6. NHIỄM HPV VÀ UNG THƯ CỔ TỬ CUNG
6.1. Chẩn đoán nhiễm HPV
6.1.1. Chẩn đoán lâm sàng
a). Có triệu chứng
HPV gây nên các bệnh cảnh lâm sàng khác nhau với các triệu chứng rất phong phú. Ở da và niêm mạc, HPV có thể gây nên một số các triệu chứng sau:
•Tổn thương sùi: sẩn nổi cao, trên có các nhú mềm màu hồng tươi giống như các tinh thể nhô lên, xoè rộng ra giống mào gà, hay giống súp lơ, thương tổn có khi có cuống, không có hiện tượng thâm nhiễm.
•Tổn thương dạng mụn cơm: là các sẩn nổi cao hoặc phẳng, màu hồng hoặc màu xám, bề mặt thô, có các nhú rất nhỏ.
•Tổn thương có thể là một vùng thô mất bóng chỉ có thể nhìn thấy rõ khi làm thử nghiệm Acid axetic 3-5%.
b) Không có triệu chứng
Sau khi xâm nhập, HPV không gây nên bất kỳ triệu chứng lâm sàng nào cho người bị nhiễm, vì vậy phải dựa vào cận lâm sàng để phát hiện.
6.1.2. Chẩn đoán cận lâm sàng
a) Xét nghiệm tế bào học cổ tử cung ( PAP Smear ).
Những biểu hiện nhiễm HPV là sự có mặt của tế bào “rỗng” Koilocyte hay còn gọi là “tế bào bóng”. Tế bào có hình ảnh đặc trưng với màng tế bào dày lên do sự cô đặc của bào tương, protein của tế bào đặc lại ở sát màng tế bào tạo nên hình ảnh tế bào rỗng. Tế bào Koilocyte điển hình có vùng sáng trong bào tương, quầng sáng quanh nhân, nhân thường nằm lệch.
b) Test Acid axetic
Các biểu hiện lâm sàng không nhìn thấy rõ có thể dùng thử nghiệm này. Sau khi bôi Acid axetic 3-5% khoảng 5 phút, xuất hiện mảng giới hạn rõ màu trắng, hơi nổi cao, bề mặt thô, nếu dùng kính lúp có thể thấy bề mặt thô rõ hơn, trên có các nhú là thử nghiệm dương tính.
c) Phân lập HPV
Phân lập virus được coi là tiêu chẩn vàng để xác định nhiễm virus. Việc phân lập HPV còn gặp nhiều khó khăn do sự nhân lên của virus cần có sự biệt hóa của tế bào keratin và cấu trúc tầng của các tế bào biểu mô.
Cho tới nay đã có rất nhiều các cố gắng để thiết lập hệ thống phân lập HPV như: mô hình dị ghép hoặc hệ thống nuôi cấy từ các tổn thương ở trên da người hoặc mô tử cung đã được nhân lên bằng cách ghép các mô bệnh vào chuột bị gây thiếu hụt miễn dịch [45].
Tuy nhiên hệ thống phân lập này vẫn chưa trở thành thường quy phân lập virus HPV phục vụ mục đích chẩn đoán. Do đó chẩn đoán tế bào học và mô học là công cụ hữu ích phát hiện nhiễm HPV. Gần đây các phương pháp sinh học phân tử phát hiện ADN của HPV đang được quan tâm.
d) Xác định ADN của HPV bằng kỹ thuật PCR.
Phương pháp PCR do Karl Mullis và cộng sự phát minh năm 1985. Nhờ enzym ADN polymerase xúc tác, từ mạch khuôn ADN các mạch đơn mới được tổng hợp.
PCR sử dụng bộ mồi chung cho tất cả các type HPV là sử dụng các mồi để khuếch đại một phổ rộng các type HPV. Những mồi này nằm ở vùng bảo toàn trong genome của HPV như gien mã hóa protein vỏ capsid L1. Cặp mồi MY09 và MY11 khuếch đại sản phẩm có đích 450bp bên trong khung đọc mở L1 (HPV L1 ORF). Các mồi GP5+ và GP6+ khuếch đại sản phẩm có đích
150bp nằm bên trong vùng đích của cặp mồi MY09 và MY11 với độ nhạy phân tích từ 10-200 bản copy mỗi mẫu.
Khi sử dụng cặp mồi chung để khuếch đại một đoạn gien có mặt trong genome của mọi type HPV, có nhiều phương pháp được sử dụng để xác định đoạn gien này là của type HPV nào. Ta có thể giải trình tự (sequecing) đoạn gien này rồi so sánh đối chiếu với trình tự gien của các type HPV, hoặc lai sản phẩm PCR với các đầu dò ADN đặc hiệu với các type HPV.
6.2. Phòng nhiễm HPV
6.2.1. Phòng không đặc hiệu
Quan hệ một vợ một chồng. Hạn chế quan hệ tình dục sớm.
Sử dụng các biện pháp tránh thai: sử dụng bao cao su.
Phòng tránh các nhiễm trùng lây truyền qua đường tình dục.
Tuy nhiên, vấn đề sử dụng bao cao su trong QHTD không an toàn có thể giúp cho việc phòng chống các nhiễm trùng lây truyền qua đường tình dục mà không tránh được sự lây nhiễm của HPV. Chỉ cần tiếp xúc với HPV nằm bên ngoài sự che phủ của bao cao su cũng đủ để nhiễm bệnh [26].
6.2.2. Phòng đặc hiệu
Hiện nay, đã có Gardasil được xem là biện pháp đột phá trong phòng ngừa ung thư CTC và các bệnh lý liên quan đến HPV. Gardasil là vaccine tứ giá phòng được HPV 6, HPV 11, HPV 16 và HPV 18. HPV 6 và HPV 11 gây nên 90% các trường hợp sùi mào gà sinh dục - hậu môn, U nhú thanh quản, U Buschke Lowenstein; HPV 16 và HPV 18 được coi là thủ phạm của 70% các trường hợp UTCTC [16].
Vaccine đã được nghiên cứu thành công và được phép sử dụng tại nhiều quốc gia trong đó có Việt Nam. Các vaccine được cấu tạo bởi HPV có thành phần bao gồm vỏ capsid virus rỗng chứa các kháng nguyên vỏ của HPV, hoàn toàn không chứa ADN của virus. Được sản xuất trên môi trường nấm men (Saccharomyces Cerevisiae).
Hình 7: Mô hình mô tả các vaccine được cấu tạo bởi HPV có thành phần bao gồm vỏ capsid virus rỗng chứa các kháng nguyên vỏ của HPV, hoàn toàn
CHƯƠNG 2
ĐỐI TƯỢNG PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU