2.3 .Thực nghiệm
2.3.2 .Chuẩn bị mẫu
Mẫu đất có chứa DDT được để khơ tự nhiên tại nhiệt độ phịng. Sau đó mẫu đất được nghiền và rây nhỏ với kích thước hạt ≤ 0,1 mm.
2.3.2.1.Xác định nồng độ DDT trong mẫu đất
Cân chính xác 20g đất khơ cho vào phễu chiết. Cho vào phễu chiết 50ml hỗn hợp n-hexan: axeton (tỉ lệ 2:1, V/V). Tiến hành lắc chiết trong 1 giờ. Sau khi lắc xong để lắng cho phân lớp, thu lấy phần dung mơi phía trên, đựng dịch lọc vào bình nón 250ml. Mẫu được lắc chiết thêm 2 lần nữa với cùng thể tích dung mơi và thu dịch chiết vào bình nón 250 ml trên. Tồn bộ phần dịch chiết được lọc qua giấy lọc băng xanh. Chuyển phần dịch lọc này vào phễu chiết. Lấy 50 ml nước cất 2 lần cho vào phễu chiết đã đựng sẵn phần dịch chiết, lắc trong 15 phút, để lắng cho đến khi phân lớp hồn tồn, loại bỏ lớp nước phía dưới giữ lại phần dung dịch phía trên. Tiến hành làm sạch mẫu bằng cách cho vào dịch chiết trong phễu từ từ 5 ml axit sunfuric đặc, sau đó lắc hỗn hợp trong 5 phút, để phân lớp hồn tồn, tách loại bỏ lớp axit phía dưới, lặp lại 3 lần quá trình này tới khi thấy dịch chiết khơng cịn màu. Chuyển dung dịch chiết đã làm sạch vào bình cầu 250 ml và tiến hành cơ mẫu bằng khí N2 cho tới khi cịn 1ml lượng dung dịch còn lại được tách loại chất bẩn trên cột sắc ký.
2.3.2.2.Tách loại tạp chất trên cột sắc ký
Sử dụng cột sắc ký thủy tinh dài 32 cm, đường kính trong 0,4 cm. Cột được nhồi từ phía dưới lên theo thứ tự, lớp dưới là bơng thủy tinh, lớp giữa là 6g chất hấp phụ Al2O3; lớp trên cùng là 2g Na2SO4 khan.
Trước khi cho mẫu vào cột, chất hấp phụ Al2O3 được hoạt hóa bằng cách cho lần lượt 20ml n-hexan chảy qua cột, tiếp theo cho 30ml hỗn hợp n- hexan: diclometan (4:1, V/V) qua cột. Nạp phần dung dịch mẫu đã cơ về 1ml vào cột. Tiếp đó rửa giải các chất cần xác định bằng 20ml hỗn hợp n-hexan : diclometan (1:1, V/V); thu lấy dịch rửa giải này vào bình cầu 50ml và sau đó dùng khí nitơ sạch cơ về 0,5ml; chuyển lượng mẫu này vào lọ 3ml bảo quản trong tủ lạnh 50C đến khi phân tích trên thiết bị sắc ký khí với detectơ cộng kết điện tử (GC/ECD). Điều kiện phân tích DDT, DDD và DDE trên GC/ECD được nêu ở mục 2.3.4.
Sơ đồ quy trình trình tách chiết DDT trong mẫu đất được tóm tắt trong hình 7.