CHƢƠNG II ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
2.4. Tiến hành nghiên cứu
2.4.1. Tạo mẫu nghiên cứu
Mẫu nước: Mẫu đƣợc chuẩn bị bằng cách đong 4,0 L nƣớc cất hai lần vào bình thủy tinh sạch, thêm 0,5 ml dung dịch chuẩn chứa 12 chất chuẩn WHO-PCB, mỗi chất có nồng độ từ 2 đến 20 ng/ml, lắc nhẹ trong vài phút đƣợc mẫu nghiên cứu.
Mẫu đất, trầm tích: Sẽ rất khó để chuẩn bị một mẫu giả có nền giống hồn
tồn với mẫu thật vì chất phân tích sau khi đƣợc thêm vào mẫu sẽ hấp phụ phía ngồi hạt đất, trầm tích. Thực tế trong đất, trầm tích thì chất phân tích có thể phân bố tồn bộ trong các hạt. Trong nghiên cứu này chúng tôi sử dụng silicagel, cát khơng có PCB làm mẫu thử nghiệm.
Dung dịch nghiên cứu qua các cột hấp phụ: Dùng pippet hút chính xác 0,5 ml
dung dịch chuẩn chứa 12 chất chuẩn WHO-PCB, mỗi chất có nồng độ 2 - 20 ng/ml, hòa tan trong 30 ml n-hexan, lắc nhẹ trong 2 phút đƣợc dung dịch nghiên cứu.
Dung dịch đối chứng: Lấy dung dịch nghiên cứu ở phần trên, thêm vào 0,5
ml dung dịch chuẩn 13C12-PCB có nồng độ 20 ng/ml.
2.4.2. Phương pháp khảo sát các điều kiện tách chiết mẫu
Tách chiết mẫu
Dựa trên tính chất hóa lý của chất phân tích và nền mẫu, dung mơi tách chiết đƣợc lựa chọn dựa trên độ phân cực, khả năng tƣơng tác với chất phân tích, tỷ trọng, nhiệt độ sơi. Chúng tơi chọn 3 loại dung mơi để khảo sát quy trình tách chiết mẫu là toluen, n-hexan, diclometan và tiến hành tách chiết mẫu bằng kỹ thuật chiết lỏng-lỏng với mẫu nƣớc, chiết soxlet với mẫu đất, trầm tích.
Làm sạch, làm giàu dịch chiết trên cột hấp phụ
- Dùng H2SO4 96%, NaCl 5%, KOH 17% làm sạch sơ bộ dịch chiết mẫu. - Dùng cột “đa lớp”: Na2SO4 khan/ SiO2 tẩm KOH/ 3 lớp (Na2SO4 / SiO2 tẩm H2SO4) với dung môi rửa giải n-hexan.
- Dùng cột nhơm ơxít để tách phân đoạn 12 đồng loại WHO-PCB bằng hỗn hợp hexan:diclometan (95:5).
Tối ƣu hóa lƣợng chất hấp phụ, chúng tôi khảo sát ở các mức khối lƣợng nhơm ơxít lần lƣợt là 3 g, 4 g, 6 g, 8g.
Tối ƣu hóa thể tích dung môi rửa giải, sử dụng hỗn hợp hexan:diclometan (95:5) làm dung môi rửa giải và khảo sát ở các mức thể tích 15, 30, 50 ml.
2.4.3. Lựa chọn, tối ưu các điều kiện phân tích sắc ký
Việc phân tích định tính và đinh lƣợng 12 WHO-PCB đƣợc tiến hành trên Sắc kí khí khối phổ GC6890/ MSD5972A Hewlett Packard, USA.
Để tìm điều kiện phân tích tối ƣu trên thiết bị chúng tôi tiến hành khảo sát trên cột sắc ký DB-5MS và cột BPX-DXN với các thơng số chƣơng trình nhiệt độ, lƣu lƣợng khí mang,… đã đƣợc lựa chọn, tối ƣu.