CHƯƠNG 1 TỔNG QUAN
2.3. Phương pháp nghiên cứu
2.3.4.3. Đánh giá bằng thiết bị khuếch tán kiểu tế bào Franz
- Thiết bị: Hệ thống thử khuếch tán kiểu tế bào Franz (Hanson Research – Đức) có thể tích khoang nhận là 7 mL.
- Môi trường khuếch tán: Dung dịch đệm phosphat đẳng trương pH 7,4 (chuẩn bị như mục 2.3.4.1).
- Nhiệt độ thử nghiệm: 34 oC ± 0,5 oC
- Màng khuếch tán: Màng lọc nylon hydrophillic, kích thước lỗ màng 0,45 µm. Ngâm màng khuếch tán trong môi trường thử 30 phút trước khi tiến hành thử nghiệm để ổn định màng.
- Tốc độ khuấy trộn ở khoang nhận: 600 vòng/phút. - Thời điểm lấy mẫu: 0,5; 1; 1,5; 2; 3; 4; 6; 24 giờ. - Tiến hành:
+ Cho môi trường thử vào đầy vào bình khuếch tán. Đặt màng khuếch tán một cách cẩn thận tiếp xúc với dung dịch khuếch tán sao cho khơng có bọt khí ở phía dưới màng. Để hệ thống ổn định nhiệt độ khoảng 10 phút.
+ Đặt một đơn vị hệ đặt tại mắt ở giữa màng khuếch tán, thêm chính xác 100 µl mơi trường giải phóng để làm ướt mẫu, sau đó đậy kín khoang chứa mẫu để tránh bay hơi.
+ Vận hành thiết bị theo các thông số đã nêu. Tại các thời điểm lấy mẫu, bơm 1 mL môi trường thử vào đáy khoang nhận của tế bào Franz, khi đó một thể tích tương đương được đẩy ra khỏi khoang nhận qua đường lấy mẫu ở phần trên của tế bào và được thu lại. Các dịch thử giải phóng chứa MGF được pha lỗng ngay bằng pha động trước khi định lượng bằng HPLC. Quá trình thử được thực hiện trong điều kiện hạn chế ánh sáng. Tỷ lệ (%) dược chất giải phóng tại các thời điểm được tính tốn tương tự như ở mục 2.3.4.2.