Ký hiệu Tên thuốc Nhà sản xuất Số đăng ký
T1 Hagimox (Amoxicillin 500mg)
Công ty cổ phần Dược
Hậu Giang VD-24602-16
T2 Amoxicillin 500mg Công ty cổ phần dược
phẩm và sinh học y tế VD-24579-16 T3 Amoxicillin 250mg Công ty cổ phần dược phẩm Trung ương Vidipha VD-20471-14 T4 Moxilen (Amoxicillin 500mg) Modochemie Ltd - Factory B (Cyprus) VN-17099-13 T5 Amoxicillin 250mg Công ty cổ phần dược
phẩm Minh dân VD-18307-13
T6 Moxacin (Amoxicillin 500mg)
Công ty cổ phần xuất
nhập khẩu y tế Domesco VD−14845−11 T7 Amoxicillin 500mg Brawn Laboratories
Limited (India) VN-15238-12 T8 Amoxy (Amoxicillin 250mg) Flamingo Pharmaceuticals Ltd. (India) VN-17196-13 T9 Fabamox (Amoxicillin 500mg) Công ty cổ phần dược phẩm Trung ương I VD-25792-16 T10 Amoxicillin 500mg Công ty cổ phần hóa –
dược phẩm Mekophar VD-20020-13
❖ Phương pháp phổ hồng ngoại
Tiến hành định lượng Amoxicillin bằng phương pháp FTIR dựa trên các điều kiện phân tích đã khảo sát.
Hình 2.3: Viên nén dùng để đo phổ hồng ngoại
❖ Phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao theo quy trình Dược điển Việt
Nam 5
- Dung dịch đệm pH 5,0: Hòa tan 13,6 g kali dihydrophosphat trong 2000 ml nước, điều chỉnh tới pH 5,0 0,1 với dung dịch kali hydroxyd 45%.
- Pha động: Dung dịch đệm pH 5.0 - acetonitril (96 : 4). Điều chỉnh tỷ lệ acetonitril để đạt điều kiện sắc ký yêu cầu (nếu cần).
- Dung dịch chuẩn: Pha Amoxicillin trihydrat chuẩn trong dung dịch A để có nồng độ Amoxicillin chính xác khoảng 1,0 mg/ml (chỉ dùng trong vòng 6 giờ).
- Dung dịch thử: Cân thuốc trong từng nang của 20 nang, tính khối lượng trung bình, trộn đều, rồi nghiền thành bột mịn. Cân chính xác một lượng bột thuốc tương ứng khoảng 0,200 g Amoxicillin, pha trong dung dịch A vừa đủ 200,0 ml, lắc siêu âm để hịa tan và lọc qua màng lọc có kích thước lỗ lọc 0,45 m (chỉ dùng trong vòng 6 giờ).
- Điều kiện sắc ký:
+ Cột Purospher Star Rp18e (250 4 mm, 5 m); + Detector quang phổ tử ngoại đặt ở bước sóng 230 nm; + Tốc độ dịng: 1,5 ml/min;
+ Thể tích tiêm: 10 l; + Nhiệt độ cột: 250C. - Cách tiến hành:
Kiểm tra khả năng thích hợp của hệ thống: Tiêm dung dịch chuẩn, tính trên peak chính thu được trên sắc ký đồ: hệ số dung lượng phải nằm trong khoảng 1,1 đến 2,8; số đĩa lý thuyết của cột không nhỏ hơn 1700; hệ số đối xứng không lớn hơn 2,5 và độ lệch chuẩn tương đối của các diện tích peak từ 6 lần tiêm lặp lại mẫu chuẩn không lớn hơn 2,0 %.
Tiêm riêng biệt dung dịch thử và dung dịch chuẩn.
Tính hàm lượng Amoxicillin, C16H19N3O5S, trong viên từ diện tích peak trên sắc ký đồ của dung dịch chuẩn và dung dịch thử và hàm lượng C16H19N3O5S trong Amoxicillin trihydrat chuẩn.
❖ So sánh kết quả định lượng Amoxicillin giữa hai phương pháp
Đánh giá kết quả định lượng Amoxicillin bằng cách đánh giá độ lệch chuẩn tương đối giữa hai phương pháp.
2.2.4. Các phương pháp đánh giá kết quả
- Đánh giá kết quả trên cơ sở các yêu cầu của AOAC về xác nhận giá trị sử dụng của phương pháp.
- Phương pháp kiểm định T-Test (kiểm định sự khác biệt) được sử dụng trong kiểm định sự khác biệt về giá trị trung bình của tổng thể với một giá trị cho trước, hoặc kiểm định sự khác biệt về giá trị trung bình giữa hai tổng thể.
Dựa vào các giá trị tStat và tCritical để đánh giá sự tương đồng giữa 2 kết quả phân tích. [6]
- Phân tích phương sai (Analysis of Variance) hay còn gọi là kiểm định ANOVA là một kỹ thuật thống kê tham số được sử dụng để so sánh các bộ dữ liệu. Nói một cách dễ hiểu, phân tích ANOVA có chức năng đánh giá sự khác biệt tiềm năng trong một biến phụ thuộc mức quy mô bằng một biến mức danh nghĩa có từ 2 loại trở lên. Các nhà phân tích sử dụng thử nghiệm ANOVA để xác định ảnh hưởng của các biến độc lập đối với biến phụ thuộc trong nghiên cứu hồi quy. ANOVA còn được gọi là phân tích phương sai Fisher.[6]
CHƯƠNG 3
KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
3.1. Khảo sát các điều kiện định lượng Amoxicillin
3.1.1. Lựa chọn vùng phổ hồng ngoại để định lượng Amoxicillin
Hình 3.1: Phổ FTIR của Natri croscarmellose
Hình 3.3: Phổ FTIR của Natri laurylsufat
Hình 3.5: Phổ FTIR của viên nang Amoxicillin
So sánh phổ của Amoxicillin và phổ của các tá dược thường được sử dụng trong thành phần của viên nang Amoxicillin.
Vùng phổ 1815 - 1730 cm−1, xuất hiện peak đại diện cho nhóm cacbonyl của Amoxicillin, khơng có sự ảnh hưởng của các tá dược.
Do đó, đây là dải phổ được chọn để phân tích định lượng Amoxicillin.
3.1.2. Khảo sát tỉ lệ khối lượng Amoxicillin/KBr
Tiến hành cân chất chuẩn Amoxicillin một lượng có hàm lượng thay đổi trong khoảng 2 - 20 mg và KBr (đã được sấy đến khối lượng không đổi và nghiền mịn) sao cho hàm lượng tổng gồm mẫu bột và KBr là 200 mg. Các mẫu được trộn đều và đồng nhất trên cối mã não. Chuyển toàn bộ vào bộ dụng cụ ép viên, nén viên trong 10 phút, tiến hành đo phổ IR trong vùng 1815 - 1730 cm-1, độ hấp thụ A được xác định dựa trên chiều cao đỉnh peak. Kết quả được trình bày trong bảng sau: