vào nồng độ đệm borat
Chất chuẩn
Nồng độ (ppm)
Thời gian lưu ( phút)
15 mM 20 mM 25 mM 30 mM Aspartame 40 4,471 4,589 4,777 6,289 Saccharin 40 6,496 6,812 7,412 8,465 Acesulfame-K 40 7,013 7,413 8,171 10,106 0 2 4 6 8 10 12 15 mM 20 mM 25 mM 30 mM Nồng độ đệm borat pH 9.5 Th ờ i g ia n lư u (p hú t) Aspartame Saccharin Acesulfame-K
Hình 3.6. Đồ thị biểu diễn sự phụ thuộc giữa thời gian lưu của asp, sac, ace-k vào nồng dộ đệm borat pH 9,5 vào nồng dộ đệm borat pH 9,5
Hình 3.7. Điện di đồ của hỗn hợp 3 chất trong điều kiện đệm borat 20 mM ( pH 9,5 và I=50 mA, V=25kV, L= 65 cm, t =25oC, áp suất 50 mbar) ( pH 9,5 và I=50 mA, V=25kV, L= 65 cm, t =25oC, áp suất 50 mbar)
Nhận xét: Qua các điện di đồ ở phụ lục 3 và hình 3.6, hình 3.7 ta thấy các chất đều
được phát hiện và tách tốt. Trong đó thời gian lưu của 3 chất chuẩn khi sử dụng đệm borat 15 mM là ngắn nhất. Mặt khác khi sử dụng đệm 30 mM với điện thế áp vào 2 đầu mao quản là 25 kV thì cường độ dịng điện lên tới 100μA, làm cho đường nền nhiễu hơn so với trường hợp sử dụng đệm có nồng độ 20 mM, đồng thời. Trên hình 3.4 ở nồng độ đệm borat 20 mM cho píc đều cân xứng, thời gian lưu ngắn , hơn nữa diện tích píc các chất là lớn nhất. Vì vậy chúng tôi lựa chọn đệm borac nồng độ 20 mM, pH 9,5 cho các bước tiếp theo.
3.1.2.2. Xác định điều kiện nhiệt độ
Sau khi chọn được hệ đệm thích hợp là: đệm borat 20 mM, pH 9,5 ta xét đến sự thay đổi của nhiệt độ đối với quá trình tách các chất trong hỗn hợp. Tiến hành khảo sát ở các nhiệt độ: 20o
C, 25oC, và 30oC. Kết quả như sau: