Sắc kí đồ Sarafloxacin và sản phẩm phụ trong mơi trường NaCl 100mM

Hình 3 .4c Phổ hấp thụ quang phân tử của SARA tại pH 11,6

Hình 3.38 Sắc kí đồ Sarafloxacin và sản phẩm phụ trong mơi trường NaCl 100mM

Sarafloxacin và sản phẩm

phụ tại pH 6,9.

Hình 3.38. Sắc kí đồ Sarafloxacin và sản phẩm Sarafloxacin và sản phẩm

phụ trong mơi trường NaCl 100mM

Hình 3.39. Sắc kí đồ Sarafloxacin và sản phẩm

phụ trong mơi trường Na2SO4 33,33mM Bảng 3.20. Sản phẩm phụ trong quá trình quang phân SARA tại các điều kiện khác nhau.

[SARA]= 0,83M. Tpư=280,50

C Thời gian lưu (phút)

SARA SP1 6,322

SP2 7,038

SARA+NaCl SP3 6,204

SP4 8,018

SARA+ Na2SO4 SP5 6,110

Qua bảng kết quả và đồ thị ta có thể thấy có 5 sản phẩm phụ tạo thành trong

mơi trường chỉ có SARA và pH 6,9 thì quan sát thấy có hai sản phẩm SP1, SP2 thời gian lưu tương ứng là 6,322 và 7,038 diện tích pic các sản phẩm này tăng dần theo thời gian phản ứng. Trong mơi trường SARA có thêm NaCl 100mM nhận thấy có hai sản phẩm phụ được tạo thành là SP3, SP4 với thời gian lưu tương ứng là 6,204

và 8,018 phút. Mặt khác trong mơi trường có Na2SO4 33,33 mM thì quan sát thấy

một sản phẩm phụ SP5 thời gian lưu là 6,110.

Tiến hành xác định phổ MS các mẫu ban đầu của Sarafloxacin trong các điều kiện khác nhau thu được kết quả như sau.

Bảng 3.21. Kết quả xác định phổ MS của SARA trong các điều kiện khác nhau.

Nguồn ion hóa: ESI; khí mang: N2; positive điện áp -200mV; cường độ dịng

50nA

Chất phân tích Khối lượng [M+H]

+

theo lí thuyết (m/z) Khối lượng thực tế đo được (m/z)

SARA 386,4 386,1 387,9 385,5

SARA+ NaCl 386,4 385,9 413,3 422,7

SARA+ Na2SO4 386,4 385,5 413,3 377,0

Qua bảng kết quả nhận thấy khối lượng mảnh ion mẹ thực tế đo được trùng hợp với tính tốn lý thuyết. Tuy nhiên trong mơi trường có mặt NaCl 100mM và

Na2SO4 33,33mM thì xuất hiện thêm những pic lạ, có thể dưới tác dụng của nồng

độ muối cao gây nên sự sai khác khi đo khối phổ hoặc có thể các phân tử NaCl và

Na2SO4 đã tương tác với Sarafloxacin tạo nên sự sai khác về khối lượng của mảnh

ion mẹ.

Tiến hành phân tách sản phẩm phụ từ quá trình quang phân Sarafloxacin với

nồng độ đầu là 0,83M, pH 6,9 nhiệt độ phản ứng là 280,50C, thời gian phản ứng

là 480s. Xác định bằng HPLC-MS thu được kết quả như trong bảng 3.22

Bảng 3.22. Kết quả xác định phổ MS của sản phẩm phụ.

Nguồn ion hóa: ESI; khí mang: N2; positive điện áp -200mV; cường độ dòng

50nA

Sản phẩm phụ Khối lượng Khối lượng [M+H]

+

thuyết (m/z)

SP1 402 402,5 C20H17O4N3F2

SP2 280 279,9 C16H12N2O3

Từ cơ chế phản ứng phân hủy SARA trong hình 3.36 cho thấy rằng có nhiều dạng sản phẩm phụ tạo ra trong quá trình phản ứng quang hóa. Trong điều kiện thí nghiệm của chúng tôi và với kết quả xác định phổ MS đã xác định được hai sản phẩm phụ với số khối tương ứng là 402,5 ứng với SP1 có cơng thức phân tử là

C20H17O4N3F2 và 279,9 ứng với SP2 có cơng thức phân tử là C16H12N2O3 trong đó

SP1 là sản phẩm phụ đã được báo cáo trong những nghiên cứu trước đó, tuy nhiên sản phẩm SP2 là sản phẩm hoàn toàn mới với sự thay thế 2 nguyên tử Flo trong công thức của sản phẩm D hình 3.36 bằng 2 nguyên tử H, điều này là phù hợp với cơ chế tạo thành sản phẩm phụ của q trình quang hóa của Floroquinolon đã được nghiên cứu trước đó [18]. Hai sản phẩm được tạo ra trong điều kiện thí nghiệm của chúng tơi được biểu diễn trong hình 3.40

SP1 : C20H17O4N3F2 1-(3-carboxy-6-fluoro-1-(4- fluorophenyl)-4-oxo-1,4- dihydroquinolin-7-yl)piperazine 1-oxit SP2: C16H12N2O3 axit 7-amino-4-oxo-1-phenyl-1,4- dihydroquinolin-3-carboxylic