trên gà 2 tháng tuổi chưa được miễn dịch cơ sở
Chúng tôi tiến hành kiểm tra hiệu lực của 2 lô vacxin vô hoạt nhũ dầu sản xuất trên gà 2 tháng tuổi chưa được miễn dịch cơ sở bằng vacxin Newcastle và vacxin viêm phế quản truyền nhiễm. Trước khi tiêm vacxin nhũ dầu cho gà 2 tháng tuổi, toàn bộ các mẫu huyết thanh gà thí nghiệm và đối chứng đều được chúng tôi
thu thập và kiểm tra bằng phản ứng HI. Kết quả cho thấy, các mẫu huyết thanh kiểm tra kháng thể newcastle và kháng thể IB đều cho kết quả âm tính hoặc có hiệu giá kháng thể bằng 1 log2 đến 2 log2. Chúng tôi tiến hành phân lô gà thí nghiệm và đối chứng, mỗi gà ở lô thí nghiệm được tiêm 1 liều vacxin (0,3 ml vacxin/gà), gà ở lô đối chứng cũng được tiêm một lượng nước sinh lý tương đương với thể tích vacxin đã tiêm cho gà thí nghiệm. Toàn bộ gà sau khi được tiêm các lô vacxin nhũ dầu và gà đối chứng được chúng tôi lấy máu định kỳ, chắt huyết thanh xử lý nhiệt 560C trong thời gian 30 phút rồi kiểm tra hiệu giá kháng thể kháng virus Newcastle và IB bằng phản ứng HI.
Kết quả theo dõi sự biến động hàm lượng kháng thể kháng virus Newcastle trên gà 2 tháng tuổi chưa được miễn dịch cơ sở
Chúng tôi tiến hành thu thập các mẫu huyết thanh ở gà được tiêm các lô vacxin do chúng tôi sản xuất và gà đối chứng ở các thời điểm khác nhau theo thời gian. Các mẫu huyết thanh này được kiểm tra hiệu giá kháng thể kháng virus newcastle bằng phản ứng HI. Kết quả thể hiện ở Bảng 3.15.
Bảng số 3.15 cho thấy, lượng kháng thể kháng virus Newcastle trong máu gà được tiêm các lô vacxin vô hoạt nhũ dầu Newcastle - IB tại thời điểm 7 ngày sau khi sử dụng vacxin lượng kháng thể rất thấp chưa đủ bảo hộ chống bệnh Newcastle.
Ở thời điểm 14 ngày sau khi tiêm chúng tôi nhận thấy kháng thể ở gà được tiêm một trong số 2 lô vacxin đều tăng cao đủ bảo hộ chống bệnh Newcastle. Kết
quả theo dõi từ 21 ngày đến 42 ngày sau tiêm vacxin lượng kháng thể ở gà tiêm vacxin tăng liên tiếp đạt cao nhất vào thời điểm 42 ngày, lượng kháng thể trung bình của 2 lô vacxin dao động từ 7,0 log2 đến 7,2 log2, sau đó lượng kháng thể giảm dần theo thời gian.
Bảng 3.15. Biến động hiệu giá kháng thể kháng virus Newcastle ở gà 2 tháng
tuổi chưa được miễn dịch cơ sở newcastle
Hiệu giá kháng thể HI trung bình theo thời gian Ngày
7 14 21 28 35 42 49 56 63 70 77 84 91
1 2,4 4,8 6,6 6,8 7,1 7,2 7,0 6,4 6,2 6,0 5,2 5,0 4,2 2 3,0 4,8 6,6 7,0 7,0 7,2 6,8 6,6 6,4 6,2 5,4 5,2 4,6 Đ/C 1,0 1,0 1,2 1,2 1,2 1,2 1,2 1,2 1,0 1,0 1,2 1,2 1,2
Chúng tôi nhận thấy ở thời điểm 91 ngày tuổi sau khi sử dụng vacxin lượng kháng thể chống bệnh Newcastle ở gà vẫn đủ bảo hộ (từ 4,2 log2 đến 4,6 log2). Theo quy định của OIE, 2009 và Asian đối với các mẫu huyết thanh có hiệu giá kháng thể (bằng phương pháp HI) đạt từ 4 log2 trở lên là đủ bảo hộ chống bệnh Newcastle[9]. Trong khi đó, nghiên cứu của Trần Thị Lan Hương (2001) cho rằng hiệu giá kháng thể kháng virus Newcastle trong huyết thanh gà đạt từ 3 log2 - 4 log2 trở lên thì gà có thể được bảo hộ chống lại bệnh Newcastle[5]. Như vậy ở gà 2 tháng tuổi chưa được miễn dịch cơ sở với bệnh newcastle được tiêm một trong số 2 lô vacxin nhũ dầu do chúng tôi sản xuất sau 3 tháng lượng kháng thể vẫn đủ bảo hộ chống lại bệnh newcastle. Điều này cũng được chúng tôi chứng minh bằng phương pháp công cường độc virus ND với liều 105 EID50 / gà. Kết quả cho thấy, gà ở lô thí nghiệm không có biểu hiện bệnh trong khi gà ở lô đối chứng không được tiêm vacxin vô hoạt nhũ dầu, phát bệnh và chết sau 5 ngày. Kết quả kiểm tra hàm lượng
kháng thể newcastle gà ở lô đối chứng không được tiêm vacxin, theo dõi trong 3 tháng bằng phản ứng HI cho thấy ở các lần kiểm tra lượng kháng thể trung bình ở gà đối chứng chỉ dao động từ 1 log2 đến 1,2 log2. Có sự chênh lệch rõ rệt về hiệu giá kháng thể newcastle ở gà thí nghiệm được tiêm vacxin và gà đối chứng không được tiêm vacxin (P < 0,05).
Kết quả theo dõi biến động hiệu giá kháng thể kháng virus Newcastle ở gà chưa được miễn dịch cơ sở tại các thời điểm được thể hiện trên biểu đồ Hình 3.3.
Hình 3.3. Biến động hiệu giá kháng thể kháng virus Newcastle ở gà chưa được
miễn dịch cơ sở
Đường biểu diễn hiệu giá kháng thể (log2) ở gà được tiêm các lô vacxin có sự khác nhau rõ rệt so với gà đối chứng.
Kết quả theo dõi sự biến động hàm lượng kháng thể kháng virus IB trên gà 2 tháng tuổi chưa được miễn dịch cơ sở
Cũng bằng phương pháp HI chúng tôi tiếp tục kiểm tra lượng kháng thể kháng virus IB ở gà 2 tháng tuổi chưa có miễn dịch cơ sở với bệnh viêm phế quản truyền nhiễm được tiêm một trong số 2 lô vacxin nhũ dầu nói trên. Kết quả kiểm tra hiệu giá kháng thể IB trong các mẫu huyết thanh của gà thể hiện ở Bảng 3.16.
Bảng 3.16. Biến động hiệu giá kháng thể kháng virus IB ở gà 2 tháng tuổi chưa được miễn dịch cơ sở IB
Hiệu giá kháng thể HI trung bình theo thời gian
Ngày
7 14 21 28 35 42 49 56 63 70 77 84 91 1 3,0 5,2 6,4 6,8 6,8 7,2 6,8 6,6 6,2 6,2 5,8 5,2 5,0 2 2,8 5,2 6,4 6,6 6,8 7,0 6,8 6,6 6,4 6,2 6,0 5,6 5,2 Đ/C 1,0 1,0 1,0 1,0 1,0 1,0 1,0 1,0 1,0 1,0 0,8 1,2 1,2
Kết quả Bảng 3.16 cho thấy: Lượng kháng thể kháng virus IB ở gà được tiêm vacxin vô hoạt nhũ dầu ở thời điểm 7 ngày là rất thấp chưa đủ bảo hộ chống lại virus IB. Theo khuyến cáo của OIE (2008) và Asian các mẫu huyết thanh có hiệu giá kháng thể IB kiểm tra bằng phương pháp HI phải đạt tối thiểu từ 1/20 (4,4 log2) trở lên mới có khả năng bảo hộ đối với bệnh IB[11]. Điều này cũng được Thayer và cs (1987)[10]; Trần Thị Liên và cs (2008) xác nhận[1]. Kết quả kiểm tra lượng kháng thể trong huyết thanh gà ở ngày thứ 14 sau tiêm vacxin chúng tôi nhận thấy gà tiêm một trong số 2 lô vacxin đều có kháng thể đủ bảo hộ. Từ 21 ngày đến 42 ngày sau khi tiêm vacxin lượng kháng thể ở gà tăng mạnh, đạt cao nhất ở thời điểm 42 ngày sau tiêm vacxin trung bình đạt 7,2 log2. Tiếp tục kiểm tra hiệu giá kháng thể ở gà đến 91 ngày, chúng tôi nhận thấy lượng kháng thể có xu hướng giảm dần. Ở thời điểm 91 ngày, lượng kháng thể của gà được tiêm vacxin vẫn đạt bảo hộ dao động từ 5,0 log2 đến 5,2 log2. Trong khi lượng kháng thể IB ở gà lô đối chứng không được tiêm vacxin vô hoạt nhũ dầu trong các lần kiểm tra chỉ dao động từ 0,8 log2 đến 1,2 log2.
Các mẫu huyết thanh thu thập từ gà thí nghiệm và đối chứng cũng được chúng tôi kiểm tra lại bằng phản ứng ELISA của hãng Idexx. Kết quả cho thấy, các mẫu huyết thanh thu thập từ gà tiêm vacxin từ ngày thứ 14 trở đi đều cho S/P > 0,2 chỉ số S/P của các mẫu huyết thanh dao động từ 0,3 đến 6,3 tức là đương đương với
độ pha loãng của huyết thanh gà được tiêm vacxin tính toán theo công thức của nhà sản xuất kit Idexx ở ngưỡng 1/ 553 đến 1/2174839. Trái lại ở gà đối chứng chỉ số S/P < 0,2 tức là các mẫu huyết thanh này hoàn toàn âm tính với phương pháp ELISA.
Hiệu giá kháng thể IB ở gà chưa được tiêm một trong số 4 lô vacxin nhũ dầu được biểu diễn trên biểu đồ Hình 3.4.
Hình 3.4. Biến động hiệu giá kháng thể kháng virus IB ở gà chưa được miễn
dịch cơ sở
Biểu đồ Hình 3.4 cũng cho thấy đường biểu diễn hiệu giá kháng thể IB ở gà được tiêm vacxin nhũ dầu có sự gia tăng khác biệt so với hiệu giá kháng thể IB ở gà lô đối chứng không được tiêm vacxin (P < 0,05).
3.9.2. Theo dõi sự biến động hàm lượng kháng thể kháng virus Newcastle và IB trên gà 2 tháng tuổi đã được miễn dịch cơ sở trên gà 2 tháng tuổi đã được miễn dịch cơ sở
Chúng tôi tiếp tục thí nghiệm kiểm tra hiệu lực của 2 lô vacxin trên gà 2 tháng tuổi đã được miễn dịch cơ sở bằng vacxin Newcastle và vacxin viêm phế quản truyền nhiễm ở thời điểm 7 ngày tuổi và lặp lại vào lúc 14 ngày tuổi. Trước khi tiêm vacxin nhũ dầu cho gà 2 tháng tuổi, toàn bộ các mẫu huyết thanh của gà thí nghiệm và đối chứng đều được chúng tôi kiểm tra bằng phản ứng HI đối với kháng thể newcastle và IB. Kết quả kiểm tra các mẫu huyết thanh ở gà trước khi tiêm
vacxin bằng phản ứng HI cho thấy, hiệu giá kháng thể Newcastle trung bình là 4,5 log2 và kháng thể IB trung bình là 5,6 log2.
Để đánh giá hiệu lực của vacxin nhũ dầu trên gà đã được miễn dịch cơ sở chúng tôi tiến hành tiêm cho mỗi gà thí nghiệm 1 liều vacxin (0,3 ml vacxin/ gà). Gà sau khi tiêm vacxin được chúng tôi lấy máu định kỳ để kiểm tra hiệu giá kháng thể kháng virus Newcastle và IB theo thời gian bằng phản ứng HI.
Kết quả theo dõi sự biến động hàm lượng kháng thể kháng virus Newcastle trên gà 2 tháng tuổi đã được miễn dịch cơ sở
Kết quả kiểm tra hiệu giá kháng thể kháng virus newcastle ở gà thí nghiệm được tiêm 01 liều vacxin và gà đối chứng theo các thời điểm lấy máu được thể hiện ở Bảng 3.17.
Bảng 3.17. Biến động hiệu giá kháng thể kháng virus Newcastle ở gà 2 tháng
tuổi đã được miễn dịch cơ sở newcastle
Hiệu giá kháng thể HI trung bình theo thời gian Ngày Lô vacxin 7 14 21 28 35 42 49 56 63 70 77 84 91 1 3,3 5,5 7,2 7,9 7,9 8,2 7,6 7,3 7,1 6,8 6,3 5,8 5,4 2 3,2 5,2 7,0 7,4 7,6 8,0 7,9 7,5 7,2 6,7 6,4 6,3 5,6 Đ/C 4,5 4,0 3,8 3,6 3,2 2,8 2,6 2,4 2,2 2,2 2,0 1,8 1,8
Số liệu ở Bảng 3.17 cho thấy, ở thời điểm 7 ngày sau khi tiêm vacxin kết quả kiểm tra lượng kháng thể giảm đi rõ rệt ở cả 2 lô vacxin tiêm cho gà chỉ dao động từ 3,2 log2 đến 3,3 log2 trong khi lượng kháng thể ở gà đối chứng là 4,5 log2. Sở dĩ có hiện tượng này là do khi đưa một lượng kháng nguyên vào cơ thể, kháng thể đặc hiệu có sẵn trong máu gà đã phải trung hòa một lượng kháng nguyên nhất định vì thế mà hiệu giá kháng thể ở gà được tiêm vacxin trong vòng một tuần đầu tiên bị giảm (Trần Thị Lan Hương, 2001).
Từ tuần thứ 2 trở đi lượng kháng thể tăng đều ở gà được tiêm một trong số 2 lô vacxin và đạt đỉnh điểm vào thời điểm 42 ngày tuổi, hiệu giá kháng thể trung bình dao động từ 8,0 log2 đến 8,2 log2. Ở các thời điểm kiểm tra tiếp theo đến 91 ngày sau khi sử dụng vacxin, chúng tôi nhận thấy lượng kháng thể vẫn còn cao ở tất cả gà thí nghiệm được tiêm vacxin, kháng thể newcastle dao động từ 5,4 log2 đến 5,6 log2. Trái lại, gà ở lô đối chứng các thời điểm kiểm tra lượng kháng thể trung bình giảm dần theo thời gian đến thời điểm 91 ngày chỉ còn 1,8 log2. Kết quả nghiên cứu của chúng tôi cũng phù hợp với công bố của Box và cs (1975). Cũng bằng phương pháp công cường độc virus ND với liều 105 EID50 /gà, gà ở lô thí nghiệm không có biểu hiện bệnh trong khi gà ở lô đối chứng không được tiêm vacxin vô hoạt nhũ dầu, phát bệnh và chết sau 5 ngày.
Biểu đồ diễn biến hiệu giá kháng thể newcastle ở các thời điểm kiểm tra trên gà được tiêm một trong số 2 lô vacxin vô hoạt nhũ dầu do chúng tôi sản xuất (biểu đồ hình 3.5).
Hình 3.5. Biến động hiệu giá kháng thể kháng virus newcastle ở gà đã được
miễn dịch cơ sở
Biểu đồ Hình 3.5 cho thấy mức độ biến động về hiệu giá kháng thể newcastle ở gà được tiêm một trong số 2 lô vacxin nhũ dầu, tại các thời điểm kiểm tra, lượng kháng thể ở gà được tiêm các lô vacxin không có sự sai khác (P > 0,05).
Trong khi hiệu giá kháng thể ở gà lô đối chứng có sự sai khác nhiều so với gà được tiêm vacxin (P < 0,05).
Kết quả theo dõi sự biến động hàm lượng kháng thể kháng virus IB trên gà 2 tháng tuổi đã được miễn dịch cơ sở
Chúng tôi tiếp tục kiểm tra sự biến động của hiệu giá kháng thể kháng virus IB trong huyết thanh gà được tiêm các lô vacxin nhũ dầu bằng phương pháp HI. Kết quả kiểm tra hiệu giá kháng thể kháng virus IB ở gà thí nghiệm được tiêm 01 liều vacxin và gà đối chứng được thể hiện ở Bảng 3.18.
Bảng 3.18. Biến động hiệu giá kháng thể kháng virus IB ở gà 2 tháng tuổi đã
được miễn dịch cơ sở IB
Hiệu giá kháng thể HI trung bình theo thời gian
Ngày
Lô vacxin 7 14 21 28 35 42 49 56 63 70 77 84 91
1 2,8 5,6 6,8 7,4 7,8 7,8 7,4 7,4 7,0 6,8 6,4 6,4 6,1
2 3,0 5,4 6,9 7,6 7,9 8,0 7,8 7,6 7,4 6,8 6,6 6,2 6,0
Đ/C 5,6 5,4 5,4 4,8 4,6 4,4 4,0 3,8 3,4 3,4 3,2 3,0 3,0
Kết quả ở Bảng 3.18 cho thấy: Lượng kháng thể ở gà sau khi được tiêm vacxin vô hoạt nhũ dầu nhị giá phòng bệnh Newcastle và IB tăng mạnh từ ngày thứ 14 đến ngày thứ 42, hiệu giá kháng thể IB đạt cao nhất ở thời điểm 42 ngày sau khi sử dụng vacxin (trung bình từ 7,8 log2 đến 8,0 log2). Ở cùng thời điểm này lượng kháng thể ở gà lô đối chứng đã xuống thấp tới ngưỡng bảo hộ (4,4 log2) và thực tế có một số gà của lô đối chứng, lượng kháng thể đã xuống dưới mức bảo hộ. Kết quả kiểm tra các mẫu huyết thanh gà được tiêm vacxin ở các thời điểm tiếp theo, chúng tôi nhận thấy lượng kháng thể ở gà được tiêm vacxin bắt đầu giảm dần theo thời gian. Ở thời điểm 91 ngày sau khi tiêm vacxin, hiệu giá kháng thể trung bình trong huyết thanh gà được tiêm một trong số 2 lô vacxin nói trên vẫn còn cao (từ 6,0 log2 đến 6,1 log2) nằm trong ngưỡng bảo hộ chống lại bệnh viêm phế quản truyền
nhiễm. Trong khi ở cùng thời điểm này lượng kháng thể ở gà đối chứng không tiêm vacxin đã xuống thấp và không đủ bảo hộ (3 log2).
Các mẫu huyết thanh thu thập từ gà thí nghiệm và đối chứng cũng được chúng tôi kiểm tra lại bằng phản ứng ELISA. Kết quả cho thấy, các mẫu huyết thanh thu thập từ gà tiêm vacxin từ ngày thứ 14 trở đi đều cho S/P > 0,2, chỉ số S/P của các mẫu huyết thanh dao động từ 0,45 đến 8,23. Trái lại, ở gà đối chứng theo dõi đến thời điểm 56 ngày chỉ số S/P < 0,2 tức là kháng thể không còn khả năng bảo hộ.
Tổng hợp kết quả theo dõi biến động hiệu giá kháng thể kháng virus IB ở gà được tiêm vacxin tại các thời điểm kiểm tra được thể hiện trên biểu đồ hình 3.6.
Biểu đồ cũng cho thấy biến động kháng thể kháng virus IB ở gà được tiêm vacxin tại các thời điểm kiểm tra, lượng kháng thể ở gà được tiêm các lô vacxin không có sự sai khác (P > 0,05). Trong khi hiệu giá kháng thể ở gà lô đối chứng có sự sai khác nhiều so với gà được tiêm vacxin (P < 0,05).
Hình 3.6. Biến động hiệu giá kháng thể kháng virus IB ở gà đã được miễn dịch cơ sở
Tổng hợp kết quả theo dõi biến động hiệu giá kháng thể kháng virus Newcastle ở gà chưa có miễn dịch cơ sở và gà đã được miễn dịch cơ sở được tiêm vacxin vô hoạt nhũ dầu lô 1 được thể hiện trên biểu đồ hình 3.7.
Hình 3.7. Biến động hiệu giá kháng thể kháng virus Newcastle ở gà chưa có