Phần II: ĐỐI TƯỢNG, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
3.3.1 Kết quả nghiên cứu môi trường thích hợp nhân sinh khối nấm
Metahizium anisopliae.
Thí nghiệm nhân sinh khối nấm M.anisopliae trên các môi trường, được tiến hành theo công nghệ của Cuba.
Để đánh giá khả năng sinh bào tử của nấmM.anisopliae sau 10 ngày chúng tôi tiến hành đếm bào tử trên buồng đếm hồng cầu với độ phóng đại 200 lần(hình ảnh bào tử nấm hình 9)
Hình 9: Ảnh bào tử nấm Metarhiziumanisopliae
Bảng 3.4 . Số lượng bào tử nấm Metarhizium anisopliae sau 10 ngàynhân sinh khối trên các loại môi trường nhân sinh khối khác nhau
(Viện BVTV 3/2014)
Môi trường
Lượng bào tử nấm sau 10 ngày nhân nuôi
T0C TB H (%) TB Số bào tử /gram sinh khối tươi ( x 109) Số bào tử /gram sinh khối khô ( x 109) cám 50g + bột ngô 30g + bã bia 20g 2,1 3,2 27,5 88,3 Bột ngô 80g + bã đậu 20g 1,1 1,9 Gạo hấp chín 100g 3,8 4,7 CV% 2,8 3,5 LSD 0,05 21,0 18,5
Hình 10: Biểu đồ số lượng bào tử nấm Metarhizium anisopliae sau 10 ngày nhân sinh khối trên các loại môi trường nhân sinh khối khác nhau.
Kết quả thí nghiệm(bảng 3.4cho thấy sau 10 ngày nuôi cấy ở công thức thứ 3(Gạo hấp chín 100 gam) lượng bào tử tươi đạt 3,8x109 bt/ml chế phẩm, lượng bào tử khô đạt tới 4,7x109 bt/ml chế phẩm. Hình 10 biểu thị rõ hơn cho bảng 3.4. Trong khi đó ở công thức 1 (Bột ngô mảnh 80 gam + bã đậu phụ 20g ) lượng bào tử đạt 2,1x109bt/ml chế phẩm tươi, lượng bào tử khô cũng đạt 3,2x109 bt/ml chế phẩm khô, còn đối với công thức 2( cám gạo 50g + bột ngô mảnh 30g + bã bia 20g) thì lượng bào tử ít hơn hẳn so với 2 công thức trên lượng bào tử chỉ đạt 1,1x109 bt/ml chế phẩm tươi và 1,9x109 bt/ml chế phẩm khô.
Hình 11: Hình ảnh các công thức thí nghiệm với môi trường khác nhau
Như vậy với môi trường 100% gạo hấp chín có thể đưa vào nhằm sản xuất sinh khối. Với thành phần môi trường rẻ tiền và dễ kiếm.
3.3.2 Kết quả nghiên cứu môi trường thích hợp nhân sinh khối nấm
Beauveria bassiana.
Chúng tôi tiến hành sử dụng các loại môi trường rẻ tiền và dễ tìm nhằm tìm ra môi trường thích hợp để nhân lượng sinh khối nấm Beauveria Bassiana.
Sau 10 ngày nuôi cấy chúng tôi tiến hành pha loãng đến lượng 10-3 sau đó tiến hành đếm bào tử trên buồng đếm hồng cầu với độ phóng đại 200 lần Kết quả đếm bào tử nấm Beauveria bassiana thể hiện ở bảng 3.4.2:
Bảng 3.5 . Số lượng bào tử nấm Beauveria bassiana sau 10 ngày nhân sinh khối trên các loại môi trường nhân sinh khối khác nhau.
(Viện BVTV 3/2014)
Môi trường
Lượng bào tử nấm sau 10 ngày nhân nuôi
T0C T B H (%) TB Số bào tử /gram sinh khối tươi ( x 109) Số bào tử /gram sinh khối khô ( x 109) Gạo hấp chín 100g 4,2 5,8 25,8 88,7 Cám 50g + bột ngô 20g + bã bia 30g 2,5 3,6 Bột ngô 70g + bã đậu 30g 3,1 4,0 CV% 3,6 1,3 LSD 0,05 27,8 12,6
Hình 12: Biểu đồ so sánh lượng bào tử của nấm Beauveria bassianasau 10 ngày nhân sinh khối của các môi trường nhân sinh khối
Qua bảng 3.5 cho thấy nấm Beauveria bassiana phát triển được trên cả 3 loại môi trường thí nghiệm, đạt từ 2,5 – 4,2× 109bt/ml chế phẩm tươi.
Trong số 3 loại môi trường đã thí nghiệm, thì môi trường MT1 với thành phần 100%gạo hấp chín tỏ ra thích hợp nhất cho nấm Beauveria Bassiana phát triển. Sau 10 ngày nuôi cấy trong điều kiện nhiệt độ không khí là 22-250Cvà độ ẩm không khí là 85% thì số bào tử đạt cao nhất, lên tới 4,2× 109bt/ml chế phẩm tươi.
Với môi trường MT2 có thành phần các nguyên liệu (gồm cám gạo 50g + bột ngô mảnh 20g + bã bia khô 30g:) nấm Beauveria bassiana phát triển kém hơn nhiều. Sau 10 ngày nuôi cấy, lượng bào tử chỉ đạt 2,5 × 109bt/ml chế phẩm tươi.Còn môi trường MT3 với môi trường là bột ngô mảnh 70g + bã đậu phụ 30g cho lượng bào tử cao hơn so với MT2 nhưng thấp hơn đáng kể so với MT1 đạt 3,0x109 bt/ml. Như vậy môi trường MT1 được coi là môi trường thích hợp nhất cho nấm Beauveria bassiana phát triển.
Hình 13: Hình ảnh thí nghiêm các môi trường nuôi cấy thích hợp nấm Beauveria bassiana.