ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
2.3.2. Cách lấy mẫu:
Chọn ngẫu nhiên 4 phường trong quận Đống Đa.Mỗi phường chọn ngẫu nhiên 3 cụm,mỗi cụm chọn ngẫu nhiên 4 tổ.Lập danh sách toàn bộ số nữ giới trong độ tuổi nghiên cứu làm khung chọn mẫu.Khung chọn mẫu được sắp xếp ngẫu nhiên theo nhóm tuổi và chọn ngẫu nhiên với khoảng cách là 4 kể từ người đầu danh sách.
Chọn ngẫu nhiên tương tự cho xã nông thôn ở huyện Kim Bảng, tỉnh Hà Nam.
2.3.3. Cỡ mẫu
Dựa vào kết quả testosterone huyết thanh toàn phần trong các lứa tuổi của các nghiên cứu trước [45],nồng độ testosterone tồn phần cho các nhóm tuổi ở bang miền Đông Nam của Australia như sau:
Với sai số 5% ta tính cỡ mẫu cho mỗi 1 lớp tuổi (1 lớp tuổi tương đương 10 năm theo cách phân chia lớp tuổi của WHO), dựa vào công thức:
: giá trị trung bình từ nghiên cứu trước
ε: Mức sai lệch tương đối giữa tham số mẫu và tham số quần thể (chọn ε= 0,2)
Như vậy cỡ mẫu tối thiểu trong nghiên cứu là 206 người
2.3.4.Qui trình nghiên cứu:
Các đối tượng đều được phỏng vấn bằng bộ câu hỏi sàng lọc, sau đó được các bác sỹ khám lâm sàng để thỏa mãn tiêu chuẩn loại trừ của nghiên cứu, sau đó các đối tượng được mời lấy máu làm xét nghiệm và các chỉ số nghiên cứu khác tại bệnh viện Bạch Mai.
Lập danh sách lấy mẫu, chọn ngẫu nhiên
Phỏng vẫn,khám lâm sàng,sàng lọc đối tượng nghiên cứu
Đối tượng loại trừ Danh sách đối tượng khỏe mạnh n=266
Lấy máu xét nghiệm và chỉ số nghiên cứu Xử lý mẫu máu, lưu trữ dữ liệu
Hình 1.10: Qui trình nghiên cứu
2.4.Các chỉ số nghiên cứu và phương pháp đo:
2.4.1.Các chỉ số nghiên cứu:
Mục tiêu Biến số Cách đo
Nồng độ TT huyết thanh. -Nồng độ TT toàn phần huyết thanh. -Biến liên tục. Định lượng bằng phương pháp miễn dịch điện hóa phát quang trên máy Elecsys 2010. Các yếu tố ảnh hưởng đến nồng độ testosterone toàn phần. -tuổi (năm). -chiều cao(h). -Cân nặng(kg). -BMI(kg/m2). -Biến liên tục.
-Tuổi: tính từ năm sinh (dương lịch) tới thời điểm nghiên cứu.
-Chiều cao: đo bằng thước đo nhân trắc.
-Cân nặng: đo bằng cân điện tử.
-BMI:tính theo công thức Kaup:BMI=P/h2. -Hút thuốc. -Uống rượu. -Uống café. -Chế độ luyện tập thể dục thể thao. -Biến nhị phân.
Trả lời qua bộ câu hỏi sàng lọc.
2.4.2.Dụng cụ và phương pháp định lượng testosterone toàn phần:
-Máy đo:Elecsys 2010.
-Mẫu phân tích: huyết thanh đối tượng nghiên cứu.
-Kít thuốc thử testosterone của hãng Roche:gồm một bộ 3 lọ
+Lọ M (nắp trắng),6,5ml:có vi hạt phủ streptavidin 0,72 mg/ml, chất bảo quản.
+Lọ R1(nắp xám),8ml:kháng thể đơn dòng kháng testosterone gắn biotin 55ng/ml, đệm phosphat 40mmol/L,pH 7.0,chất bảo quản.
+Lọ R2 (nắp đen), 8ml:dẫn xuất của testosterone được gắn với phức hợp ruthenium 3ng/ml: kháng nguyên tự do ANS/Norgestrel, đệm phosphat 40mmol/L,pH 7.0,chất bảo quản.
-Bước tiến hành:
+Máu được lấy trong ngày từ 8h đến 17h.Máu toàn phần chứa trong ống nghiệm khơng có chất chống đơng, để đơng tự nhiên và li tâm trong 30 phút sau khi lấy mẫu để tách huyết thanh.Mẫu huyết thanh của từng đối tượng được chia và các Eppendort (khoảng) 150l, bảo quản nhiệt độ -80oC cho tới khi xét nghiệm.
+Định lượng nồng độ testosterone huyết thanh bằng phương pháp điện hóa phát quang (ECLIA) trên máy Elecsys 2010, máy đo phổ ánh sáng phát ra từ mẫu thử một cách tự động,so sánh kết quả với đường cong chuẩn đã biết.Do đó biết nồng độ testosterone trong mẫu huyết thanh.
2.4.3.Dụng cụ và phương pháp đo các chỉ số nhân trắc:
-Dụng cụ: cân điện tử, thước đo nhân trắc có chia vạch tới milimet. -Cân nặng (kg): đối tượng nghiên cứu bỏ giầy dép,đồ dùng cá nhân, chỉ mặc quần áo mỏng khi cân, đọc số cân ở tư thế mắt nhìn vng góc với mặt kính đồng hồ.
-Chiều cao đứng (cm): đối tượng đứng thẳng, mắt nhìn thẳng, hai gót chân chạm gót, bàn chân mở một góc 60 độ, hai tay bng thẳng và úp vào mặt ngoài đùi.Khi đo đối tượng chạm gót,mơng, lưng,chẩm vào thước.Lấy số đo từ gót chân tới đỉnh đầu.
-Chỉ số BMI:là chỉ số khối của cơ thể, được viết tắt từ body mass index.BMI được tính bằng cơng thức của Kaup: BMI= P/h2, trong đó: P là cân nặng (kg), h: là chiều cao( mét).
2.5.Xử lí thống kê các số liệu nghiên cứu:
Các phương pháp thống kê được sử dụng trong nghiên cứu là: giá trị trung bình, phương sai, độ lệch chuẩn, tỉ lệ phần trăm, các thuật tốn tương quan tuyến tính hoặc phi tuyến được sử dụng để đánh giá vai trò của các yếu tố về địa dư,lối sống, đặc điểm hình thái,tuổi,sử dụng thuốc với nồng độ testosterone toàn phần.T-test được dùng để so sánh nồng độ testosterone huyết thanh tồn phần của 2 nhóm đối tượng nghiên cứu ở khu vực thành thị và nông thôn. ANOVA để so sánh nồng độ testosterone giữa các nhóm tuổi trong và ngoài độ tuổi sinh sản.
2.6.Đạo đức nghiên cứu:
Tham gia nghiên cứu là dựa trên sự tự nguyện, chấp thuận của các đối tượng nghiên cứu,các đối tượng này có quyền dừng không tham gia nghiên cứu ở bất cứ thời điểm này.
Đối tượng được quyền biết mục đích và ý nghĩa của nghiên cứu.Sau khi định lượng được nồng độ testosterone các đối tượng được quyền biết về kết quả của mình.Và các kết quả này phải được lưu giữ bảo mật,an toàn, bảo đảm quyền riêng tư của mỗi cá nhân.
Trong quá trình hỏi, khám chữa bệnh,và sau khi có kết quả về nồng độ testosterone, nếu phát hiện được các bệnh lí bất thường thì các đối tượng sẽ được tư vấn, giới thiệu tới nơi có điều kiện chuyên khoa để khám và điều trị.
CHƯƠNG 3