A B Zym Nồng độ Cytokine (pg/ml) Zym Nồng độ cytokine (pg/ml) ĐCĐC Dex W 1500 500 1000 0 2000 IL-6 0 20 40 60 80 100 (h) 0 20 40 60 80 100 Khả năng sống xót (%) W(20mg/kg) Dex (1mg/kg) ĐC 3000 1000 2000 0 4000 TNF- ĐC ĐC Dex W
Luận văn Thạc sĩ Khoa học Thân Văn Minh
A, Chuột đƣợc chia làm 3 nhóm khác nhau (n = 10 con/ một nhóm). Nhóm thứ nhất khơng đƣợc tiêm Wedelolactone hoặc Dexamethasone. Nhóm thứ 2 đƣợc tiêm Wedelolactone 20 mg/kg trọng lƣợng cơ thể. Nhóm 3 nhận đƣợc Dexamthasone 1mg/kg trọng lƣợng cơ thể. Sau 24 giờ, các nhóm chuột này đƣợc tiêm với zymosan (2 mg/g trọng lƣợng cơ thể). Khả năng sống đã đƣợc xác định sau 5 giờ đối với 40 giờ đầu và sau đó là 10 giờ trong 5 ngày. B, Máu của chuột bị nhiễm trùng nặng và choáng nhiễm trùng đƣợc nhận Wedelactone và chuột không đƣợc nhận Wedelolactone đƣợc tách huyết thành bằng ly tâm (10.000 vịng/phút). Sau đó các mẫu huyết thanh đƣợc xác định cytokine bằng đo ELISA. Chuột không nhận đƣợc Wedelolactone, ĐC; Chuột nhận đƣợc Wedelolactone, W; Zymosan, Zym; Dexamethasone, Dex.
Luận văn Thạc sĩ Khoa học Thân Văn Minh
KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ KÊT LUẬN
1. Nghiên cứu này đã chứng minh đƣợc vai trò của Wedelolactone với nồng độ 20μg/ml trong quá trình kháng viêm thông qua thụ thể Dectin-1 đã ức chế đƣợc quá trình sinh cytokine tiền viêm TNF, IL-6, IL12p40 của BMDM ở chuột.
2. Chứng minh đƣợc vai trò của Wedelolactone với nồng độ 20μg/ đã ức chế đƣợc quá trình sinh gốc oxy hóa thơng qua thụ thể Dectin-1 của BMDM ở chuột.
3. Quan trọng hơn, Wedelolactone với nồng độ là 20mg/kg trọng lƣợng cơ thể có thể cải thiện đƣợc sự sống của chuột bị nhiễm trùng nặng và choáng nhiễm trùng.
KIẾN NGHỊ
1. Tiếp tục nghiên cứu sâu hơn trong cơ chế chống viêm bằng thử trên các đối tƣợng khác nhau ngoài chuột.
2. Xác định thêm Wedelolactone có phải là một cấu tử của thụ thể Glucocorticoid hay không.
Luận văn Thạc sĩ Khoa học Thân Văn Minh
TÀI LIỆU THAM KHẢO TÀI LIỆU TIẾNG VIỆT
1. Đặng Diễm Hồng, Hoàng Minh Hiền, Nguyễn Minh Thanh, Châu Văn Minh, Nguyễn Trọng Thông (2008) Nghiên cứu khả năng kháng viêm từ rong tảo biển Việt Nam. Tạp chí Hố học. 46(5A): 81-90.
2. Đỗ Tất Lợi (2000) Những cây thuốc và vị thuốc Việt Nam. NXB Y học Hà Nội. 3. Đỗ Thị Oanh , Phạm Thanh Kỳ , Nguyễn Thi ̣ Bích Hằng , Nguyễn Tro ̣ng Thông ,
Phạm Thị Vân Anh (2010) Nghiên cƣ́u tác du ̣ng chống viêm và bảo vê ̣ gan của cao sói rừng (Sapium sebiferum) trên thƣ̣c nghiê ̣m . Tạp chí Dược học . 50(411): 36-39.
4. Hà Vân Oanh , Phạm Xuân Sinh , Nguyễn Thái An , Nguyễn Tro ̣ng Thông , Phạm Thị Vân Anh (2010) Nghiên cƣ́u tác du ̣ng chống viêm cấp của cao lỏng rễ bạch đồng nữ (Clerodendrum Chinese var. simplex (Mold) SL Chen) trên thƣ̣c nghiê ̣m. Tạp chí Dược học. 50(414): 20-23.
5. Nguyễn Thi ̣ Bích Hằng , Phạm Thanh Kỳ, Nguyễn Tro ̣ng Thông , Phạm Thị Vân Anh, Nguyễn Thị Hoa Hiên (2009) Nghiên cƣ́u tác du ̣ng chống viêm của cao lỏng lá vọng cách (Premna corymbosa Rotteneen) thƣ̣c nghiê ̣m . Tạp chí Dược học. 48(389): 22-24.
TÀI LIỆU TIẾNG ANH
6. Ahn, J. Y., Song, J. Y., Yun, Y. S., Jeong, G., Choi, I.S., et al. (2006)
Protection of Staphylococcus aureus infected septic mice by suppression
of Early acute inflammation and enhanced antimicrobial activity by ginsan. FEMS Immunology and Medical Microbiology 46: 187-197.
7. Annane, D., Sebille, V., Bellissant, E., the Ger-Inf Study Group. (2006)
Effects of low dose corticosteroids in septic shock patients with or without early acute respiratory distress syndrome. Crit Care Med 34:
Luận văn Thạc sĩ Khoa học Thân Văn Minh
8. Ariizumi, K., Shen, G.L., Shikano, S., Xu, S., Ritter, R., Kumamoto, T.,
Edelbaum, D., Morita, A., Bergstresser, P.R., Takashima, A. (2000) Identification of a novel, dendritic cell-associated molecule, dectin-1, by subtractive cDNA cloning. Journal of Biological Chemistry 275: 20157-
20167. 9.
10.
Attele, A.S., Wu, J.A., Yuan, C.S. (1999) Ginseng pharmacology:
Multiple constituents and multiple actions. Biochemical Pharmacology 58: 1685-1693.
Babior, B.M. (1999) NADPH oxidase: an update. Blood 93:146476. 11.
12.
Bailey, J.M. (1991) New mechanisms for effects of anti-inflammatory glucocorticoids. Biofactors 3: 97-102.
Barnes, P.J., Karin, M. (1997) Nuclear factor-kappaB: A pivotal transcription factor in chronic inflammatory disease. The England new journal of medicine 336: 1066-1071.
13. Bauer, S., Kirschning, C.J., Häcker, H., Redecke, V., Hausmann, S., Akira, S., Wagner, H., Lipford, G.B. (2001) Human TLR9 confers responsiveness to bacterial DNA via species-specific CpG motif recognition. Proc Natl Acad Sci
98: 9237–9242. 14.
15.
16.
Bedard, K., Krause, K-H. (2007) The NOX family of ROS-generating NADPH oxidases: physiology and pathophysiology. Physiol Rev 87: 245–313.
Blanqué R, Meakin C, Millet S, Gardner CR (1998) Selective enhancement of LPS-induced serum TNF-alpha production by carrageenan pretreatment in mice. General Pharmacology. 31(2):301-6
Brown GD (2006) Dectin-1: a signaling non-TLR pattern-recognition receptor. Nature. 6: 33-43.
17.
18.
Briegel, J., Kellermann, W., Forst, H., Haller, M., Bittl, M., Hoffmann, G.E., et al. (1994) Low-dose hydrocortisone infusion attenuates the systemic inflammatory response syndrome. The phospholipase A2 study group.
Clin Invest 72:/782-7.
Boguski MS (2002) News and views comparative genomics: The mouse that roared. Nature. 420: 515-516.
Luận văn Thạc sĩ Khoa học Thân Văn Minh
19. Brown, G.D., Gordon, S. (2001) Immune recognition. A new receptor for beta- glucans. Nature 413: 36-37.
20. Brown, G.D. (2006) Dectin-1: a signaling non-TLR pattern-recognition receptor. Natrure 6: 33-43.
21. Choi, K.T. (2008) Botanical characteristics, pharmacological effects and medicinal components of Korean Panax ginseng C A Meyer. Acta Pharmacol Sin. 29: 1109–1118.
22. Clark, A.R. (2007) Anti-inflammatory functions of glucocorticoid-induced genes. Molecular and Cellular Endocrinology 275: 79-97.
23. Cuzzocrea, S., Di, Paola. R., Mazzon, E., Patel, N.S., Genovese, T., Muia, C., Crisafulli, C., Caputi, A.P., et al. Thiemermann, C., et al. (2006) Erythropoietin reduces the development of nonseptic shock induced by zymosan in mice. Critical Care Medicine 34: 1168-1177.
24. Cuzzocrea, S., Filippelli, A., Zingarelli, B., Falciani, M., Caputi, A.P., Rossi, F., et al. (1997) Role of nitric oxide in a nonseptic shock model induced by zymosan in the rat. Shock 7: 351-357.
25 Dang, P.M., Stensballe, A., Boussetta, T., Raad, H., Dewas, C., Kroviarski Y, Hayem G, Jensen ON, Gougerot-Pocidalo MA, El-Benna J. (2006) A specific p47phox-serine phosphorylated by convergent MAPKs mediates neutrophil NADPH oxidase priming at inflammatory sites. Journal of Clinical Investigation 116: 2033-2043.
26. Donini, M., Zenaro, E., Tamassia, N., Dusi, S. (2007) NADPH oxidase of human dendritic cells: role in Candida albicans killing and regulation by interferons, dectin-1 and CD206. European Journal of Immunology 37: 1194-203.
27. Doyle, S., et al. (2002) IRF3 mediates a TLR3/TLR4- specific antiviral gene program. Immunity 17: 251–263.
28.
29.
El Benna, J., Faust, L.P., Babior, B.M. (1994) The phosphorylation of the respiratory burst oxidase component p47phox during neutrophil activation. Phosphorylation of sites recognized by protein kinase C and by proline- directed kinases. Journal of Biological Chemistry 269: 23431-6.
Luận văn Thạc sĩ Khoa học Thân Văn Minh
30.
31.
32.
33.
granuloma pouch method for evaluation anti-inflammatory activity. Arc International Pharmcodynamic Therapy. 165: 294-301.
Kobori M. (2004) Wedelolactone suppresses LPS-induced caspase-11 expression by directly inhibiting the IKK complex. Cell Death and Differentiation 11: 123–130.
Vane J and Botting R (1987) Inflammation and the mechanism of action of anti-inflammatory drugs. The FASEB Journal, 1(2): 89-96.
Wagner H., et al. (1986) Coumestans as the Main Active Principles of the Liver Drugs Eclipta alba and Wedelia calendulacea. Planta Med 5: 370-4. Winter CA, Risely EA, Nuss GW (1962) Carregeenan induced edema in hind
paw of the rat as assay for anti-inflammatory drugs. Proceedings of the Society for Experimental Biology and Medicine. 111: 544–547.