Lấy lOg dược liệu cho vào bình nón có dung tích 250ml. Thêm 100ml nước cất, ngâm ở nhiệt độ phòng 24 giờ. Gạn dịch lọc vào cốc có mỏ, thêm vào dịch gạn 5ml dung dịch chì acetat 30%, khuấy đều, để lắng, lọc qua giấy lọc. Chuyển dịch lọc vào bình gạn 100ml, lắc với cloroform 3 lần, mỗi lần 5ml. Gạn lớp chloroform vào cốc có mỏ, dịch gạn phải trong suốt, nếu còn nước phải loại nước bằng Na2S04 khan, chia đều dịch chiết chloroform vào 4 ống nhỏ, cô trên nồi cách thủy đến khô, cắn còn lại tiến hành làm các phản ứng:
• Phản ứng Lỉebermann:
Cho vào ống nghiệm chứa cắn lml alhydrid acetic, lắc đều cho tan hết cắn, cho thêm đồng lượng acid sulfuric đặc theo thành ống nghiệm cho phân thành 2 lớp.
Kết quả: Không thấy xuất hiện vòng đỏ tím giữa 2 lớp phân cách (phản ứng âm tính đối với cả thân và lá).
• Phản ứng Baljet:
Cho vào ống nghiệm chứa cắn lml ethanol 90° thêm thuốc thử Baljet vừa mới pha (1 phần acid picric 1% - 9 phần NaOH 10%)
Kết quả: Không thấy xuất hiện màu vàng da cam (phản ứng âm tính đối với cả thân và lá).
Cho vào ống nghiệm chứa cắn lml ethanol 90°, lắc cho tan hết cắn, thêm 1 giọt thuốc thử Natri prussiat 0,5% và 2 giọt NaOH 10%.
Kết quả: Không xuất hiện màu đỏ (phản ứng âm tính đối với cả thân và lá).
• Phản ứng Keller - Kiliani:
Cho vào ống nghiệm chứa cắn lml FeCl3 5% trong acid acetic, nghiêng ống nghiệm, cho từ từ acid sulfuric đặc theo thành ống nghiệm.
Kết quả: Không thấy vòng đỏ giữa 2 lớp phân cách (phản ứng âm tính đối với cả thân và lá).
Kết luận: Không có glycosid tim trong thân và lá cây Xạ đen 1.