CHƢƠNG 2 : THỰC NGHIỆM
2.2. Chất chuẩn, hoá chất, thiết bị
2.2.1. Chất chuẩn
Các chất chuẩn digoxin và digitoxin đƣợc mua ở Viện kiểm nghiệm dạng rắn, với độ tinh khiết 99,2%. Các dung dịch chuẩn gốc đƣợc cân trên cân phân tích từ chất chuẩn và pha với etanol của Merk, cụ thể:
Bảng 2.2: Nồng độ các dung dịch chuẩn glycoside tim
STT Tên chất Khối lƣợng cân Nồng độ (ppm)
1 Digoxin 0,025 gam 1000 Định mức đến 25ml
bằng etanol 80%
2 Digitoxin 0,025 gam 1000 Định mức đến 25ml
bằng etanol.
Các dung dịch chuẩn tƣơng ứng 100ppm đƣợc pha từ dung dịch 1000ppm tƣơng ứng. Lấy 1ml dung dịch chuẩn gốc 1000ppm định mức đến 10ml bằng etanol. Các dung dịch chuẩn gốc đƣợc bảo quản trong tủ lạnh, nhiệt độ dƣới 4oC. Các dung dịch chuẩn làm việc đƣợc pha từ dung dịch gốc hàng ngày, tuỳ theo mức nồng độ sử dụng.
2.2.2. Hố chất
- Các dung mơi cho sắc ký lỏng hiệu năng cao: ACN (Merk – Đức) - Dung môi pha chất chuẩn: etanol (Merk – Đức)
- Nƣớc cất đƣợc sử dụng là nƣớc cất hai lần đã đƣợc đeion hoá.
2.2.3. Thiết bị, dụng cụ
Thiết bị:
- Hệ thống HPLC Shimadzu 10Avp với detector PDA Shimadzu SPD – M10Avp.
- Cân phân tích Scientech SA 210, độ chính xác 0,0001 g. - Máy rung siêu âm, có gia nhiệt.
Dụng cụ: - Bình định mức: 10, 25, 50 ml, cùng hãng. - Pipet thƣờng 5, 10 ml - Pipetman các loại từ 0 – 1000µl. - Ống thủy tinh 20 ml. - Cốc 100, 50, 25 ml, cốc cân... - Màng lọc 0,45 µm.
Tất cả các dụng cụ thủy tinh đều phải đƣợc rửa sạch, tráng bằng nƣớc cất, sau đó tráng bằng ACN ba lần và để khơ trƣớc khi sử dụng.