2 THỰC NGHIỆM VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
3.2.4Kết quả nhận danh và xác định cấu trúc các thành phần curcuminoid
3.2.4.1 Phổ MS (phụ lục 9,10,11)
Curcumin cho peak ion m/z =369.0 [M+H]+ tƣơng ứng M = 368.0 ph hợp với công thức C21H20O6.
DMC cho peak ion m/z = 339.0 [M+H]+ tƣơng ứng M = 338.0 ph hợp với công thức C20H18O5.
BDMC cho peak ion m/z = 309.0 [M+H]+ tƣơng tứng M = 308.0 ph hợp với công thức C19H16O4.
3.2.4.2 Phổ NMR (phụ lục 9,10,11)
Độ dịch chuyển hóa học của 3 thành phần curcumin, DMC và BDMC trong phổ
1
H-NMR và 13C- NMR đƣợc trình bày trong bảng 3.9 và bảng 3.10. Curcumin: R1 = R2 = OCH3
Demethoxycurcumin(DMC):R1=H,R2= OCH3 Bisdemethoxycurcumin (BDMC):R1 =R2 = H Bảng 3.9. Độ dịch chuyển hóa học (ppm) trong phổ 1H-NMR (dung môi DMSO-d6)
của curcumin, DMC và BDMC phân lập từ hỗn hợp curcumin
Vị trí Curcumin BDMC DMC
1 6.06 (s, 1H) 6.04 (s, 1H) 6.05 (s, 1H)
2, 2’ -- -- --
3, 3’ 6.75 (d, Jtran=16.0Hz, 2H) 6.68 (d, Jtran=16.0Hz, 2H) 6.68 (d, Jtran=16Hz, 1H) 6.75 (d, Jtran=16Hz, 1H)
4, 4’ 7.55 (d, Jtran=16.0Hz, 2H) 7.54 (d, Jtran=16.0Hz, 2H) 7.54 (d, Jtran=16Hz,1H) 7.55 (d, Jtran=16Hz,1H)
65
5, 5’ -- -- --
6, 6’ 7.31(d, Jmeta=1.5Hz, 2H) 7.56 (d, Jortho=8.5Hz) 7.56 (d, Jortho=8.5Hz) 7.31 (d, Jmeta=1.5Hz, 1H)
7, 7’ -- 6.82 (d, Jortho=8.5Hz, 2H) 6.82 (d, Jortho=8.5Hz,1H)
8, 8’ -- -- --
9, 9’ 6.83 (d, Jortho=8.0Hz, 2H) 6.82 (d, Jortho=8.5Hz, 2H) 6.82 (d, Jortho=8.5Hz)
10,10’ 7.15 (dd, Jortho=8.0Hz, Jmeta=1.5Hz, 2H) 7.56 (d, Jortho=8.5Hz) 7.56 (d, Jortho=8.5Hz) 7.14 (dd, Jortho=8.5Hz, Jmeta =1.5Hz, 1H) OCH3 3.84 (s, 6H) -- 3.84 (s, 3H) 8, 8’- OH 9.65 (s, 2H) 10.06 (s, 2H) 10.06 (s,1H), 9.06 (s,1H)
Các số liệu về độ dịch chuyển hóa học của 1H- và 13C-NMR của 2 hợp chất có cấu trúc đối xứng là curcumin và BDMC khá tƣơng đồng với các số liệu đƣợc nhóm tác giả Péret-Almeida đã công bố trƣớc đây [6] với điều kiện phân tích 1
H- và 13C- NMR lần lƣợt là 200 MHz và 50 MHz trong dung môi DMSO-d6. Tuy nhiên với DMC có cấu trúc bất đối xứng, khi phân tích 1
H-NMR ở 500 MHz, các m i bất đối xứng ở các vị trí 3,3’; 4,4’; 6,6’; 7,7’; 10,10’ và 8,8’-OH đã đƣợc tách thành 2 m i rõ rệt (bảng 3.10), trong khi ở công bố của tác giả Péret-Almeida và cộng sự [6], do độ phân giải của máy NMR 200 MHz thấp hơn đáng kể đã không tách đƣợc các m i này đồng thời c ng không thấy đƣợc m i H-7, OH-8 và OH-8’. Kết quả phân tích trong nghiên cứu này đã phản ánh chính xác hơn cấu trúc bất đối xứng của thành phần DMC. Nhƣ vậy, phƣơng pháp sắc k cột đã tách thành công từng thành phần curcumin, DMC và BDMC ra khỏi hỗn hợp curcumin ban đầu.
Bảng 3.10. Độ dịch chuyển hóa học (ppm) trong phổ 13
C-NMR của curcumin, DMC và BDMC phân lập từ hỗn hợp curcumin Vị trí Curcumin BDMC DMC 1 100.84 100.93 100.91 2, 2’ 183.21 183.20 183.28; 183.14 3, 3’ 121.11 120.81 120.85; 121.08 4, 4’ 140.71 140.36 140.38; 140.71 5, 5’ 126.36 125.85 125.38; 126.38 6, 6’ 111.38 130.31 130.33; 111.31
66 7, 7’ 148.01 115.93 115.94; 148.03 8, 8’ 149.36 159.79 159.80; 149.36 9, 9’ 115.73 115.93 115.94; 115.73 10, 10’ 123.11 130.31 130.33; 123.17 OCH3 55.71 100.93 55.72 8, 8’-OH