Chƣơng 1 LƢỢC KHẢO TÀI LIỆU
2.3. THỰC NGHIỆM
2.3.2. Tiến hành sắc ký lớp mỏng để định tính vitaminE trong các
mẫu
Chuẩn bị tấm bản mỏng:
Từ tấm bản mỏng thƣơng mại 2020 cm, dùng kéo cắt các bản với kích thƣớc 105 cm. Dùng bút chì để vạch nhẹ các nét mức xuất phát của dung môi (cách mép dƣới của bản mỏng 1,5 cm) và mức cuối cùng của dung môi (cách mép trên của bản mỏng 1 cm).
Chuẩn bị dung môi khai triển sắc ký:
Tách vitamin E từ các mẫu bằng phƣơng pháp sắc ký lớp mỏng với hệ dung môi khai triển là: Benzene : Ethyl acetate (96:4) cho kết quả tốt nhất (Võ Phùng Ngọc Yến, 2010).
Chuẩn bị dung dịch mẫu:
Chuẩn bị các mẫu cần phân tích và dung dịch vitamin E chuẩn. Các viên thuốc đƣợc cắt làm đôi, cho dịch thuốc chảy vào trong cốc và dùng methanol là dung mơi hịa tan để rửa sạch vỏ nang. Dung dịch vitamin E chuẩn cũng đƣợc pha với dung môi methanol. Tiến hành chấm các dung dịch mẫu và dung dịch vitamin E chuẩn lên bản mỏng. Một mẫu có thể chấm nhiều lần, nhƣng giữ cho vết chấm đừng lan rộng trên bản mỏng, vết này cách vết kia 1,5 cm và cách hai mép ngoài của bản là 1 cm. Lúc này kích thƣớc bản mỏng tùy thuộc vào số lƣợng các vết chấm.
Chuẩn bị bình giải ly bản mỏng:
Chuẩn bị bình có kích thƣớc lớn hơn kích thƣớc của tấm bản mỏng và có nắp đậy. Sau đó cho dung mơi triển khai sắc ký vào bình. Lƣu ý là dung mơi cho vào bình khơng đƣợc cao hơn mức (vạch) xuất phát của tấm bản mỏng.
Sau khi đã hoàn tất các khâu chuẩn bị cho việc tiến hành sắc ký, đặt tấm bản mỏng vào bình triển khai. Khoảng 30 phút sau là việc giải ly bản mỏng đã hoàn thành. Sau đó, đem bản mỏng soi dƣới đèn UV xem kết quả (Nguyễn Kim Phi Phụng, 2007).