồn bộ thời gian này được gọi là một chu kỳ điều trị. Sau thời gian nghỉ ngơi, việc điều trị được lập lại như trên để bắt đầu chu kỳ điều trị sau. Việc hóa trị phối hợp này thường dùng 6 – 8 chu kỳ điều trị trong thời gian 5 – 6 tháng.
1.5. Thuốc chống ung thư carboplatin
Carboplatin (hay còn được gọi là paraplatin) thường được sử dụng trong việc điều trị một số bệnh ung thư như: ung thư phổi, ung thư não, ung thư buồng trứng, ung thư đầu cổ, ung thư bàng quang, ung thư tinh hoàn, u nguyên bào võng mạc tiến triển và tái phát ở trẻ em. Carboplatin thường được sử dụng kết hợp với các loại thuốc khác (điển hình là paclitaxel) nhằm ngăn chặn quá trình lan rộng và phát triển của tế bào ung thư.
Trong nghiên cứu hệ nano mang thuốc chống ung thư, cụ thể là trong nghiên cứu này, carboplatin được lựa chọn để đại diện cho thuốc tan trong nước.
1.5.1. Tính chất hóa lý
Độ tan: tan trong nước và tan trong các dung môi: đệm acetate pH 4, đệm carbonate pH 9, ethanol/H2O 10%, ethanol/H 95%, HCl 0,1 N, NaOH 0,1 N, methanol, chloroform, dimethylsulfoxide và acid acetic.
Tên hoá học: cis-diammine-1,10-cyclobutane dicarboxylate platinum II. Công thức phân tử: C6H12N2O4Pt.
Khối lượng phân tử: 371249 g/mol.
Hình 1.11. Cơng thức cấu tạo của carboplatin
1.5.2. Cơ chế tác động
Carboplatin là dẫn xuất của cisplatin nên có cơ chế hoạt động tương tự như cisplatin và như một chất alkyl hóa nên có ba cơ chế khác nhau [38]:
• Carboplatin sẽ gắn kết với nhóm alkyl của các phân tử DNA làm phân mảnh nó do cơ chế sửa sai của enzyme. Vì vậy, quá trình tổng hợp DNA và phiên mã của RNA khơng thực hiện được.
• Carboplatin sẽ gắn kết với các nguyên tử trong DNA ngăn DNA tách ra để tiến hành tổng hợp và phiên mã.
• Carboplatin sẽ cảm ứng việc nhầm lẫn các nucleotide dẫn đến sự đột biến.
Thực tế so với cisplatin, carboplatin đã có độ độc giảm hơn hẳn do thay thế 2 nguyên tử chlorine thành gốc oxalate [39]. Tuy nhiên, thuốc vẫn gây độc tính vì tính chọn lọc và hướng đích kém. Thuốc làm rối loạn kênh vận chuyển cation SLC22A2 gây tích lũy platin làm suy thận, suy tủy, ảnh hưởng nặng nề hệ thần kinh. Chính vì vậy, để nâng cao kết quả trị liệu ung thư bên cạnh việc sử dụng thuốc kép cần thiết phải có một chất mang hiệu quả để giảm liều điều trị mà vẫn duy trì hiệu lực, qua đó giảm tác dụng phụ của thuốc.
1.5.3. Dược động học
Phân bố: thuốc được gắn với cisplatin nhiều hơn thuốc gắn với protein. Ban, đầu lượng protein gắn thấp, trong 4 giờ đầu chỉ có 29% carboplatin gắn với protein, sau 24 giờ thì 85 – 89% được gắn vào protein [40].
Chuyển hóa và thải trừ: trong 1 giờ sau khi truyền tĩnh mạch bằng một liều duy nhất, nồng độ trong huyết tương của platinum và platinum toàn phần giảm thành 2 pha theo động học thứ nhất. Trong giai đoạn đầu, platinum tự do có thời gian bán hủy khoảng 90 phút và thời gian bán hủy là khoảng 6 giờ trong giai đoạn sau. Hầu như sự bài tiết xảy ra trong 6 giờ đầu với 50 – 70% carboplatin được bài tiết trong vòng 24 giờ, 32% của liều dùng được thải ra dưới dạng nguyên vẹn, quá trình bài trừ chủ yếu qua thận [40]. Thời gian bán thải của carboplatin trong huyết tương là 1 – 2 giờ.
1.5.4. Dược lực học
Carboplatin là chống ung thư thuộc loại chất alkyl hóa có tác dụng gây độc tế bào. Carboplatin làm thay đổi cấu trúc và ức chế sự tổng hợp DNA bằng cách tạo liên kết chéo trong cùng 1 sợi hoặc giữa 2 sợi của phân tử DNA. Tuy nhiên, carboplatin không gây tác dụng đặc hiệu lên chu kỳ phân bào [40].
1.5.5. Tác dụng phụ
Carboplatin thường gây suy tủy xương ở người bệnh bị suy thận hoặc đã dùng thuốc chống ung thư (cisplatin). Bên cạnh đó, các tác dụng phụ về tiêu hóa, mắt, tai, thần kinh và thận cũng rất phổ biến. Tùy vào liều lượng carboplatin và cách dùng carboplatin đơn hay phối hợp với các loại thuốc khác mà mức độ của các tác dụng phụ này là khác nhau. Bên cạnh đó, chức năng thận, gan và cơ địa của người bệnh cũng là một trong những yếu tố quyết định mức độ ảnh hưởng của các tác dụng phụ khi sử dụng carboplatin [36].
1.5.6. Những thách thức trong sử dụng carboplatin
Mặc dù phác đồ điều trị kết hợp liệu pháp dựa trên bạch kim (cisplatin, carboplatin) với các tác nhân gây độc tế bào khác được sử dụng nhiều trong điều trị ung thư buồng trứng, nhưng việc sử dụng lâu dài các tác nhân này lại gây ra độc tính tích lũy. Có ba hạn chế chính khi sử dụng kết hợp carboplatin: phản ứng quá mẫn với carboplatin, độc tính trên thận và độc tính trên tai [41].
Phản ứng quá mẫn (HSR) với carboplatin đã được chứng minh là ở khoảng 15 – 20% phụ nữ được điều trị với thuốc này. Các triệu chứng của carboplatin HSR rất dễ bị nhầm lẫn với các tác nhân khác, đặc biệt là khi sử dụng cùng lúc các loại thuốc hóa trị.
Các di chứng có ý nghĩa lâm sàng khác như nhiễm độc thần kinh, suy tủy, độc tính trên thận và độc tính trên tai được ghi nhận thường do hóa trị liệu bằng các loại thuốc có gốc bạch kim gây ra.
1.6. Các nghiên cứu về hệ liposome mang thuốc chống ung thư
Trên thế giới:
Năm 2014, Maedeh và cộng sự đã tiến hành khảo sát các công thức nanoliposome mang thuốc paclitaxel với các tỷ lệ phosphatidylcholine, cholesterol, paclitaxel và liposome được biến tính với PEG2000 để tăng cường tính ổn định, hiệu quả, cũng như độ hịa tan của thuốc. Kết quả kích thước hạt của liposome và liposome biến tính PEG2000 nang hóa paclitaxel là 421,4 và 369,1 nm; hiệu suất mang thuốc lần lượt là 91,3% và 95,2%. Khả năng phóng thích paclitaxel từ hai cơng thức trong 28 giờ lần lượt là 5,53% và 5,02%. Kết quả độc tính cho thấy khi thuốc được nang hóa vào liposome biến tính PEG đã làm giảm độ độc (IC50= 79,8 ± 2,9 µg/mL) hơn thuốc được nang hóa liposome (IC50= 86,25 ± 3,4 µg/mL) và giảm đáng kể so với thuốc nguyên liệu là (IC50= 142 ± 6,6 µg/mL) [42].
Năm 2016 Jie và cộng sự đã tiến hành tổng hợp hệ liposome biến tính PEG mang đồng thời resveratrol và paclitaxel. Liposome tổng hợp có kích thước hạt là 50 nm với hiệu suất nang hóa trên 50%. Kết quả đánh giá độc tính tế bào trên dịng tế bào MFC-7 cho thấy liposome tổng hợp giúp tăng khả dụng và khắc phục được hiện tượng kháng thuốc trong điều trị bệnh [43].
Năm 2016, Zeng Chunying và các cộng sự của mình đã tổng hợp thành cơng nano liposome nang hóa oxaliplatin theo cơng thức bao gồm: HSPC, cholesterol và DSPE-PEG2000 với tỷ lệ %mol là 85:10:5, bằng phương pháp hydrat hóa màng mỏng kết hợp ép đùn qua màng polycarbonate (φ = 200 nm) và loại bỏ thuốc dư bằng phương pháp thẩm tách. Kết quả cho thấy nano liposome có kích thước hạt là 132,6 ± 0,9 nm với điện tích bề mặt là -5,8 ± 0,3 mV và hiệu suất mang thuốc đạt 90,5% [44].
Năm 2017, Majid Hasanzadegan và cộng sự đã đánh giá độc tính tế bào của hệ nanoliposome mang carboplatin được tổng hợp bằng phương pháp bay hơi pha đảo trên dòng tế bào ung thư buồng trứng và phổi. Nanoliposome đươc tổng hợp từ lecithin, carboplatin, PEG3350 và cholesterol. Nanoliposome-PEG cho kết quả giúp giảm độ độc của thuốc trên tế bào so với thuốc nguyên liệu. Kết quả này cho thấy tiềm năng của hệ nanoliposome mang thuốc trong việc thay thế các loại thuốc hóa