Kết quả cho thấy, khi khơng có hoặc bổ sung 5% chitin thơ vào MT thì hoạt độ chitinase rất thấp Điều này chứng tỏ khi khơng có hoặc hàm lƣợng quá thấp thì lƣợng cơ chất nà không đủ để Trichoderma atroviride vừa tổng hợp enz me hi tăng nồng độ cơ chất vào MT thì hoạt độ chitinase đã tăng lên rõ rệt ở hàm lƣợng chitin 10% thì hoạt độ chitinase là 8,5 (U/ml). Tuy nhiên ở hàm lƣợng 20%, hoạt độ chitinase đã giảm mạnh, điều này cho thấy nếu tăng lƣợng cơ chất vào MT quá cao, thì pha tăng trƣởng của chủng sẽ có thể kéo dài hơn, sản phẩm cuối và thứ cấp sẽ tích tụ nhiều hơn gâ ức chế sự tổng hợp chitinase. Trong khi đó, hàm lƣợng chitin từ 1% đến 1,5% là khoảng thích hợp cho enzyme chitinase với hoạt độ cao.
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 0 5 10 15 20 25 H o ạt độ ch itinase ( u /m l) Hàm lượng chitinase (%)
28
Tác giả Lê Thị Huệ [8,9] khi nghiên cứu khả năng sinh tổng hợp chitinase của Trichoderma atroviride đã kết luận ở nồng độ chitin trong khoảng 10%-15% hoạt độ chitinase đạt mức độ cao, và thích hợp nhất là ở nồng độ 10% . Tác giả Đinh Minh Hiệp [10] khi nghiên cứu nồng độ cơ chất cảm ứng bổ sung vào MT nuôi cấy Trichoderma atroviride để thu chitinase đã kết luận nồng độ chitin thơ 10% là thích hợp nhất cho quá trình tăng trƣởng và sinh tổng hợp enzym chitinase.
Xem xét những nghiên cứu của tác giả, và so sánh vào giá trị hoạt độ chitinase đạt đƣợc ở hàm lƣợng trong TN trên Đồng thời nhằm tiết kiệm nguyên liệu chúng tôi quyết định chọn hàm lƣợng chitin 10% để tiến hành các TN sau.
3.2. Kết quả khảo sát các yếu tố đến hoạt độ enzym của chủng Trichoderma
atroviride
3.2.1. Ảnh hưởng của nhiệt độ
Bảng 3.4. Ảnh hƣởng của của nhiệt độ đến hoạt độ chitinase
Nhiệt độ (°C) 20 25 30 35 40
Hoạt độ chitinase
(U/ml) 4,663 8,050 8,862 7,364
3,980