ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 ĐỐI TỰỢNG NGHIÊN CỨU
2.5.CÁC BƯỚC TIẾN HÀNH
Bệnh nhân được khai thác tiền sử, bệnh sử, thời gian vô sinh.
Khám và làm các xét nghiệm cần thiết để chẩn đoán nguyên nhân vô sinh Được tiến hành theo từng bước của quy trình TTTON.
Kỹ thuật hỗ trợ sinh sản:
Các bệnh nhân đều được kích thích nang noãn, siêu âm nang noãn theo phác đồ chuẩn của trung tâm. Dựa vào xét nghiệm nội tiết ngày thứ 3 của vòng kinh và tuổi của bệnh nhân để chỉ định liều dùng thuốc với phác đồ dài hay ngắn.
Phác đồ dài bắt đầu dùng GnRHa (Depherelin 0,01g x 13-14 ngày hoặc 1 liều duy nhất Depherelin 3,75mg vào ngày thứ 21 của vòng kinh). Trước khi dùng thuốc kích thích nang noãn (FSH tinh chế: GonalF, Serono hoặc Puregon, Organon).
Phác đồ dùng GnRHa kèm với thuốc kích thích nang noãn từ ngày thứ 2 của chu kỳ, kéo dài khoảng 8-13 ngày.
Siêu âm nang noãn từ ngày thứ 8 của vòng kinh. Khi siêu âm có ≥ 3 nang noãn kích thớc ≥ 16 mm thì cho thuốc gây phóng noãn hCG (Pregnyl 5000 hoặc 10000 đơn vị).
Chọc hút noãn sau tiêm hCG 34 - 36h.
Tinh trùng của bệnh nhân được lấy vào lọ vô trùng trong ngày hút noãn. Bệnh nhân phải kiêng giao hợp trước đó 3-5 ngày. Mẫu sau khi xuất tinh để ly giải trong 20 - 30 phút ở 370C. Sau khi ly giải mẫu được đánh giá mật độ tinh trùng và độ di động theo tiêu chuẩn của WHO. Với mẫu bình thường tinh trùng được sử lý bằng cách quay ly tâm trong môi trường thang nồng độ Sperm Grad, sau đó cặn ly tâm được rửa lại bằng Sperm Rinse và cuối cùng làm Swim-up trong 1,5ml môi trường IVF (Vitrolife – Thụy Điển). Với mẫu kém (mật độ tinh trùng < 10.106/ml, không có tinh trùng loại A) thì không cần rửa lại bằng Sperm Rinse mà rửa bằng 2ml IVF để lấy cặn làm ICSI.
Noãn được đánh giá thụ tinh sau 12 - 14h đối với sau khi làm ICSI hoặc PESA/ICSI và 16 - 18h sau khi làm IVF đơn thuần. Noãn thụ tinh được nuôi tiếp trong môi trường IVF đến ngày 2.
Ngày 2 kiểm tra chất lượng của phôi dựa vào bảng đánh giá chất lượng phôi ngày 2, các trường hợp có ≥ 2 phôi độ 3 (có 4 - 5 tế bào, các tế bào đồng đều, không có mảnh vỡ (fragments) hoặc tỷ lệ mảnh vỡ < 10%) thì tiếp tục nuôi sang ngày 3.
Sang ngày 3, phôi lại được đánh giá chất lượng dựa vào tốc độ phân chia của phôi, độ đồng đều của tế bào và tỷ lệ các mảnh vỡ của bào tương trước khi chuyển cho bệnh nhân.
Bệnh nhân được chuyển phôi vào ngày 3, số lượng phôi chuyển phụ thuộc vào tuổi bệnh nhân, chất lượng phôi, tiền sử làm TTTON trước đó. Thông thường tại Bệnh viện PSTW chuyển từ 4 - 5 phôi.
Qui trình chuyển phôi được thực hiện theo đúng tiêu chuẩn và được đánh giá theo thang điểm.
Những phôi còn lại nếu đủ tiêu chuẩn sẽ được đông phôi, sẽ được đánh giá lại và được chuyển tiếp vào ngày 5 nếu đủ tiêu chuẩn.
Sau khi chuyển phôi bệnh nhân được dùng thuốc để hỗ trợ giai đoạn hoàng thể, tạo môi trường thuận lợi cho sự làm tổ của phôi.
Với bệnh nhân ít có nguy cơ quá kích buồng trứng dùng: Pregnyl 1500IU tiêm bắp cách ngày 1ống.
Utrogestan 400mg /ngày chia 4 lần. Đặt âm đạo trong 14 ngày.
Với bệnh nhân có nguy cơ quá kích buồng trứng không sử dụng Pregnyl, chỉ sử dụng Utrogestan với liều như trên hoặc tăng gấp đôi.
hCG được thử vào ngày 14 sau chuyển phôi. Nếu b -hCG > 25IU / ml đựơc xem là dương tính, bệnh nhân có thai tiếp tục được hỗ trợ giai đoạn hoàng thể.
Siêu âm được tiến hành 4 tuần sau thử βhCG để xác định số túi thai. Chẩn đoán thai lâm sàng khi có hình ảnh âm vang thai và tim thai.