PH ƯƠ NG PHÁP NGHIÊN C Ứ

2.2.1. Thi t k  nghiên c uế ế ứ

Phương pháp nghiên c u mơ t  c t ngang; so sánh có đ i ch ng.ứ ả ắ ố ứ 2.2.2. C  m u nghiên c uỡ ẫ ứ

Trong các nghiên c u v  dioxin thứ ề ường áp d ng theo chi n lụ ế ượ ấc l y  m u c a EPA hẫ ủ ướng d n c  th  v  l y s  lẫ ụ ể ề ấ ố ượng m u và cách ch n m uẫ ọ ẫ   máu người. M t khác trong nghiên c u này có đ nh lặ ứ ị ượng n ng đ  các ch tồ ộ ấ   dioxin trong máu b ng phằ ương pháp GCMS đ i v i t ng m u đ n riêng lố ớ ừ ẫ ơ ẻ  vì v y s  r t t n kém n u tính c  m u m c dù s  lậ ẽ ấ ố ế ỡ ẫ ặ ố ượng m u ban đ u làẫ ầ   l n. ớ

Khi phân tích dioxin b ng phằ ương pháp GCMS nh n th y có 01 m uậ ấ ẫ   máu (m u có mã s : SBĐN 194) có n ng đ  lipid trong huy t thanh r tẫ ố ồ ộ ế ấ   th p và h u h t các n ng đ  PCDDs và PCDFs đ u dấ ầ ế ồ ộ ề ưới gi i h n phátớ ạ   hi n, nên lo i ra kh i phân tích th ng kê. ệ ạ ỏ ố

T ng s  m u phân tích dioxin theo phổ ố ẫ ương pháp GCMS đ t yêu c uạ ầ   c a các sân bay là 139 m u. S  lủ ẫ ố ượng m u đ nh lẫ ị ượng dioxin b ng phằ ương  pháp GCMS c  th  nh  sau:ụ ể ư

­ SBBH: 50 m uẫ ­ SBĐN: 39 m uẫ ­ SBPC: 30 m uẫ ­ SBSV: 20 m uẫ

Trong 139 m u s  d ng phân tích đ nh lẫ ử ụ ị ượng n ng đ  các hormone,ồ ộ   chúng tơi th y có 01 m u khơng đ  các thơng tin v  s c kh e (m u có mãấ ẫ ủ ề ứ ỏ ẫ  

s : SBPC 132) nên m u đó đố ẫ ược lo i ra. Nh  v y t ng s  c  b n sân bayạ ư ậ ổ ố ả ố   có 138 m u đẫ ược phân tích đ nh lị ượng n ng đ  các hormone. S  lồ ộ ố ượng  m u đ nh lẫ ị ượng n ng đ  các hormone c  th  nh  sau:ồ ộ ụ ể ư

­ SBBH: 50 m uẫ ­ SBĐN: 39 m uẫ ­ SBPC: 29 m uẫ ­ SBSV: 20 m uẫ 2.2.3. Phương pháp ch n m uọ ẫ Áp d ng phụ ương pháp ch n m u có ch  đích.ọ ẫ ủ

T i m i sân bay, căn c  vào t ng qn s , c  c u đ  tu i, th i gianạ ỗ ứ ổ ố ơ ấ ộ ổ ờ   công tác, nhi m v  đ m nhi m, quân y đ n v  l p danh sách nh ng đ iệ ụ ả ệ ơ ị ậ ữ ố   tượng phù h p, sau đó ch n nh ng đ i tợ ọ ữ ố ượng vào nghiên c u cho đ n khiứ ế   đ  s  lủ ố ượng.

2.2.4. Các bước ti n hành nghiên c uế ứ

Bước 1: Thi t k  các phi u thu th p thông tin đ i tế ế ế ậ ố ượng nghiên c u,ứ   l p k  ho ch đi thu th p m u, xin ý ki n ch  đ o c a Th  trậ ế ạ ậ ẫ ế ỉ ạ ủ ủ ưởng Quân  ch ng Phịng Khơng ­ Khơng Qn, liên h  l ch công tác v i các đ n v .ủ ệ ị ớ ơ ị

Bước 2: Kh o sát các khu v c nghiên c u, l p danh sách đ i tả ự ứ ậ ố ượng  nghiên c u (t  các đ n v  thu c l c lứ ừ ơ ị ộ ự ượng m t đ t đóng quân t i sân bay).ặ ấ ạ

Bước 3: Sàng l c các đ i tọ ố ượng nghiên c u theo các tiêu chu n l aứ ẩ ự   ch n và tiêu chu n lo i tr .ọ ẩ ạ ừ

Bước 4: Thu th p m u máu, thu th p các thông tin c n thi t. T  ch cậ ẫ ậ ầ ế ổ ứ   th c hi n vi c b o qu n, v n chuy n m u đ m b o an toàn.ự ệ ệ ả ả ậ ể ẫ ả ả

Bước 5: Đ nh lị ượng dioxin trong máu b ng phằ ương pháp GCMS. Bước 6: Đ nh lị ượng n ng đ  các hormone.ồ ộ

2.2.5. T  ch c thu th p và v n chuy n m uổ ứ ậ ậ ể ẫ

* Thu th p thông tin b ng b  câu h iậ ằ ộ ỏ

T t c  các thông tin thu th p b ng vi c s  d ng m t b  công cấ ả ậ ằ ệ ử ụ ộ ộ ụ  th ng nh t; g m các thông tin c  b n c a đ i tố ấ ồ ơ ả ủ ố ượng nh  tu i, gi i tính,ư ổ ớ   h c v n, thói quen hút thu c, dùng đ  u ng có c n, thơng tin l p gia đìnhọ ấ ố ồ ố ồ ậ   và thói quen sinh ho t hàng ngày, th i gian cơng tác…Các ch  s  chi u cao,ạ ờ ỉ ố ề   cân n ng đặ ược đo b i y s  thu c quân y đ n v  b ng công c  đở ỹ ộ ơ ị ằ ụ ược chu nẩ   hóa.

Trong H  s  nghiên c u (Ph  l c) có ph n B ng tóm t t s  lồ ơ ứ ụ ụ ầ ả ắ ơ ược về  ch c năng tình d c (Brief Sexual Functioning Inventory)   nam gi i (B ngứ ụ ở ớ ả   đi m BSFI) đã để ược d ch sang Ti ng Vi t t  tài li u g c.ị ế ệ ừ ệ ố

Trong BFSI (Ph  l c), 10 m c đ u tiên đ  c p đ n các khía c nh ch cụ ụ ụ ầ ề ậ ế ạ ứ   năng c a tình d c nam gi i, trong khi m c cu i cùng đ  c p đ n s  th aủ ụ ớ ụ ố ề ậ ế ự ỏ   mãn tình d c t ng th . Khía c nh ch c năng bao g m ham mu n tình d cụ ổ ể ạ ứ ồ ố ụ   (02 m c nh : 1 và 2), cụ ỏ ương c ng (03 m c nh : 3, 4 và 5), xu t tinh (02ứ ụ ỏ ấ   m c nh : 6 và 7), đánh giá tr c tr c (03 m c nh : 8, 9 và 10). M i khíaụ ỏ ụ ặ ụ ỏ ỗ   c nh ch c năng đạ ứ ược tính đi m b ng t ng đi m đánh giá c a các m c nhể ằ ổ ể ủ ụ ỏ  trong khía c nh đó. D i đi m đánh giá là t  0 đi m (khơng có ch c năng/cóạ ả ể ừ ể ứ   v n đ  l n…) đ n 4 đi m (ch c năng t t/khơng có v n đ ). Đi m và t ngấ ề ớ ế ể ứ ố ấ ề ể ổ   đi m càng cao thì ch c năng càng t t ể ứ ố [112].

* T  ch c tri n khai thu th p m uổ ứ ể ậ ẫ

­ T p trung hậ ướng d n cho đ i tẫ ố ượng nghiên c u đi n các thông tinứ ề   trong phi u thu th p.ế ậ

­ Nhân viên quân y đ n v  th c hi n đo đ c các ch  tiêu   đ i tơ ị ự ệ ạ ỉ ở ố ượng  nghiên c u: huy t áp, cân n ng, chi u cao, tính ch  s  BMI.ứ ế ặ ề ỉ ố

­ Phi u tr  l i trong H  s  nghiên c u s  đế ả ờ ồ ơ ứ ẽ ược các đ i tố ượng nghiên  c u t  đi n. Đ  đ m b o tính ch t khách quan và riêng t , các đ i tứ ự ề ể ả ả ấ ư ố ượng  được b  trí ng i bàn gh  đ  t  tr  l i các câu h i trong phi u, khơng có số ồ ế ể ự ả ờ ỏ ế ự  trao đ i (nhìn, nói) v i nhau v  câu tr  l i.ổ ớ ề ả ờ

­ M i đ i tỗ ố ượng nghiên c u đứ ược c p m t mã s  nghiên c u, mã sấ ộ ố ứ ố  này được ghi trên H  s  nghiên c u và đồ ơ ứ ược dán trên thành  ng đ ng máu.ố ự

­ M u máu tĩnh m ch khi đói đẫ ạ ược thu th p trong kho ng th i gian tậ ả ờ ừ  7h30 đ n 11h sáng. Th  tích m u máu kho ng 40 mL đế ể ẫ ả ược chia vào các  ng đ ng chuyên d ng (đã đ c dán mã t ng  ng) ph c v  cho vi c đ nh

ố ự ụ ượ ươ ứ ụ ụ ệ ị  

lượng dioxin và đ nh lị ượng các hormone.  * B o qu n, v n chuy n m u máuả ả ậ ể ẫ

M u máu đẫ ược ly tâm t i ch  (máy ly tâm t c đ  5000 vòng/phútạ ỗ ố ộ   trong 5 phút, t i nhi t đ  phòng (25ạ ệ ộ 0C – 280C), tách huy t thanh và b oế ả   qu n t m th i b ng thùng b o ôn v i đá khô (đá COả ạ ờ ằ ả ớ 2) t i th c đ a.ạ ự ị

Sau đó, m u đã x  lý t  các sân bay đẫ ử ừ ược v n chuy n v  Hà N iậ ể ề ộ   b ng đằ ường Hàng không. T i Vi n nghiên c u Y Dạ ệ ứ ược h c Quân s , H cọ ự ọ   vi n Quân y các m u huy t thanh đệ ẫ ế ược b o qu n dài ngày trong t  âm sâuả ả ủ   ­ 800C t i Phòng xét nghi m Protein – Đ c ch t – T  bào (D3) cho đ n khiạ ệ ộ ấ ế ế   ti n hành xét nghi m phân tích dioxin và đ nh lế ệ ị ượng n ng đ  các hormone.ồ ộ

Ph n m u máu đ  làm xét nghi m sinh hóa, huy t h c đầ ẫ ể ệ ế ọ ược tách riêng  và được ti n hành đ nh lế ị ượng ngay trong ngày t i th c đ a.ạ ự ị

2.2.6. K  thu t phân tích n ng đ  dioxin trong nghiên c uỹ ậ ồ ộ ứ

Phân tích n ng đ  các đ ng lo i dioxin (GCMS) đồ ộ ồ ạ ược th c hi n t iự ệ ạ   Phịng Phân tích Dioxin, Phân vi n Hóa ­ Mơi trệ ường, Trung tâm Nhi t đ iệ ớ   Vi t ­ Nga, B  Qu c phịng. ệ ộ ố

Phân tích theo quy trình phân tích EPA 1613B trên thi t b  b ng s c kýế ị ằ ắ   khí/kh i ph  phân gi i cao (HRGC/HRMS). Phịng xét nghi m đ t tiêuố ổ ả ệ ạ   chu n ISO/IEC 17025:2005, S  VILAS 856.ẩ ố

Phương pháp GC/MS được áp d ng đ  phân tích xác đ nh n ng đ  17ụ ể ị ồ ộ   đ ng   lo i   đ c   c a   polyclodibenzo­p­dioxin   và   polyclodibenzofuranồ ạ ộ ủ   (PCDD/PCDF) có trong d ch chi t t  m u huy t thanh. 17 đ ng lo i đ cị ế ừ ẫ ế ồ ạ ộ   PCDD/PCDF xác đ nh theo phị ương pháp này được li t kê   dệ ở ưới đây:

TT Tên ch tấ S  CASố 1 2,3,7,8­Tetraclodibenzo­p­dioxin (2,3,7,8­TCDD) 1746­01­6 2 1,2,3,7,8­Pentaclodibenzo­p­dioxin (1,2,3,7,8­PeCDD) 40321­76­4 3 1,2,3,4,7,8­Hexaclodibenzo­p­dioxin (1,2,3,4,7,8­HxCDD) 39227­28­6 4 1,2,3,6,7,8­Hexaclodibenzo­p­dioxin (1,2,3,6,7,8­HxCDD) 57653­85­7 5 1,2,3,7,8,9­Hexaclodibenzo­p­dioxin (1,2,3,7,8,9­ HxCDD) 19408­74­3 6 1,2,3,4,6,7,8­Heptaclodibenzo­p­dioxin (1,2,3,4,6,7,8­HpCDD) 35822­46­9 7 1,2,3,4,6,7,8,9­Octaclodibenzo­p­dioxin (OCDD) 3268­87­9 8 2,3,7,8­tetraclodibenzofuran (2,3,7,8­TCDF) 51207­31­9 9 1,2,3,7,8­Pentaclodibenzofuran (1,2,3,7,8­PeCDF) 57117­41­6 10 2,3,4,7,8­ Pentaclodibenzofuran (2,3,4,7,8­PeCDF) 57177­31­4 11 1,2,3,4,7,8­Hexaclodibenzofuran (1,2,3,4,7,8­HxCDF) 70648­26­9 12 1,2,3,6,7,8­ Hexaclodibenzofuran (1,2,3,6,7,8­HxCDF) 57177­44­9 13 1,2,3,7,8,9­ Hexaclodibenzofuran (1,2,3,7,8,9­HxCDF) 72918­21­9 14 2,3,4,6,7,8­ Hexaclodibenzofuran (2,3,4,6,7,8­HxCDF) 60851­34­5 15 1,2,3,4,6,7,8­Heptaclodibenzofuran (1,2,3,4,6,7,8­HpCDF) 67562­39­4 16 1,2,3,4,7,8,9­ Heptaclodibenzofuran (1,2,3,4,7,8,9­HpCDF) 55673­89­7 17 1,2,3,4,6,7,8,9­Octaclodibenzofuran (OCDF) 39001­02­0  * Thi t b  s c ký khí kh i ph :ế ị ắ ố ổ

­ Thi t b  s c ký khí (GC): Thi t b  s c ký khí c a Agilent, modelế ị ắ ế ị ắ ủ   7890A, được đ t đặ ược chương trình nhi t đ , t c đ  và áp su t, có thệ ộ ố ộ ấ ể  b m m u theo k  thu t chia và khơng chia dịng, thi t k  phù h p v i cácơ ẫ ỹ ậ ế ế ợ ớ   lo i c t s c ký khí mao qu n.ạ ộ ắ ả

­ Thi t b  kh i ph  (MS): Kh i ph  phân gi i cao AutoSpec Premierế ị ố ổ ố ổ ả   M834 c a hãng Waters có th  s  d ng ch  đ  phân tích SIM ho c SCAN.ủ ể ử ụ ế ộ ặ   Năng lượng b n phá phân t  là 70eV. Detecto kh i ph  đ  phân gi i caoắ ử ố ổ ộ ả   (≥10.000) được ghép n i v i GC qua Interface, đ t đố ớ ặ ược nhi t đ .ệ ộ

­ Ho t đ ng c a GC/MS th c hi n theo chạ ộ ủ ự ệ ương trình đã l p s n, đậ ẵ ược  đi u khi n b ng máy tính qua ph n m m MassLynx, đ nh lề ể ằ ầ ề ị ượng các ch tấ   PCDD/PCDF b ng ph n m m TargetLynx.ằ ầ ề

* Quy trình tóm t t:ắ

­ Chi t m u, làm s ch và làm giàu m u theo quy trình.ế ẫ ạ ẫ ­ Xác đ nh hàm lị ượng lipid.

­ Làm s ch trên c t silicagel.ạ ộ

­ Làm s ch trên c t florisil (đây là ph n tùy ch n vì n n m u serumạ ộ ầ ọ ề ẫ   tương đ i s ch).ố ạ

­ Tách phân đo n ch a PCDD/PCDF trên c t nhơm oxit.ạ ứ ộ ­ Cơ đ c dung mơi trặ ước khi phân tích trên thi t b .ế ị ­ Phân tích trên thi t b  HRGC/HRMS.ế ị

­ Tính n ng đ  đ c tồ ộ ộ ương đương TEQ.

Do dioxin có tính ái m  cao (lipophilic) nên khi đ nh lỡ ị ượng dioxin trong  các m u ph m sinh h c, thành ph n m  trong m u s  đẫ ẩ ọ ầ ỡ ẫ ẽ ược tách ra và đ nhị   lượng. Vi c tách m  giúp cho tính n ng đ  theo lệ ỡ ồ ộ ượng m  tách đỡ ược chính  xác. Cơng đo n tách m  có th  ti n hành b ng h  th ng máy t  đ ng, ho cạ ỡ ể ế ằ ệ ố ự ộ ặ   th  cơng. Nhìn chung, hi u su t tách m  c a hai phủ ệ ấ ỡ ủ ương pháp t  đ ng vàự ộ   th  cơng là khơng có s  khác bi t đáng k .ủ ự ệ ể

Ch t n i chu n bao g m 17 đ ng lo i dioxin và 14 đ ng lo i PCB v iấ ộ ẩ ồ ồ ạ ồ ạ ớ   n ng đ  pha lỗng c a m i đ ng lo i là 1 pg/µl (riêng n ng đ  c a OCDDồ ộ ủ ỗ ồ ạ ồ ộ ủ  

và OCDF là 2 pg/µl ). Các đ ng lo i này đồ ạ ược đánh d u b ng đ ng vấ ằ ồ ị  Cacbon 13 (C12­labeled congeners). Th  tích ch t n i chu n cho vào m iể ấ ộ ẩ ỗ   m u là 20 µl.ẫ

Hình 2.2. Tóm t t quy trình phân tích dioxin huy t thanhắ ế

b ng phằ ương pháp GCMS

T ng s  7 đ ng lo i nhóm PCDDs và 10 đ ng lo i nhóm PCDFs đổ ố ồ ạ ồ ạ ược  đ nh lị ượng. TEQ t ng s  c a 17 đ ng lo i tính b ng cách c ng g p n ngổ ố ủ ồ ạ ằ ộ ộ ồ   đ  t ng đ ng lo i nhân v i h  s  đ c c a nó theo b ng h  s  đ c (WHOộ ừ ồ ạ ớ ệ ố ộ ủ ả ệ ố ộ   2005). Ch t đ c nh t 2,3,7,8­TCDD đấ ộ ấ ượ ấc l y h  s  đ c b ng 1. Tính n ngệ ố ộ ằ ồ   đ  đ c tộ ộ ương đương TEQ theo công th c sau [113]:ứ

Trong đó: ­ Ci : n ng đ  đ ng lo i iồ ộ ồ ạ

                 ­ TEFi : TEF c a đ ng lo i tủ ồ ạ ương  ngứ

Đ ng lo i dioxin và h  s  đ c TEF theo WHO 2005 nh  sau [ồ ạ ệ ố ộ ư 114]: Đ ng ồ lo iạ  dioxin WHO 2005­TEF* Nhóm PCDD ?  2,3,7,8­Tetrachlorodibenzo­p­ dioxin 1  1,2,3,7,8­Pentachlorodibenzo­p­ dioxin 1

 1,2,3,4,7,8­Hexachlorodibenzo­ p­dioxin 0.1  1,2,3,6,7,8­Hexachlorodibenzo­ p­dioxin 0.1  1,2,3,7,8,9­Hexachlorodibenzo­ p­dioxin 0.1  1,2,3,4,6,7,8­ Heptachlorodibenzo­p­dioxin 0.01  Octachlorodibenzo­p­dioxin 0.0003 Nhóm PCDF ?  2,3,7,8­ Tetrachlorodibenzofuran 0.1  1,2,3,7,8­ Pentachlorodibenzofuran 0.03  2,3,4,7,8­ Pentachlorodibenzofuran 0.3  1,2,3,4,7,8­ Hexachlorodibenzofuran 0.1  1,2,3,6,7,8­ Hexachlorodibenzofuran 0.1  1,2,3,7,8,9­ Hexachlorodibenzofuran 0.1  2,3,4,6,7,8­ Hexachlorodibenzofuran 0.1  1,2,3,4,6,7,8­ Heptachlorodibenzofuran 0.01

 1,2,3,4,7,8,9­

Heptachlorodibenzofuran 0.01

 Octachlorodibenzofuran 0.0003

*H  s  đ c theo đánh giá c a t  ch c Y t  th  gi i năm 2005 ệ ố ộ ủ ổ ứ ế ế ớ

Hình 2.3. Hình  nh tách chi t và đo n ng đ  dioxin ả ế ồ ộ

b ng phằ ương pháp GCMS

* Ngu n: Theo Trung tâm Nhi t đ i Vi t Nga [115]ồ ệ ớ ệ

TEQ được tính theo 2 m c: m c c n trên và m c c n dứ ứ ậ ứ ậ ưới.

­ M c c n trên (TEQ upper bound): t ng hàm lứ ậ ổ ượng c a t t c  17ủ ấ ả   đ ng lo i PCDD/Fs, nh ng đ ng lo i có hàm lồ ạ ữ ồ ạ ượng nh  h n LOQ (limit ofỏ ơ   quantification) t c gi i h n đ nh lứ ớ ạ ị ượng được tính b ng giá tr  LOQ.ằ ị

­ M c c n dứ ậ ưới (TEQ lower bound): t ng hàm lổ ượng c a t t c  17ủ ấ ả   đ ng lo i PCDD/Fs đ nh lồ ạ ị ượng được, nh ng đ ng lo i khơng đ nh lữ ồ ạ ị ượng  được (<LOQ) thì tính là 0.

­ Gi i h n phát hi n c a phớ ạ ệ ủ ương pháp (Method detection limit ­ MDL):  đ i v i 2,3,7,8­TCDD là 0,002 pg/g kh i lố ớ ố ượng m u tẫ ươi; 0,9 pg/g m  (tínhỡ   theo lượng m u t i thi u là 40g m u máu tồn ph n ho c 20g huy t thanhẫ ố ể ẫ ầ ặ ế   ­ tương  ng v i 0,1 g m ). Gi i h n phát hi n có th  nh  h n khi s  d ngứ ớ ỡ ớ ạ ệ ể ỏ ơ ử ụ   lượng m u l n h n hay hàm lẫ ớ ơ ượng m  trong m u l n h n.ỡ ẫ ớ ơ

Giá tr  c a MDL và LOQ đị ủ ược tính d a trên t  s  tín hi u/nhi u (S/N)ự ỷ ố ệ ễ   c a m u. MDL thủ ẫ ường được tính b ng hàm lằ ượng tương  ng v i S/Nứ ớ   b ng 2,5:1 ho c 3:1. LOQ thằ ặ ường được tính b ng hàm lằ ượng tương  ngứ   v i S/N b ng 9:1 ho c 10:1.ớ ằ ặ

2.2.7. K  thu t đ nh lỹ ậ ị ượng n ng đ  hormone trong nghiên c uồ ộ ứ

Các hormone được đ nh lị ượng b ng h  th ng mi n d ch Hóa phátằ ệ ố ễ ị   quang công ngh  Ester Acridinium c a máy xét nghi m mi n d ch t  đ ngệ ủ ệ ễ ị ự ộ   ADVIA Centaur® CP, SIEMENS, Đ c. ứ

Hóa ch t chính hãng s  d ng cho máy xét nghi m đấ ử ụ ệ ược nh p kh u tậ ẩ ừ  M , s n xu t t i Siemens Healthcare Diagnostics Inc. 511 Benedict Avenueỹ ả ấ ạ   Tarrytown, NY 10591 USA.

Hóa chất dùng cho máy xét nghiệm Mã lô (Batch code/LOT number)

TES 56260026 FSH 70750238 LH 58169229 PRL 51543182 TSH 67378340 FT3 59700249 FT4 34110150

Xét nghi m đ nh lệ ị ượng n ng đ  các hormone trong nghiên c u đồ ộ ứ ược  th c hi n t i Phòng Xét nghi m Protein – Đ c ch t – T  bào (D3) thu cự ệ ạ ệ ộ ấ ế ộ   Vi n nghiên c u Y Dệ ứ ược h c Quân s , H c vi n Quân y.ọ ự ọ ệ

Các   hormone   liên   quan   đ n   tr c   HPG   bao   g m:   PRL,   FSH,   LH,ế ụ ồ   Testosterone.

N ng đ  hormone s  d ng đ n v  n ng đ  kh i lồ ộ ử ụ ơ ị ồ ộ ố ượng theo H  SI.ệ Theo hướng d n c a hãng thì ph m vi tham chi u v  giá tr  n ng đẫ ủ ạ ế ề ị ồ ộ  bình thường c a các hormone trên nh  sau (tủ ư ương  ng v i b  Kit hóa ch tứ ớ ộ ấ   mà hãng s  d ng): ử ụ

TSH: 0,35 – 5,5 μIU/mL;  FT3: 2,3 – 4,2 pg/mL;  FT4: 0,89 – 1,76 ng/mL; 

PRL: 2,1 – 17,7 ng/mL (nam gi i trớ ưởng thành);  LH: 1,5 – 9,3 mIU/mL (nam gi i, 20 – 70 tu i); ớ ổ FSH: 1,4 – 18,1 mIU/mL (nam gi i, 13 – 70 tu i); ớ ổ

Testosterone: 164,94 – 753,38 ng/dL (nam gi i < 50 tu i).ớ ổ

các hormone trên máy xét nghi m mi n d ch t  đ ng ệ ễ ị ự ộ

ADVIA Centaur® CP, SIEMENS, Đ cứ

* Ngu n: Tác gi  ch p t i Phòng xét nghi m Protein ­ Đ c ch t ­ T  bào (D3), ồ ả ụ ạ ệ ộ ấ ế               T ng 3, Vi n nghiên c u Y Dầ ệ ứ ược h c Quân s , H c vi n Quân yọ ự ọ ệ

Quy trình ti n hành xét nghi m đ nh lế ệ ị ượng hormone trên H  th ngệ ố   máy xét nghi m mi n d ch t  đ ng ADVIA Centaurệ ễ ị ự ộ ® CP, SIEMENS:

­ B t máy, kh i đ ng máy và ph n m m.ậ ở ộ ầ ề

­ Cài đ t hóa ch t vào máy và ki m tra ch t lặ ấ ể ấ ượng thu c th  trố ử ước khi  xét nghi m. H  th ng s  t  đ ng nh n d ng thu c th  b ng mã v ch,ệ ệ ố ẽ ự ộ ậ ạ ố ử ằ ạ   ki m tra hi u l c c a calibration, h n dùng c a thu c th  và đ a ra c nhể ệ ự ủ ạ ủ ố ử ư ả   báo.

­ Ch y chạ ương trình Calibrator. ­ Ch y chạ ương trình QC đ  ki m tra.ể ể

­ H  th ng t  ki m tra ch t lệ ố ự ể ấ ượng m u: phát hi n thi u th  tích m u,ẫ ệ ế ể ẫ   c c máu đơng, b t n u có và đ a ra c nh báo.ụ ọ ế ư ả

­ Ch y m u theo mã đ i tạ ẫ ố ượng nghiên c u.ứ

K t qu  xét nghi m đế ả ệ ược h  th ng máy t  đ ng l u tr  chính xácệ ố ự ộ ư ữ   theo ngày gi  th c hi n và in ra k t qu  khi c n.ờ ự ệ ế ả ầ

* Nguyên lý đ nh lị ượng n ng đ  hormone theo phồ ộ ương pháp mi n d chễ ị   Hóa phát quang (CLIA): 

CLIA  d a   trên   nguyên   lý   kháng   nguyên  (ch t   có   trong  m u  b nhự ấ ẫ ệ   ph m) k t h p v i kháng th  (ch t có trong thu c th ) có g n ch t đánhẩ ế ợ ớ ể ấ ố ử ắ ấ   d u (thấ ường là phân t  Acridinium Ester). ử

Nh  ch t đánh d u có kh  năng phát quang khi thay đ i pH c a dungờ ấ ấ ả ổ ủ   d ch ph n  ng và tín hi u phát quang đị ả ứ ệ ược khu ch đ i qua m t  ng nhânế ạ ộ ố   quang nên có th  đ nh lể ị ượng các ch t có n ng đ  r t th p ho c các ch tấ ồ ộ ấ ấ ặ ấ   b t thấ ường trong c  th  v i đ  chính xác r t cao so v i các k  thu t khác. ơ ể ớ ộ ấ ớ ỹ ậ

Phân t  Acridinium ester có tr ng lử ọ ượng phân t  nh  h n r t nhi u soử ỏ ơ ấ ề   v i các enzyme trong ph n  ng ELISA do đó tăng kh  năng thâm nh p vàoớ ả ứ ả ậ   c  ch t và gi m thi u hi u  ng che l p trung tâm ho t đ ng c a khángơ ấ ả ể ệ ứ ấ ạ ộ ủ   nguyên và kháng th  giúp cho đ  chính xác tăng đáng k  so v i phể ộ ể ớ ương  pháp ELISA (đ c bi t khi đ nh lặ ệ ị ượng nh ng ch t có n ng đ  th p).ữ ấ ồ ộ ấ

2.2.8. Các bi n s  nghiên c uế ố ứ

Các bi n s  trong nghiên c u đế ố ứ ược tóm t t trong b ng sau:ắ ả

TT Biến số Định nghĩa Phân loại Thu thập

1

Tuổi

Tính đến năm 2017 Rời rạc Bộ câu hỏi

2

Học vấn

Cấp học cao nhất được

TT Biến số Định nghĩa Phân loại Thu thập

3

Thời gian công tác tại sân bay

Số năm công tác tại các

sân bay đến năm 2017 Rời rạc Bộ câu hỏi