Gia nhiệt ở 50-600C Mỡ lỏng
Để yên trong 24 giờ Lọc, hút ẩm bằng silicagel
Thêm vào bình cầu chứa xúc tác và etanol
Khuấy đều, duy trì nhiệt độ
Hỗn hợp phản ứng Mỡ động vật đã rửa sạch, để
ráo nước
Quay ly tâm loại xúc tác
Dịch lỏng
Thêm NaCl bão hòa, Lắc đều, để yên trong 24 giờ Chiết, lọc lại, hấp phụ bằng silicagel Sản phẩm
Nguyên liệu cho phản ứng este chéo hóa là một số mỡ động vật như mỡ gà ri, mỡ gà công nghiệp, mỡ cá quả, mỡ cá trắm. Mỡ động vật được rửa sạch, để ráo nước, sau đó gia nhiệt ở 50-600C để lấy phần mỡ. Phần mỡ này được để yên trong 24h rồi loại cặn bằng phương pháp lọc và hút ẩm bằng silica gel. Lắp hệ thống thiết bị phản ứng este chéo hóa. Cho xúc tác và etanol vào bình cầu, khuấy đều trong khoảng 15 phút. Cho từ từ mỡ vào, khuấy đều hỗn hợp phản ứng và duy trì nhiệt độ ổn định. Sau khi quay ly tâm để loại xúc tác, hỗn hợp sau phản ứng được chuyển sang phễu chiết, thêm dung dịch NaCl bão hòa, lắc đều rồi để yên trong 24 giờ. Sau khi hỗn hợp phản ứng đã tách lớp chiết lấy phần lớp trên, lọc lại để loại bỏ hết cặn. Sau cùng, đem hấp phụ bằng silicagel để loại hết phần nước dư cịn lại.
Kí hiệu các mẫu mỡ được liệt kê trong bảng sau:
Bảng 8: Kí hiệu các mẫu mỡ thực hiện phản ứng este chéo hóa
STT Tên mỡ Kí hiệu STT Tên mỡ Kí hiệu
1 Mỡ gà công nghiệp (1) CN1 4 Mỡ cá trắm CT
2 Mỡ gà công nghiệp (2) CN2 5 Mỡ cá quả (1) CQ1
3 Mỡ gà ri GN 6 Mỡ cá quả (2) CQ2
d, Cơ chế phản ứng este chéo hóa
Phản ứng chuyển hóa ester cịn gọi là phản ứng alcol phân, là phản ứng giữa một este với một ancol tạo thành một este mới và một alcol mới. Đối với nguyên liệu là dầu mỡ, thành phần este là triglycerid, phương trình phản ứng được mơ tả như sau:
2.4.2 Phương pháp phân tích sắc ký khí khối phổ (GC-MS)
Thiết bị GC/MS được cấu tạo thành 2 phần: phần sắc ký khí (GC) dùng để phân tích hỗn hợp các chất và tìm ra chất cần phân tích, phần khối phổ (MS) mô tả các hợp phần riêng lẻ bằng cách mơ tả số khối.
Sắc ký khí: Được dùng để chia tách các hỗn hợp của hóa chất ra các phần Ethyl este
Luận văn thạc sỹ Bùi Thị Thanh Hà Bùi Thị Thanh Hà
hỗn hợp mẫu đi qua pha tĩnh, pha tĩnh được sử dụng là các hóa chất, hóa chất này có độ nhạy và hấp thụ thành phần hỗn hợp trong mẫu.
Một chất chia tách, rửa giải phóng đi ra khỏi cột và đi vào đầu dị. Đầu dị có khả năng tạo ra một tín hiệu bất kỳ lúc nào, khi phát hiện ra chất cần phân tích. Tín hiệu này phát ra từ máy tính, thời gian từ khi bơm mẫu đến khi rửa giải gọi là thời gian lưu (TR).
Trong khi các thiết bị chạy, máy sẽ đưa ra các biểu đồ từ các tín hiệu. Đây gọi là sắc đồ.
Khối phổ: Khối phổ được dùng để xác định một chất hóa học dựa trên cấu trúc của nó. Khi giải hấp các hợp chất riêng lẻ từ cột sắc ký, chúng đi vào đầu dị có dịng điện ion hóa (mass spectrometry). Khi đó, chúng sẽ tấn cơng vào các luồng, do chúng bị bỡ thành những mảnh vụn, những mảnh vụn này có thể lớn hoặc nhỏ.
Những mảnh vụn thực tế là các vật mang điện hay còn gọi là ion, điều này là quan trọng bởi vì các hạt cần ở trạng thái tích điện thì mới đi qua được bộ lọc. Các khối nhỏ chắc chắn, khối của mảnh vỡ được chia bởi các vật mang gọi là tỉ lệ vật mang khối (M/Z);
Hầu hết các mảnh vụn có điện tích là +1, M/Z thường miêu tả các phân tử nặng của mảnh vụn. Nhóm gồm 4 nam châm điện gọi là tứ cực (quadrapole), tiêu điểm của các mảnh vụn đi xuyên qua các khe hở và đi vào đầu dò detector, tứ cực được thành lập bởi phần mềm chương trình và hướng các mảnh vụn đi vào các khê của khối phổ.
Phân tích kết quả
Máy tính sẽ ghi lại các biểu đồ của mỗi lần quét. Trục hoành biểu diễn tỉ lệ M/Z cịn trục tung biểu diễn cường độ tín hiệu của mỗi mảnh vụn được quét bởi đầu dò detector. Đây là đồ thị của số khối. Trục X là khối lượng cịn trục Y là số lượng. Mỗi hóa chất chỉ tạo ra một mơ hình duy nhất, nói cách khác mỗi chất có một “dấu vân tay” để nhận dạng, dựa trên mơ hình ion của nó.
Thực nghiệm: Sản phẩm của phản ứng được thực hiện trong điều kiện tối ưu được
đặt trưng bằng phương pháp Sắc kí - Khối phổ GC - MS. Mẫu được phân tích trên máy GC-MS System - Hewlett HP 6800, Mass selective detector Hewlett HP 5973. Cột tách HP - 5 MS crosslinked PH 5 % PE Siloxane, 30m × 0,32μm tại Trung tâm Hoá dầu, Khoa Hoá học, Trường Đại học Khoa học Tự Nhiên, Đại học Quốc Gia Hà Nội.
Luận văn thạc sỹ Bùi Thị Thanh Hà Bùi Thị Thanh Hà