KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
3.1. Quy trình sản xuất hƣơng xua muỗi chứa tinh dầu bạch đàn chanh Sơ đồ quy trình sản xuất hƣơng chứa tinh dầu bạc đàn chanh
Chuẩn bị nguyên liệu và máy làm hương
Trộn nguyên liệu trong máy trộn bột
Chạy máy làm hương
Phơi hương
Tẩm tinh dầu
- Quy trình hƣớng dẫn tẩm tinh dầu vào hƣơng mộc với nồng độ 10%, 20%, 30%.
Bƣớc 1: Chuẩn bị nguyên liệu
+ Hương mộc
+ Tinh dầu bạch đàn chanh Citrolellal độ tinh khiết > 85% + Dầu nền Dipropylene Glycol (DPG)
+ Ống thủy tinh 25 x 250 mm + Pipet 5 ml
+ Giá đỡ ống nghiệm + Giá phơi hương
Bƣớc 2: Pha dung dịch để tẩm cho 1 bó hương (18 que)
+ Cho vào ống thủy tinh 12ml dầu nền DPG bằng pipet.
+ Thêm tinh dầu và lắc đều để tinh dầu hòa tan vào DPG (với nồng độ 10%, 20%, 30% số ml tinh dầu lần lượt là: 4,03ml; 9,06ml; 15,54ml)
Như vậy với lượng tinh dầu này sẽ thấm vào hương để đạt được nồng độ tinh dầu trong 1 que hương là 10%, 20%, 30%.
Bƣớc 3: Tẩm tinh dầu
Đặt bó hương vào ống thủy tinh đ pha dung dịch tẩm hương và ng m trong 24 giờ, trong quá trình này dung dịch sẽ thấm hết vào hương.
Bƣớc 4: Bỏ hương lên giá
- Sau 24 giờ, rút hương phơi lên gia đỡ, đảm bảo khơng cịn dung dịch trong ống thủy tinh.
- Phơi hương trong 30 phút.
Bƣớc 5: Đóng gói .
+ Đóng dấu số lơ, ngày sản xuất và hạn sử dụng lên nhãn. + Cho vào mỗi túi nilon 18 que hương, tra nh n, dán bao. + Túi được dán kín.
3.2. Hiệu lực diệt muỗi của hƣơng xua muỗi tại phịng thí nghiệm
3.2.1. Hiệu lực diệt muỗi An. minimus của hương xua
Kết quả thử nghiệm hiệu lực diệt muỗi bằng buồng thử 70cm x 70cm x 70cm được thể hiện qua bảng 1, 2 và 3
Bảng 1. Hiệu lực diệt muỗi An. minimus của hƣơng 10% tinh dầu Chỉ số theo dõi Lần 1 Lần 2 Lần 3 Trung bình 3 lần
thử nghiệm
Số muỗi thử nghiệm 20 20 20 20
Số muỗi ngã sau 20 phút 20 20 20 20
Số muỗi chết sau 24 giờ 20 20 20 20
Tỷ lệ muỗi chết sau 24 giờ
(%) 100 100 100 100
KT50 (Phút) 13,23 13,83 14,43 13,83
KT90(Phút) 16,28 15,55 15,13 15,65
Kết quả bảng 1 cho thấy hương xua tinh dầu 10% sau khi thử 24 giờ tiếp xúc có hiệu lực diệt muỗi An. minimus trong phịng thí nghiệm là 100%.
Hương xua có hiệu lực diệt muỗi tốt. Thời gian trung bình hạ gục muỗi KT50 = 13,83 phút; KT90 = 15,65 phút.
Bảng 2. Hiệu lực diệt muỗi An. minimus của hƣơng 20% tinh dầu Chỉ số theo dõi Lần 1 Lần 2 Lần 3 Trung bình 3 lần
thử nghiệm
Số muỗi thử nghiệm 20 20 20 20
Số muỗi ngã sau 20 phút 20 20 20 20
Số muỗi chết sau 24 giờ 20 20 20 20
Tỷ lệ muỗi chết sau 24 giờ (%)
100 100 100 100
KT50 (Phút) 6,52 4,35 6,64 5,84
KT90(Phút) 9,42 7,8 9,6 8,94
Kết quả bảng 2 cho thấy hương chứa tinh dầu 20% sau khi thử 24 giờ có hiệu lực diệt muỗi An. minimus trong phịng thí nghiệm là 100%. Hương xua có hiệu lực diệt muỗi tốt. Thời gian hạ gục muỗi KT50 = 5,84 phút; KT90 = 8,94 phút.
Bảng 3. Hiệu lực diệt muỗi An. minimus của hƣơng 30% tinh dầu Chỉ số theo dõi Lần 1 Lần 2 Lần 3 Trung bình 3
lần thử nghiệm
Số muỗi thử nghiệm 20 20 20 20
Số muỗi ngã sau 20 phút 20 20 17 19
Số muỗi chết sau 24 giờ 20 20 20 20
Tỷ lệ muỗi chết sau 24 giờ (%) 100 100 100 100
KT50 (Phút) 5,00 2,75 3,84 3,86
KT90(Phút) 8,07 5,54 7,07 6,89
Kết quả bảng 3 cho thấy hương chứa tinh dầu 30% sau khi thử 24 giờ có hiệu lực diệt muỗi An. minimus trong phịng thí nghiệm là 100%. Hương xua có hiệu lực diệt muỗi tốt. Thời gian hạ gục muỗi KT50 = 3,86 phút; KT90 = 6,89 phút.
So sánh KT50, KT90 của muỗi An. minimus của hương có nồng độ tinh
dầu 20% và 10%
Bảng 4. So sánh KT50, KT90 của muỗi An. minimus của hƣơng 20% và 10% tinh dầu Nồng độ tinh dầu So sánh KT50 So sánh KT90 TB ± SD(Phút) p TB ± SD(Phút) p 10% 13,83 ± 0,60 < 0,01 15,65± 0,58 < 0,01 20% 5,84 ± 1,29 8,94± 0,99
Qua bảng 4 cho thấy hương xua muỗi ở nồng độ tinh dầu 20% có thời gian ngã KT50 và KT90 của muỗi An. minimus sớm hơn nồng độ tinh dầu
10% có ý nghĩa thống kê (p<0,01). So sánh KT50 của muỗi An. minimus của hương có nồng độ tinh dầu 20% và 30%
Bảng 5. So sánh KT50, KT90 của muỗi An. minimus của hƣơng 20% và 30% tinh dầu Nồng độ tinh dầu So sánh KT50 So sánh KT90 TB ± SD (Phút) p TB ± SD(Phút) p 20% 5,84 ± 1,29 > 0,05 8,94± 0,99 > 0,05 30% 3,86 ± 1,13 6,89 ± 1,27
Qua bảng 5 cho thấy hương xua muỗi ở nồng độ tinh dầu 20% có thời gian ngã KT50 và KT90 của muỗi An. minimus tương tự với nồng độ tinh dầu 10% (p>0,05).
3.2.2. Hiệu lực diệt muỗi Ae. aegypti của hương xua
Bảng 6. Hiệu lực diệt muỗi Ae. aegypti của hƣơng 10% tinh dầu Chỉ số theo dõi Lần 1 Lần 2 Lần 3 Trung bình 3
lần thử nghiệm
Số muỗi thử nghiệm 20 20 20 20
Số muỗi ngã sau 20 phút 2 2 2 2
Số muỗi chết sau 24 giờ 15 16 17 16
Tỷ lệ muỗi chết sau 24 giờ (%)
75 80 85 80
Kết quả bảng 6 cho thấy hương chứa tinh dầu 10% sau khi thử 24 giờ có hiệu lực diệt muỗi Ae. aegypti trong phịng thí nghiệm là 80%. Hương xua có hiệu lực diệt muỗi trung bình. Số muỗi ng sau 20 phút khơng đủ 50% để tính KT50 và KT90.
Bảng 7. Hiệu lực diệt muỗi Ae. aegypti của hƣơng 20% tinh dầu Chỉ số theo dõi Lần 1 Lần 2 Lần 3 Trung bình 3
lần thử nghiệm
Số muỗi thử nghiệm 20 20 20 20
Số muỗi ngã sau 20 phút 20 20 18 19,33
Số muỗi chết sau 24 giờ 19 20 18 19,00
Tỷ lệ muỗi chết sau 24 giờ (%) 95 100 90 95
KT50 (Phút) 5,06 4,17 10,69 6,64
Kết quả bảng 7 cho thấy hương chứa tinh dầu 20% sau khi thử 24 giờ có hiệu lực diệt muỗi Ae. aegypti trong phịng thí nghiệm là 95%. Hương xua có hiệu lực diệt muỗi tốt. Thời gian hạ gục muỗi KT50 = 6,64 phút.
Bảng 8. Hiệu lực diệt muỗi Ae. aegypti của hƣơng 30% tinh dầu Chỉ số theo dõi Lần 1 Lần 2 Lần 3 Trung bình 3
lần thử nghiệm
Số muỗi thử nghiệm 20 20 20 20
Số muỗi chết sau 24 giờ 19 20 19 19,33
Tỷ lệ muỗi chết sau 24 giờ (%) 95 100 95 96,67
KT50 (Phút) 10,63 7,89 10,23 9,58
KT90(Phút) 16,15 15,24 15,94 15,77
Kết quả bảng 8 cho thấy hương chứa tinh dầu 30% sau khi thử 24 giờ có hiệu lực diệt muỗi Ae. aegypti trong phịng thí nghiệm là 96,67%. Hương
xua có hiệu lực diệt muỗi tốt. Thời gian hạ gục muỗi KT50 = 9,58 phút; KT90 = 15,77 phút. So sánh tỷ lệ chết của muỗi Ae. aegypti của hương có nồng độ tinh dầu 20% và 10%
Bảng 9. So sánh tỷ lệ chết của muỗi Ae. aegypti của hƣơng 20% và 10% tinh dầu Nồng độ tinh dầu So sánh tỷ lệ chết của muỗi TB ± SD (%) p 10% 80 ± 0,50 < 0,05 20% 95 ± 0,50
Qua bảng 9 cho thấy hương xua muỗi ở nồng độ tinh dầu 20% có tỷ lệ chết của muỗi Ae. aegypti cao hơn nồng độ tinh dầu 10% có ý nghĩa thống kê (p<0,05). So sánh tỷ lệ chết của muỗi Ae. aegypti của hương có nồng độ tinh dầu 20% và 30%
Bảng 10. So sánh tỷ lệ chết của muỗi Ae. aegypti của hƣơng 20% và 30% tinh dầu Nồng độ tinh dầu So sánh tỷ lệ chết của muỗi TB ± SD (%) p 20% 95,00 ± 0,50 > 0,05 30% 96,67 ± 2,89
Qua bảng cho thấy hương xua muỗi ở nồng độ tinh dầu 20% và 30% có tỷ lệ chết của muỗi Ae. aegypti giống nhau (p>0,05).
3.2.3. Hiệu lực diệt muỗi Cx. quinquefasciatus của hương xua
Bảng 11. Hiệu lực diệt muỗi Cx. quinquefasciatus của hƣơng 10% tinh dầu
Chỉ số theo dõi Lần 1 Lần 2 Lần 3 Trung bình 3
lần thử nghiệm
Số muỗi thử nghiệm 20 20 20 20
Số muỗi ng sau 20 phút 2 1 1 1,33
Số muỗi chết sau 24 giờ 16 15 12 14,33
Tỷ lệ muỗi chết sau 24 giờ (%) 80 75 60 71,67
Kết quả bảng 11 cho thấy hương chứa tinh dầu 10% sau khi thử 24 giờ có hiệu lực diệt muỗi Cx. quinquefasciatus trong phịng thí nghiệm là 71,67%. Hương xua có hiệu lực diệt muỗi trung bình.
Bảng 12. Hiệu lực diệt muỗi Cx. quinquefasciatus của hƣơng 20% tinh dầu Chỉ số theo dõi Lần 1 Lần 2 Lần 3 Trung bình 3
lần thử nghiệm
Số muỗi thử nghiệm 20 20 20 20
Số muỗi ngã sau 20 phút 20 20 20 20
Số muỗi chết sau 24 giờ 19 20 20 19,67
Tỷ lệ muỗi chết sau 24 giờ (%) 95 100 100 98,33
KT50 (Phút) 6,01 6,07 6,13 6,07
KT90(Phút) 10,07 9,91 10,36 10,11
Kết quả bảng 12 cho thấy hương chứa tinh dầu 20% sau khi thử 24 giờ có hiệu lực diệt muỗi Cx. quinquefasciatus trong phịng thí nghiệm là 98,33%. Hương xua có hiệu lực diệt muỗi tốt. Thời gian hạ gục muỗi KT50 = 6,07 phút; KT90 = 10,11 phút.
Bảng 13. Hiệu lực diệt muỗi Cx. quinquefasciatus của hƣơng 30% tinh dầu
Chỉ số theo dõi Lần 1 Lần 2 Lần 3 Trung bình 3
lần thử nghiệm
Số muỗi thử nghiệm 20 20 20 20
Số muỗi ng sau 20 phút 20 20 20 20,00
Số muỗi chết sau 24 giờ 20 20 20 20,00
(%)
KT50 (Phút) 5,03 5,15 5,12 5,10
KT90(Phút) 8,09 9,11 9,25 8,82
Kết quả bảng 13 cho thấy hương chứa tinh dầu 30% sau khi thử 24 giờ có hiệu lực diệt muỗi Cx. quinquefasciatus trong phịng thí nghiệm là 100%. Hương xua có hiệu lực diệt muỗi tốt. Thời gian hạ gục muỗi KT50 = 5,10 phút; KT90 = 8,82 phút.
So sánh tỷ lệ chết của muỗi Cx. quinquefasciatus của hương có nồng độ tinh dầu 20% và 10%
Bảng 14. So sánh tỷ lệ chết của muỗi Cx. quinquefasciatus của hƣơng 20% và 10% tinh dầu Nồng độ tinh dầu So sánh tỷ lệ chết của muỗi TB ± SD (%) p 10% 71,67 ± 10,41 < 0,05 20% 98,33 ± 2,89
Qua bảng 14 cho thấy hương xua muỗi ở nồng độ tinh dầu 20% có tỷ lệ chết của muỗi Cx. quinquefasciatus cao hơn nồng độ tinh dầu 10% có ý nghĩa
thống kê (p<0,05). So sánh tỷ lệ chết của muỗi Cx. quinquefasciatus của hương có nồng độ tinh dầu 20% và 30%
Bảng 15. So sánh tỷ lệ chết của muỗi Cx. quinquefasciatus của hƣơng 20% và 30% tinh dầu
Nồng độ tinh dầu So sánh tỷ lệ chết của muỗi
TB ± SD (%) p
20% 98,33 ± 2,89
> 0,05
30% 100,00 ± 0,00
Qua bảng 15 cho thấy hương xua muỗi ở nồng độ tinh dầu 20% và 30% có tỷ lệ chết của muỗi Cx. quinquefasciatus giống nhau (p>0,05).
Từ các so sánh trên cho thấy hương xua có nồng độ tinh dầu 20% cao hơn 10% nhưng lại giống với nồng độ 30% về KT50, KT90 và tỷ lệ muỗi chết. Vì vậy chúng tơi lựa chọn hương xua có nồng độ tinh dầu 20% để sản xuất và thử nghiệm tại thựa địa để đánh giá hiệu quả xua muỗi, tác dụng không mong muốn và sự chấp nhận của cộng đồng.
3.2.4. Thảo luận về hiệu lực diệt muỗi của hương xua chứa tinh dầu trong phịng thí nghiệm phịng thí nghiệm
Từ kết quả trên cho thấy hương xua ở cả ba nồng độ đều có hiệu lực diệt muỗi tốt với muỗi An. minimus với tỷ lệ chết sau 24h thử nghiệm là 100%.
Hương xua có nồng độ 20% và 30% tinh dầu có hiệu lực diệt muỗi Ae. aegypti tốt với tỷ lệ muỗi chết sau 24h thử nghiệm lần lượt là 95% và
96,67%. Hương xua có nồng độ 20% và 30% tinh dầu có hiệu lực diệt muỗi
Cx. quinquefasciatus tốt với tỷ lệ muỗi chết sau 24h thử nghiệm lần lượt là 98,33% và 100%. Theo tiêu chuẩn của của tổ chức Y tế thế giới [21] và Bộ Y tế về quy trình đánh giá hố chất, chế phẩm dùng trong lĩnh vực gia dụng và y tế [26] thì hiệu lực diệt muỗi của hương xua trong phịng thí nghiệm cho kết quả tốt. Như vậy hiệu lực diệt của hương xua với muỗi An. minimus là tương đương nhau giữa các thời điểm thử cho thấy tính đồng đều của hương xua cũng như hiệu lực theo thời gian là tương đối tốt. Kết quả tương tự với kết quả thử nghiệm của Hamdan Ahmad (2015) tại Penang, Malaysia, Transfluthrin 3% có hiệu lực diệt muỗi Ades aegypti chủng phịng thí
nghiệm tốt (100%).
Từ các so sánh kết quả trên cho thấy hương xua có nồng độ tinh dầu 20% cao hơn 10% nhưng lại giống với nồng độ 30% về KT50, KT90 và tỷ lệ muỗi chết. Vì vậy chúng tơi lựa chọn hương xua có nồng độ tinh dầu 20% để sản xuất và thử nghiệm tại thựa địa để đánh giá hiệu quả xua muỗi, tác dụng không mong muốn và sự chấp nhận của cộng đồng.
Hiện nay, các biện pháp phòng chống muỗi phổ biến nhất đang được sử dụng trên diện rộng ở Việt Nam vẫ là dùng các loại hóa chất có nguồn gốc ngoại nhập. Tuy nhiên các hóa chất này g y độc hại tới sức khỏe con người đặc biệt là trẻ nhỏ. Chính vì vậy việc nghiên cứu các biện pháp phịng chống muỗi từ thảo mộc, thân thiện với môi trường lại không ảnh hưởng tới sức khỏe con người thực sự cần thiết. Với kết quả nêu trên chúng ta có thể tiếp tục nghiên cứu ứng dụng sản xuất hương xua từ tinh dầu bạch đàn chanh vào sử dụng rộng rãi ở cộng đồng để phòng chống muỗi.
3.3. Hiệu lực xua muỗi của hƣơng chứa tinh dầu bạch đàn chanh
3.3.1. hành phần ài và hoạt động đốt mồi của uỗi
Bảng 16. Thành phần, tỷ lệ các giống muỗi tại x Tân Sơn TT Giống Số lƣợng (con) Tỷ lệ (%) 1 Aedes 4 0,17 2 Anopheles 642 26,55 3 Armigeres 78 3,23 4 Culex 1588 65,67 5 Mansonia 106 4,38 Tổng 2418 100,00
Hình 2. Thành phần các giống muỗi tại x Tân Sơn
Bảng 16 và hình 2 cho thấy, tại điểm nghiên cứu bằng các phương pháp điều tra: mồi người trong nhà ban đêm, soi chuồng gia súc ban đêm và bẫy đèn trong nhà ban đêm đ thu thập được 5 giống muỗi. Trong đó, tỷ lệ gống muỗi Culex cao nhất chiếm 65,67% và thấp nhất là Aedes (0,17%).
Bảng 17. Thành phần loài, mật độ muỗi tại x Tân Sơn
TT Loài M.N.T.N Con/ngƣời/đêm S.C.G.S Con/giờ/ngƣời B.Đ.T.N Con/đèn/đêm
S.lượng M.độ S.lượng M.độ S.lượng M.độ
1 Ae. albopictus 4 0,22 0 0 0 0
2 An. sinensis 95 5,28 458 19,08 8 1,33
3 An. tessellatus 2 0,11 37 1,54 12 2,00
4 An. vagus 1 0,06 16 0,67 13 2,17
6 Ar. subalbatus 20 1,11 36 1,50 14 2,33 7 Cx. quinquefasciatus 864 48,00 534 22,25 125 20,8 3 8 Cx. tritaeniorhynchus 11 0,61 29 1,21 5 0,83 9 Cx. vishnui 8 0,44 12 0,50 0 0 10 Ma. annulifera 31 1,72 16 0,67 0 0 11 Ma. uniformis 41 2,28 6 0,25 12 2,00
Ghi chú: M.N.T.N: Mồi người trong nhà ban đêm; SCGSĐ: soi chuồng gia súc ban đêm; B.Đ.T.N: Bẫy đèn trong nhà ban đêm.
Tại xã T n Sơn đ điều tra được 11 loài muỗi thuộc 5 giống. Trong đó, lồi Cx. quinquefasciatus bắt được nhiều nhất ở tất cả các phương pháp điều tra, An. sinensis chủ yếu bắt được bằng phương pháp soi chuồng gia súc.
3.3.2. Hoạt động đốt mồi của muỗi theo thời gian tr ng đê
Hoạt động đốt mồi của muỗi từ 18 - 24 giờ được trình bày tại Bảng 18 và hình 3
Bảng 18. Hoạt động đốt mồi của muỗi theo thời gian T T
T Loài
Số lƣợng muỗi mồi ngƣời trong nhà theo giờ (con) 18 - 19 19 - 20 20 - 21 21 - 22 22 - 23 23 - 24 1 Ae. albopictus 0 3 0 1 0 0 2 An. sinensis 10 18 27 20 17 3 3 An. tessellatus 1 0 0 1 0 0 4 An. vagus 0 0 1 0 0 0 5 Ar. kuchingensis 0 0 3 0 0 0 6 Ar. subalbatus 3 2 6 6 3 0 7 Cx. quinquefasciatus 83 208 221 193 105 54 8 Cx. tritaeniorhynchus 1 3 3 4 0 0 9 Cx. vishnui 0 3 3 2 0 0 10 Ma. annulifera 1 6 7 13 4 0 11 Ma. uniformis 2 13 11 15 0 0
Hình 3. Hoạt động đốt mồi của theo thời gian trong đêm
Theo hình 3 cho thấy hoạt động đốt muồi của muỗi kéo dài suốt thời