2.2.1. Ngu͛n g͙c và c̭u trúc hóa h͕c cͯa chitosan
2.2.1.1. Ngu͛n g͙c cͯa chitosan
&KLWLQÿѭӧc Bracannot phát hiӋn lҫQÿҫXWLrQYjRQăPWURQJFһn dӏch triӃt cӫa mӝt loҥi nҩPYjÿһWWrQOj³)XQJLQH´ÿӇ ghi nhӟ nguӗn gӕc cӫDQy1ăP 1823, Odier phân lұSÿѭӧc mӝt chҩt tӯ bӑ cánh cӭng mà ông gӑi là ³FKLWLQ´KD\ ³FKLWRQ´WLӃng Hy LҥSQJKƭDOjYӓ JLiSQKѭQJ{QJNK{QJSKiWKLӋn ra sӵ có mһt cӫa nito. Cuӕi cùng cҧ %UDFDQQRWYj2GLHUÿӅu cho rҵng cҩu trúc cӫa chitin giӕng cҩu trúc cӫa cellulose [7].
7URQJÿӝng vұt, chitin là mӝt thành phҫn cҩu trúc quan trӑng cӫa vӓ mӝt sӕ ÿӝng vұW NK{QJ [ѭѫQJ VӕQJ QKѭ F{Q WUQJ QKX\Ӊn thӇ, giáp xác và giun tròn. 7URQJÿӝng vұt bұc cao monomer cӫa chitin là mӝt thành phҫn chӫ yӃu trong mô da nó giúp cho sӵ tái tҥo và gҳn liӅn các vӃWWKѭѫQJӣ da.Trong thӵc vұt chitin có ӣ thành tӃ bào nҩm hӑ Zygenmyctes, các sinh khӕi nҩm mӕc, mӝt sӕ loҥi tҧo [5].
Chitosan chính là sҧn phҭm biӃn tính cӫD FKLWLQ&KLWRVDQ ÿѭӧc xem là polymer tӵ nhiên quan trӑng nhҩt. VӟLÿһc tính có thӇ hòa tan tӕWWURQJP{LWUѭӡng acid yӃXFKLWRVDQÿѭӧc ӭng dөng trong nhiӅXOƭQKYӵFQKѭWKӵc phҭm, mӻ phҭm, Gѭӧc phҭP«*LӕQJQKѭFHOOXORVHFKLWRVDQOjFKҩW[ѫNK{QJJLӕng chҩW[ѫWKӵc vұt, chitosan có khҧ QăQJ Wҥo màng, có các tính chҩt cӫa cҩu trúc quang hӑc. Chitosan có khҧ QăQJWtFKÿLӋQGѭѫQJGRÿyQycó khҧ QăQJNӃt hӧp vӟi nhӳng chҩt WtFKÿLӋQkPQKѭFKҩWEpROLSLGYjDFLG&KLWRVDQOjSRO\PHUNK{QJÿӝc, có khҧ QăQJSKkQKӫy sinh hӑFYjFyWtQKWѭѫQJWKtFKYӅ mһt sinh hӑc. Trong các loҥi thӫy sҧQ ÿһc biӋt là trong vӓ tôm, cua, ghҽKjP Oѭӧng chitin-chitosan chiӃm khá cao, GDRÿӝng tӯ 14-34% so vӟLKjPOѭӧng chҩt khô. Vì vұy, vӓ cӫa chúng là nguӗn nguyên liӋu quan trӑQJÿӇ sҧn xuҩt chitin [7].
20
Hình 2.2. Mӝt sӕ loài giáp xác chӭa chitin
2.2.1.2. C̭u trúc hóa h͕c cͯa chitosan
Hình 2.3. Công thӭc cҩu tҥo cӫa chitin
Hình 2.4. Công thӭc cҩu tҥo cӫa chitosan
&KLWRVDQWKXÿѭӧc nhӡ phҧn ӭng deacetyl hóa chitin, biӃQÿәi nhóm N-acetyl (- COCH3) thành nhóm amin (-NH2) ӣ vӏ trí C2&KLWRVDQÿѭӧc cҩu tҥo tӯ các mҳt xích D-glucosamine liên kӃt vӟi nhau bӣi liên kӃWȕ-1,4-JOXFRVLGH'RÿyTXiWUuQKGHDFHW\O
21
xҧ\UDNK{QJKRjQWRjQQrQQJѭӡLWDTX\ ѭӟc nӃu mӭFÿӝ deacetyl hóa ( degree of deacetylation-DD) DD > 50% gӑi là chitosan, nӃu DD < 50% gӑi là chitin [5].
2.2.2. Kh̫ QăQJW̩o màng cͯa chitosan
Chitosan có khҧ QăQJWҥo màng sӱ dөng trong bҧo quҧn thӵc phҭm nhҵm hҥn chӃ các tác nhân gây bӋnh.Khi dùng màng chitosan, dӉ GjQJÿLӅu chӍQKÿӝ ҭPÿӝ thoáng không khí cho thӵc phҭm.NӃu dùng bao gói bҵng Polyethylen (PE) thì mӭc cung cҩp oxy bӏ hҥn chӃQѭӟc sӁ bӏ QJѭQJÿӑng tҥRP{LWUѭӡng cho nҩm mӕc phát triӇQ0jQJFKLWRVDQFNJQJNKiGDLNKy[pUiFKFyÿӝ bӅQWѭѫQJÿѭѫQJYӟi mӝt sӕ chҩt dҿo vүQÿѭӧc dùng làm bao gói [25].
2.2.3. Tính ch̭t sinh h͕FYjÿ͡c tính cͯa chitosan
2.2.3.1. Tính ch̭t sinh h͕c cͯa chitosan
Chitosan là hӧp chҩt tӵ QKLrQ NK{QJ ÿӝc, dùng an toàn vӟL FRQ QJѭӡi. &KLWRVDQFyWtQKWѭѫQJWKtFKVLQKKӑc cao và có khҧ QăQJSKkQKӫy sinh hӑc nên không gây phҧn ӭng phө, không gây tác hҥi vӟLP{LWUѭӡng [8].
Chitosan có nhiӅu tác dөng sinh hӑFÿDGҥQJQKѭ&yNKҧ QăQJK~WQѭӟc, giӳ ҭm, tính kháng nҩm, tính kháng khuҭn vӟi nhiӅu chӫng loҥi khác nhau, kích thích sӵ phát triӇQWăQJVLQKFӫa tӃ bào, có khҧ QăQJQX{LGѭӥng tӃ bào trong ÿLӅu kiӋn QJKqRGLQKGѭӥng, tác dөng cҫm máu, chӕng sung u. Có khҧ QăQJWѭѫQJWKtFKVLQK hӑc vӟL FiF Fѫ TXDQ P{ WӃ EjR ÿӝng vұt và thӵc vұW .K{QJ Jk\ ÿiS ӭng miӉn dӏFKWURQJP{YjFѫTXDQÿӝng vұt.Vӟi khҧ QăQJWK~Fÿҭy hoҥWÿӝng cӫa các peptit- insulin, kích thích viӋc tiӃt ra insulin ӣ tuyӃn tө\QrQFKLWRVDQÿmÿѭӧFGQJÿӇ ÿLӅu trӏ bӋnh tiӇX ÿѭӡng. NhiӅX F{QJ WUuQK ÿmWX\rQ Eӕ khҧ QăQJ NKiQJ ÿӝt biӃn, kích WKtFKOjPWăQJFѭӡng hӋ thӕng miӉn dӏFKFѫWKӇ, khôi phөc bҥch cҫu, hҥn chӃ sӵ phát triӇn các tӃ bjRXXQJWKѭ+,9$,'6«Fӫa chitosan [22].
Ngoài ra, chitosan còn có tác dөng làm giҧm cholesterol và lipid máu, hҥ huyӃWiSÿLӅu trӏ thұn mãn tính, chӕng rӕi loҥn nӝi tiӃt [13].
22
Ĉ͡c tính cͯa chitosan
.QRUU ÿm FKӭng minh rҵng chҩW ÿӝc trong chitosan ӣ nӗQJ ÿӝ 18g chitosan/kg trӑQJOѭӧQJFѫWKӇ/ngày mӟi có hҥLÿӕi vӟi chuӝt. LiӅXOѭӧng LD50 = 16g/kg trӑQJOѭӧQJFѫWKӇNK{QJJk\ÿӝFWUrQÿӝng vұt thӵc nghiӋPYjQJѭӡi [21]. NhiӅu tác giҧ ÿm FKӍ rõ nhӳQJ ѭX ÿLӇm cӫa chitosan: tính chҩW Fѫ hӑc tӕt, NK{QJÿӝc, dӉ tҥo màng, có thӇ tӵ phân hӫy sinh hӑFFyWtQKWKѭѫQJWKtFKYӟLÿӝng thӵc vұt, là vұt liӋu y sinh tӕt làm mau liӅn vӃWWKѭѫQJ
&KLWRVDQFNJQJÿѭӧc cөc VӋ sinh An toàn Thӵc phҭm ViӋt Nam cho phép sҧn xuҩWYjOѭXKjQKWUrQWRjQTXӕc theo hӗ VѫF{QJEӕ QăP&өc quҧn lý Thӵc phҭP Yj 'ѭӧc phҭm Hoa KǤ (Food and Drug Administration) cho phép sӱ dөng chitosan là chҩt phө gia làm sҥFKQѭӟc uӕng tҥi Mӻ [22].
2.2.4. Tính kháng vi sinh v̵t cͯa chitosan
GҫQ ÿk\ QKӳng nghiên cӭu vӅ tính kháng khuҭn cӫD FKLWRVDQ ÿm FKӍ ra rҵng chitosan có khҧ QăQJ ӭc chӃ sӵ phát triӇn cӫa vi khuҭn, nҩm men, nҩm mӕc. Khҧ QăQJNKiQJNKXҭn cӫa chitosan phө thuӝc vào mӝt vài yӃu tӕ QKѭORҥi chitosan sӱ dөQJ ÿӝ deacetyl hóa, khӕL Oѭӧng phân tӱ S+ P{L WUѭӡng, nhiӋt ÿӝ, sӵ có mһt cӫa mӝt sӕ thành phҫn thӵc phҭm. Khҧ QăQJ NKiQJ NKXҭn cӫa FKLWRVDQÿѭӧc nghiên cӭu bӣi mӝt sӕ tác giҧ YjFѫFKӃ giҧLWKtFKÿӅu chӍ ra rҵng viӋc ӭc chӃ vi khuҭn cӫa chitosan là do liên kӃt giӳa chuӛi polyme cӫa chitosan vӟi các ion kim loҥi trên bӅ mһt vi khuҭQ OjP WKD\ ÿәi tính thҩm cӫa màng tӃ EjR7URQJÿyFKLWRVDQWiFGөng trên vi khuҭn Gram (-) tӕWKѫQYLNKXҭn Gram (+). Theo mӝt sӕ nghiên cӭu, tҩt cҧ các vi khuҭQ *UDP kP ÿӅu có lӟp màng QJRjL Oj OLSRSRO\VDFFKDULGH /36 WURQJ ÿy ÿyQJ Jóp vào sӵ әQ ÿӏnh cӫa lӟp /36WK{QJTXDWѭѫQJWiFWƭQKÿLӋn vӟi các cation, chitosan loҥi bӓ FiFFDWLRQÿy ViӋc giҧi phóng LPS làm mҩt sӵ әQ ÿӏnh cӫa màng ngoài [21]. Mӝt sӕ Fѫ FKӃ giҧLWKtFKQKѭVDX
23
&KLWRVDQOjSRO\PHWtFKÿLӋQGѭѫQJWURQJNKLPjQJWӃ bào vi sinh vұWÿDVӕ WtFKÿLӋQkP'Rÿy[ҧ\UDWѭѫQJWiFWtQKÿLӋn làm cho màng tӃ bào vi sinh vұt bӏ WKD\ ÿәL QJăQ FҧQ TXi WUuQK WUDR ÿәi chҩW TXD PjQJ ÿӗng thӡi xuҩt hiӋn các lӛ hәng trên thành tӃ bào tҥRÿLӅu kiӋn cho protein và các thành phҫn khác cҩu tҥo nên thành tӃ bào bӏ thoát ra ngoài tӯ ÿyGүQÿӃn tiêu diӋt vi sinh vұt. Nhӡ tác dөng cӫa nhóm NH3
+
trong chitosan lên các vӏ WUtPDQJÿLӋn âm ӣ trên màng tӃ bào vi sinh vұt, dүn tӟi sӵ WKD\ ÿәi tính thҩm cӫa màng tӃ EjR 4Xi WUuQK WUDR ÿәi chҩt qua màng tӃ bào bӏ ҧQK Kѭӣng. Lúc này, vi sinh vұt không thӇ nhұn các chҩt dinh GѭӥQJFѫEҧQQKѭJOXFRVHFKRVӵ phát triӇQEuQKWKѭӡng cӫa nó, dүQÿӃn mҩt cân bҵng giӳa bên trong và bên ngoài màng tӃ bào, cuӕi cùng dүQ ÿӃn sӵ chӃt cӫa tӃ bào. Theo giҧi thích cӫa mӝt sӕ tác giҧ thì chính sӵ WiF ÿӝng giӳa polycation chitosan sӁ liên kӃt vӟi polyme mang tính axit (polyanion) trên bӅ mһt tӃ bào vi sinh vұt tҥRQrQSRO\HOHFWUROLFÿmJk\NKyNKăQWURQJTXiWUuQKWUDRÿәi chҩt [30]. Chitosan có khҧ QăQJSKiKXӹ màng tӃ EjRWK{QJTXDWѭѫQJWiFFӫa nhóm NH3
+
vӟi nhӳng nhóm phosphoryl cӫa thành phҫn phospholipid cӫa màng tӃ bào vi khuҭn. 4XDQViWGѭӟi kính hiӇn vi sӵ phá hӫy tӃ bào S. aureus, sӵ phân chia cӫa tӃ bào bӏ rӕi loҥn, sӵ tҥo thành tӃ bào không theo quy luұt: TӃ bào tҥo thành không có màng hoһc màng tӃ bào tҥo thành rҩt mӓng gây nên sӵ rò rӍ các hӧp chҩt nӝi bào [6].
Chitosan có thӇ cҧn trӣ và làm mҩt cân bҵng sӵ phát triӇn cӫa vi sinh vұt do có khҧ QăQJOҩ\ÿLFiFLRQNLPOӑDLÿyQJYDLWUzTXDQWUӑng trong thành phҫn enzyme QKѭ&X2+
, Co2+, Cd2+«Fӫa tӃ bào vi sinh vұt do sӵ tҥo phӭc vӟi nhóm NH3+
có trong phân tӱ FKLWRVDQÿӗng thӡi các nhóm này có thӇ tác dөng vӟi các nhóm anion cӫa bӅ mһt thành tӃ EjR1KѭYұy vi sinh vұt sӁ bӏ ӭc chӃ phát triӇn do sӵ mҩt cân bҵQJOLrQTXDQÿӃn các ion quan trӑng [7].
Các phân tӱ chitosan khi phân tán xung quanh tӃ bào vi sinh vұt sӁ tҥo ra các WѭѫQJWiFOjPWKD\ÿәi ADN ҧQKKѭӣQJÿӃn quá trình tәng hӧp mARN, tәng hӧp SURWHLQQJăQFҧn sӵ hình thành bào tӱQJăQFҧn sӵ trao ÿәi chҩt và hҩp thu các chҩt GLQKGѭӥng cӫa vi sinh vұt [22].
24
Trong mӝt nghiên cӭu khá rӝng vӅ tính kháng khuҭn cӫa chitosan tӯ tôm chӕng lҥi vi khuҭn E.coliQJѭӡLWDÿmWuPUDUҵng nhiӋWÿӝ cao và pH acid cӫa thӭc ăQOjPWăQJҧQKKѭӣng cӫDFKLWRVDQÿӃn vi khuҭn. Nghiên cӭXFNJQJFKӍ UDFѫFKӃ ӭc chӃ vi khuҭn cӫa chitosan là do liên kӃt giӳa chuӛi polyme cӫa chitosan vӟi các ion kim loҥi trên bӅ mһt vi khuҭQOjPWKD\ÿәi tính thҩm cӫa màng tӃ bào. Khi bә VXQJFKLWRVDQYjRP{LWUѭӡng, tӃ bào vi khuҭn sӁ chuyӇn tӯ WtFKÿLӋn âm sang tích ÿLӋQGѭѫQJ
&NJQJWӯ thí nghiӋPQj\QJѭӡi ta thҩy rҵng có rҩt nhiӅu ion kim loҥi có thӇ ҧQK KѭӣQJ ÿӃQ ÿһc tính kháng khuҭn cӫD FKLWRVDQ QKѭ .+
, Na+, Mg2+ và Ca2+. NӗQJÿӝ lӟn các ion kim loҥi có thӇ khiӃn mҩt tính chҩt này, ngoҥi trӯ ҧQKKѭӣng cӫa Na+ ÿӕi vӟi hoҥWÿӝng kháng Staphylococcus aureus1JѭӡLWDFNJQJWKҩy rҵng chitosan có thӇ làm yӃXÿLFKӭFQăQJEҧo vӋ cӫa thành tӃ bào nhiӅu vi khuҭn. Khi sӱ dөng chitosan, thì mӝW Oѭӧng lӟn các ion K+ vӟi ATP bӏ rò rӍ ӣ vi khuҭn
Staphylococcus aureus và nҩm candida albicans. Cҧ chitosan phân tӱ Oѭӧng 50kDa
YjN'DÿӅu kháng tӕt hai loҥLWUrQQKѭQJFKLWRVDQSKkQWӱ Oѭӧng 50kDa làm mҩt nhiӅu gҩp 2 ± 4 lҫn ion K+ và ATP so vӟLFKLWRVDQN'DĈLӅu này thӇ hiӋQFѫFKӃ kháng khuҭn khác nhau ӣ chitosan khӕL Oѭӧng phân tӱ thҩp và cao. HoҥW ÿӝng kháng khuҭn cӫa chitosan phân tӱ OѭӧQJNKiFQKDXÿmÿѭӧc nghiên cӭu trên 6 loài vi khuҭQ9j Fѫ FKӃ kháng khuҭQ Qj\ ÿmÿѭӧc chӭng minh dӵa trên viӋFÿR WtQK thҩm cӫa màng tӃ bào vi khuҭn và quan sát sӵ nguyên vҽn cӫa tӃ bào. KӃt quҧ chӍ ra rҵng khҧ QăQJQj\JLҧm khi khӕLOѭӧng nguyên tӱ WăQJYjQyWăQJFDRӣ nӗng pH thҩp, giҧm rõ rӋt khi có mһt ion Ca2+, Mg2+. NӗQJÿӝ ӭc chӃ thҩp nhҩt khoҧng 0,03 ± 0,25 WKD\ ÿәi tùy tӯng loài vi khuҭn và khӕL Nѭӧng phân tӱ cӫa chitosan. &KLWRVDQFNJQJOjQJX\rQQKkQOjPWKRiWFiFFKҩt trong tӃ bào và phá hӫy thành tӃ bào [7].
2.3. Tình hình nghiên cӭXWURQJYjQJRjLQѭӟc
25
Trên thӃ giӟi nhӳng nghiên cӭu bҧo quҧn trӭng bҵng nhiӅX SKѭѫQJ SKiS khác QKDX ÿm ÿѭӧc thӵc hiӋn và có nhiӅu công trình nghiên cӭu vӅ OƭQK Yӵc này ÿѭӧc công bӕ FNJQJQKѭÿѭӧFÿѭDYjRFiFTX\ÿӏnh an toàn vӋ sinh thӵc phҭm. Tuy vұy, các nghiên cӭu chӫ yӃu tұp trung vào viӋc bҧo quҧn trӭQJ WѭѫL Eҵng các SKѭѫQJ SKiS KyD Oê QKѭ Eҧo quҧn trong nhiӋW ÿӝ lҥnh, bҵQJ SKѭѫQJ SKiS Vӱ lý nhiӋW QJkP WURQJ Qѭӟc nóng), sӱ dөng màng phӫ (dҫu khoáng, paraffin, nhӵa WKRQJSURWHLQÿұXQjQK]HLQ«WURQJP{LWUѭӡQJNK{QJNKtÿLӅu chӍnh (vӟi hàm Oѭӧng khí CO2 chiӃm tӹ lӋ chӫ yӃu), bҧo quҧn bҵng tiDLRQKyDWURQJNKLÿyQKӳng công trình nghiên cӭX ÿm F{QJEӕ vӅ viӋc sӱ dөng chitosan trong bҧo quҧn trӭng vүn còn hҥn chӃ.
1ăPFiFWiFJLҧ /HH6+1R+.-HRQJ<+ÿmF{QJEӕ kӃt quҧ Eѭӟc ÿҫu nghiên cӭu sӱ dөng dung dӏch chitosan trong bҧo quҧn trӭng [31].
1ăPQKyPFiFWiFJLҧ S. D. Bhale, H. K. No, W. Prinyawiwatkul, K. Nadarajah, A. J. Farr, S. P. Meyers thuӝFKDLWUѭӡQJÿҥi hӑc Louisiana cӫa Mӻ và Ĉҥi hӑc Daegu, Hayang Hàn QuӕF ÿm FQJWLӃn hành nghiên cӭu sӱ dөng màng phӫ chitosan kéo dài thӡi gian sӱ dөng trӭng. KӃt quҧ cho thҩy bҵng viӋc sӱ dөng dung dӏch tҥo màng vӟi các nӗQJÿӝ chitosan 1 và 2% (trong acid axetic) sau 5 tuҫn bҧo quҧn ӣ 25°C trӭng có các chӍ sӕ chҩWOѭӧng biӃQÿәi chұPKѫQVRYӟi mүXÿӕi chӭng [28].
7KiQJQăPWҥi Hӝi thҧo quӕc tӃ phát triӇn sҧn phҭm thӵc phҭm mӟi tә chӭc tҥi T.p Hӗ Chí Minh, ViӋt Nam, tác giҧ Iongwha thuӝF ÿҥi hӑc quӕc gia Hàn QuӕFÿmWKRQJEiRYӅ viӋc nghiên cӭu ӭng dөng mӟi cӫa chitin, chitosan tҥi Hàn QuӕF WURQJ ÿyWKHR WiFJLҧ khi bҧo quҧn trӭng bҵng cách nhúng trong dung dӏch chitosan sau 25 ngày ӣ 20°C các chӍ tiêu chҩW Oѭӧng (mӭF ÿӝ giҧm trӑng Oѭӧng, chӍ sӕ lòng trҳQJ+DXJKFKѭDJLҧm quá mӭc thҩp nhҩt cho phép cӫa trӭng WKѭѫQJSKҭm [23].
7KiQJQăP&HQJL]&DQHUWKXӝFWUѭӡQJÿҥi hӑc Canakkale Onsekiz Mart, Thә 1Kƭ .u F{QJ Eӕ kӃt quҧ nghiên cӭu sӱ dөng ba loҥi màng (chitosan,
26
protein tӯ dӏch sӳa, nhӵa sellac) trong bҧo quҧn trӭQJWѭѫL.Ӄt quҧ cho thҩy trӭng ÿѭӧc bӑc bӟi màng chitosan 3% (có phӕi hӧp vӟi 0,25ml glycerol/g chitosan) có thӇ giӳ ÿѭӧc chҩWOѭӧng trӭQJWѭѫLORҥi A) ít nhҩt 2 tuҫn ӣ nhiӋWÿӝ 25°C [20]
2.3.2. Nghiên cͱXWURQJQ˱ͣc
1ăPQKyPWiFJLҧ /ѭX9ăQ&KtQK&KkX9ăQ0LQK3Kҥm HӳXĈLӇn, TrӏQKĈӭF+ѭQJĈһQJ/DQ+ѭѫQJWKXӝc ViӋn hóa hӑc cac hӧp chҩt hӳXFѫ7UXQJ tâm .+71 &14*ÿmQJKLrQFӭXÿLӅu chӃ chӃ phҭm bҧo quҧn thӵc phҭm BQ ± 1 tӯ hӛn hӧp dung dӏch 1,5% chitosan (trong dung dӏch acid axetic loãng) và 0,5% hӛn hӧp các chҩt tӵ nhiên có tác dөng chӕng oxy hóa và thӕi rӳa thӵc phҭPÿӗng thӡi ÿmWKӱ nghiӋm bҧo quҧn trӭQJJjWѭѫL ӣ nhiӋWÿӝ WKѭӡng. Theo nhóm tác giҧ cho thҩy qua 12 ngày trӭQJ ÿm TXD Vӱ lý BQ ± 1 vүn giӳ nguyên phҭm chҩt cӫa trӭQJJjOzQJÿӓ WѭѫLÿӅu, còn nguyên vҽQPLWѭѫLWURQJNKLWUӭQJÿӕi chӭQJÿm vӳa hoàn toàn [1].
Trӭng muӕi xӱ lý (nhúng) chitosan ӣ 3 nӗQJ ÿӝ: C1 (1g chitosan, 1g acid D[HWLFJQѭӟc), C2 JFKLWRVDQJDFLGD[HWLFJQѭӟc), C3 (3g chitosan, 3g DFLG D[HWLF J Qѭӟc), C4 J FKLWRVDQ J DFLG D[HWLF J Qѭӟc), sҩy khô ӣ 50°C trong 30p, bҧo quҧn ӣ nhiӋWÿӝ phòng. KӃt quҧ ӣ nӗQJÿӝ C1, bҧo quҧQÿѭӧc 90 ngày mà trӭng vүn giӳ ÿѭӧc giá trӏ GLQKGѭӥQJFNJQJQKѭFҧm quan [9].
TrӭQJWѭѫLOjPVҥch, lau dung dӏch muӕi 1%, nhúng chitosan nӗQJÿӝ: 1%, 1,5%, 2% bҧo quҧn ӣ nhiӋWÿӝ phòng. KӃt quҧ sӱ dөng chitosan 1%, thӡi gian bҧo quҧn dài nhҩt so vӟi các mүu còn lҥi (hao hөt khӕLOѭӧQJS+WKD\ÿәLNK{QJÿiQJNӇ, khҧ QăQJNKiQJNKXҭQWăQJWKHRQӗQJÿӝ chitosan)[10].
7UrQ ÿӕL Wѭӧng trӭQJ Jj WѭѫL 3*6 7Uҫn Thӏ LuyӃQ 7UѭӡQJ Ĉҥi hӑc Nha Trang) và ThS. /r7KDQK/RQJ7UѭӡQJĈҥi hӑc Nông Lâm HuӃÿm[ӱ lý trӭng ӣ nӗQJ ÿӝ chitosan tӯ 0,5%, 1%, 1,5%, 2%, 2,5%, 3% có bә sung thêm 0,05% Sodium Benzoat hoһc 1% Sorbitol. KӃt quҧ nghiên cӭu: ӣ nhiӋWÿӝ WKѭӡng, trӭng JjWѭѫLEӑc màng chitosan nӗQJÿӝ 1,5% có bә sung 0,05% Sodium Benzoat hoһc
27
1% Sorbitol có khҧ QăQJGX\FKuKҥng chҩWOѭӧng trӭng ӣ mӭF$ÿӃn 15 ± 20 ngày VDXNKLÿҿ [8]
Ngoài ra, Bӝ môn Công nghӋ thӵc phҭm ± Khoa Nông nghiӋp thuӝFWUѭӡQJĈҥi hӑc CҫQ 7Kѫ FNJQJ ÿm QKӳng nghiên cӭu bҧo quҧn trӭng vӏt muӕi bҵng zein và chitosan [16].
28 &KѭѫQJ3 ĈӔ,7ѬӦNG, NӜ,'81*9¬3+ѬѪ1*3+È31*+,Ç1&ӬU ĈӕLWѭӧng nghiên cӭu Chitosan dҥng bӝt. TrӭQJJj+\OLQH%URZQWѭѫLWKXKRҥFKWUѭӟFKVDXNKLÿҿ.
ĈӏDÿLӇm và thӡi gian nghiên cӭu
Ĉ͓DÿL͋m
Công ty TNHH ĈTK Phú Thӑ
Phòng thí nghiӋm khoa hӑFÿӝng vұt khoa Nông ± Lâm ± 1Jѭ, 7UѭӡQJĈҥi hӑF+QJ9ѭѫQJ
Thͥi gian thc hi͏n: tӯ ngày 11/2017 - 3/2018
3.3. Nӝi dung nghiên cӭu
XiF ÿӏnh sӵ biӃQ ÿәi các chӍ tiêu vұ\ Oê Fѫ Eҧn cӫa trӭng gà Hyline brown bҧo quҧn ӣ nhiӋWÿӝ WKѭӡng.
;iFÿӏnh sӵ hao hөt vӅ khӕLOѭӧng trӭng.
;iFÿӏnh tәng sӕ vi khuҭn hiӃu khí.
XiFÿӏnh chӍ tiêu chҩWOѭӧng lòng trҳng trӭng.
XiFÿӏnh chӍ tiêu chҩWOѭӧQJOzQJÿӓ trӭng.
3KѭѫQJSKiSQJKLrQFӭu
3K˱˯QJSKiSO̭y m̳u
Lô trӭng lҩy tӯ trҥLJjÿҧm bҧRWtQKÿӗng nhҩt, cùng mӝt loҥi gà, cùng thӡLÿLӇm lҩy mүu.
Cách lҩy: TrӭQJJjVDXNKLÿҿ ÿѭӧc thu vào vӍ ÿӵng, loҥi bӓ nhӳng quҧ trӭng rҥn nӭt. Chӑn nhӳng quҧ có cùng kích cӥ, khӕL Oѭӧng, màu sҳF ÿӗQJ ÿӅu. Yêu cҫu trӭng không quá 24 giӡ VDXNKL Jj ÿҿNKL VRL OrQ ÿqQWKҩy có buӗng khí nhӓ, vӓ trӭQJQkXKѫLQKiPYүn còn lӟSÿiY{LPӓng bám bên ngoài.
29
3K˱˯QJSKiSW̩o màng chitosan
Chuҭn bӏ dung dӏch tҥo màng: Hòa tan chitosan ӣ các nӗQJ ÿӝ 0,5%, 1%, 1,5%, 2% trong dung dӏch acid axetic 1,5%, khuҩ\ ÿӅX ÿӃn khi dung dӏFK ÿӗng nhҩt.
TiӃn hành tҥo màng: TrӭQJ Jj WѭѫL Vҥch sau khi lӵa chӑn và làm sҥFKÿHP nhúng ngұp vào dung dӏFK FKLWRVDQ ÿm FKXҭn bӏ QKѭ WUrQ Uӗi vӟt ra, làm khô tӵ nhiên. Sau khi vӓ trӭQJÿmNK{WLӃp tөc nhúng trӭng lҫQKDLWѭѫQJWӵ lҫn mӝt.
Bҧo quҧn: Sau khi trӭQJÿmNK{KRjQWRjQEҧo quҧn ӣ nhiӋWÿӝ SKzQJVDXÿy tiӃn hành phân tích các chӍ tiêu.
3.4.3. 3K˱˯QJSKiSE͙ trí thí nghi͏m
B͙ trí thí nghi͏m: Thí nghiӋP ÿѭӧc bӕ trí theo kiӇu mӝt nhân tӕ hoàn toàn
ngүu nhiên, mӛi mүu thí nghiӋm tiӃn hành kiӇm tra 3 quҧ Yjÿѭӧc bҧo quҧn ӣ nhiӋt ÿӝ WKѭӡng. Thí nghiӋPÿѭӧc lһp lҥi 2 lҫQÿӇ ÿҧm bҧo tính chính xác cӫDÿӅ tài.
Ĉ&± ÿӕi chӭng không qua xӱ lý bӅ mһt trӭng.
Ĉ&± ÿӕi chӭng qua xӱ lý bӅ mһt trӭng bҵng cách nhúng trӭng trong dung dӏch acid axetic 1,5%.
CT ± 1: TrӭQJÿѭӧc xӱ lý bӅ mһt bҵng dung dӏch chitosan 0,5%.
CT ± 2: TrӭQJÿѭӧc xӱ lý bӅ mһt bҵng dung dӏch chitosan 1%.
CT ± 3: TrӭQJÿѭӧc xӱ lý bӅ mһt bҵng dung dӏch chitosan 1,5%.
CT ± 4: TrӭQJÿѭӧc xӱ lý bӅ mһt bҵng dung dӏch chitosan 2%.
3.4.43K˱˯QJSKiS[iFÿ͓nh các ch͑ tiêu theo dõi
;iFÿ͓nh s bi͇Qÿ͝i các ch͑ WLrXF˯E̫n cͯa trͱng gà Hyline brown
ĈӇ [iF ÿӏQK ÿѭӧc sӵ biӃQ ÿәi các chӍ tiêu vұW Oê Fѫ Eҧn cӫa trӭng gà Hyline Brown chúng tôi tiӃn hành kiӇm tra trӭng qua các ngày bҧo quҧn khác nhau bҵng máy Det6000. Tӯ viӋF[iFÿӏnh ÿѭӧc thӡi gian trӭng có sӵ biӃQÿәi vӅ các chӍ tiêu vұt lý tôi lҩ\ÿyOjPFѫVӣ ÿӇ tiӃn hành nghiên cӭu các chӍ tiêu tiӃp theo
30
;iFÿ͓nh t͝ng s͙ vi ku̱n hi͇u khí
Xӱ lý và pha loãng mүu: Hút 1ml lòng trҳQJFKRWKrPPOQѭӟc cҩt trӝn ÿӅXWDÿѭӧc dung dӏch pha loãng ӣ nӗQJÿӝ 10-1
và sӱ dөng dung dӏFKQj\ÿӇ pha loãng liên tөc tӯ nӗQJÿӝ 10-1 ÿӃn nӗQJÿӝ 10-3 bҵng cách chuyӇn liên tөc 1ml cӫa dung dӏFKSKDORmQJWUѭӟc vào ӕng nghiӋm chӭDPOQѭӟc cҩt.
Nuôi cҩy mүu: Dùng pipet hút 0,1µm ӣ các nӗQJ ÿӝ ÿm SKD ORmQJ Fҩy FKDQ ÿӅu trên m{L WUѭӡng thҥFK WKѭӡng và ÿѭӧc nuôi cҩ\ WUrQ P{L WUѭӡng thҥch WKѭӡng. Ӫ ҩm 370
C trong vòng 18 ± 24h.
Ĉӑc kӃt quҧ: Sau khi nuôi cҩy ӣ 370
C K ÿHP UD ÿӃm sӕ khuҭn lҥc (KL) mӑc trên mһt thҥch. Khuҭn lҥc (colony- colonies) là mӝt tұSÿRjQ9.QKѭQJ phát triӇn tӯ mӝt tӃ EjR9.EDQÿҫu tӭc là tҥi thӡLÿLӇm bҳWÿҫu nuôi cҩy).
Tính kӃt quҧ: Ĉӝ pha loãng càng cao sӕ Oѭӧng khuҭn lҥc càng ít. Tәng sӕ vi khuҭn hiӃXNKtWURQJPOÿѭӧc tính theo công thӭc:
N = &
(n1 + 0,1*n2)*d1
7URQJÿy + N: là tәng sӕ vi khuҭn trong mүu 1g mүu thӱ + C: sӕ khuҭn lҥFÿӃPÿѭӧFWUrQFiFÿƭDÿmFKӑn.
n1 và n2 là sӕ ÿƭDӣ 2 nӗQJÿӝ pha loãng liên tiӃSÿmFKӑn