Vdịch ni/Vbình (%) 10 15 20 25 30
Lượng huyết tan, % 60,3a 60,2a 60,1a 60,4b 57,5c
Ghi chú: Sự khác nhau giữa các chữ cái trên cùng một hàng biểu thị sự sai khác có ý nghĩa thống kê (P< 0,05) của giá trị trung bình giữa các nghiệm thức.
Lượng dịch lên men chiếm 25% so với thể tích bình tam giác là thích hợp nhất cho sinh tổng hợp NK của chủng B. subtilis BD170 tái tổ hợp. Ở các mức thấp, lượng oxy nhiều hơn nhưng hoạt tính vẫn duy trì ổn định, trừ khi tăng lượng dịch lên 30% thì hoạt tính NK mới thực sự giảm. Do vậy, Vdịch ni/Vbình là 25% (v/v) là lượng dịch được chọn cho quá trình lên men trong bình tam giác. Với Vdịch ni/Vbình = 25%, dịch sau lên men có khả năng làm tan 60,4% huyết khối và hoạt tính đạt được là 388,5 FU/ml.
3.2.4. Ảnh hưởng của tuổi giống và lượng giống tới sinh tổng hợp NK
Lượng giống ban đầu và tuổi giống ảnh hưởng trực tiếp tới pha lac của quá trình lên men. Trong các nghiên cứu trên đều tiến hành lên men chủng B. subtilis
BD170 tái tổ hợp trong bình tam giác với lượng giống tiếp cho lên men là 3% và thời gian nhân giống là 24 giờ. Để nghiên cứu các yếu tố ảnh hưởng này, tiến hành thay đổi thời gian nhân giống 18, 24, 30, 36 giờ và lượng giống từ: 1%; 3%; 5%; 7%; và 9% so với lượng dịch lên men. Sau đó giống được tiếp cho lên men với các điều kiện thích hợp đã lựa chọn ở các nghiên cứu trên về pH, nhiệt độ, môi trường tối ưu của quá trình lên men, sau 48 giờ lên men xác định khả năng làm tan huyết khối của dịch enzyme. Kết quả được trình bày ở bảng 3.16 và 3.17.