Chương 1 TỔNG QUAN NGHIÊN CỨU
2.4. PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
2.4.1. Phương pháp nghiên cứu một số đặc điểm dịch tễ bệnh LMLM ở trâu, bò, lợn tại tỉnh Quảng Ninh bò, lợn tại tỉnh Quảng Ninh
Đặc điểm dịch tễ của bệnh LMLM ở trâu, bò, lợn nái tại tỉnh Quảng Ninh được đánh giá trên cơ sở phương pháp điều tra dịch tễ học hồi cứu, dựa vào số liệu của Cục Thống kê, phịng Chăn ni, Chi cục Thú y tỉnh Quảng Ninh, bao gồm:
- Báo cáo tình hình chăn ni trên địa bàn tỉnh Quảng Ninh.
- Báo cáo quý, báo cáo năm về tình hình dịch LMLM tại tỉnh Quảng Ninh. - Số liệu về dịch tễ bệnh LMLM, kết quả tiêm phòng hằng năm, kết quả xét nghiệm bệnh phẩm (định type), kết quả nghiên cứu, bảo hộ sau tiêm phịng.
* Tiêu chí đánh giá đặc điểm dịch tễ bệnh LMLM ở trâu, bò, lợn theo mùa được đánh giá qua 4 mùa: Xuân (từ tháng 2 đến tháng 4), Hè (từ tháng 5 đến tháng 7), Thu (từ tháng 8 đến tháng 10), Đông (từ tháng 11 đến tháng 1 năm tiếp theo).
2.4.2. Phương pháp nghiên cứu sự lưu hành của virus LMLM trên đàn trâu, bò, lợn tại tỉnh Quảng Ninh bò, lợn tại tỉnh Quảng Ninh
2.4.2.1. Phương pháp lấy mẫu
* Phương pháp lấy mẫu huyết thanh:
- Cố định gia súc (bằng giá hoặc chạc cây tùy từng điều kiện thích hợp), sau đó garo tĩnh mạch cổ sao cho tĩnh mạch cổ nổi rõ.
- Dùng bơm tiêm loại 10 ml hút 3 ml máu tự tĩnh mạch cổ, sau đó rút pittong ra đến 5 ml, bẻ gập đầu kim và đậy lắp kim lại, để nghiêng cho máu đơng tự nhiên ở nhiệt độ phịng khoảng 2 giờ, sau đó chắt huyết thanh vào lọ thủy tinh hay lọ nhựa 2 ml vô trùng và gửi đến phịng thí nghiệm trong điều kiện lạnh (kèm các túi đá) càng sớm càng tốt.
- Bảo quản huyết thanh: Nếu huyết thanh được xét nghiệm ngay trong 7 ngày đầu tính từ lúc lấy mẫu thì bảo quản ở nhiệt độ 4oC, cịn nếu lâu hơn 7 ngày thì bảo quản ở nhiệt độ -30oC.
* Phương pháp lấy mẫu biểu mô:
- Kiểm tra lâm sàng và chọn gia súc mới phát bệnh, bệnh phẩm được lấy từ các tổn thương mới (không lấy mẫu từ các tổn thương ở giai đoạn lành sẹo hoặc đã được sát trùng và điều trị).
- Thu thập mẫu biểu mô ở những gia súc có triệu chứng của bệnh LMLM theo hướng dẫn của Cục Thú y và tuân thủ các quy tắc an toàn sinh học theo hướng dẫn của OIE để tiến hành xét nghiệm và định type virrus.
- Loại mẫu là biểu mơ lưỡi, lợi, kẽ móng chân, viền móng chân bị bong tróc do mụn nước mới vỡ ra, dịch trong mụn nước và da bao quanh mụn nước lúc chưa vỡ.
- Mẫu bệnh phẩm được bảo quản 4 - 8oC trong hỗn hợp PBS 0,04 M và Glycerin (tỷ lệ 1:1), pH = 7,2 - 7,6 trong suốt quá trình vận chuyển về phịng thí nghiệm.
- Bảo quản mẫu bệnh phẩm ở 4oC nếu xét nghiệm trong 1-3 ngày hoặc -80oC nếu chưa xét nghiệm ngay.
2.4.2.2. Phương pháp định type virus
Định type virus LMLM theo phương pháp RT-PCR được mô tả trong Tiêu chuẩn quốc gia TCVN 8400-1:2010. Các bước cơ bản như sau:
Bước 1: Chiết tách ARN
Bước 2: Tiến hành phản ứng RT-PCR theo cơng thức Bước 3: Chu trình nhân gen
Bước 4: Chạy điện di Bước 5: Đọc kết quả Bước 6: Đánh giá kết quả
2.4.2.3. Phương pháp Liquid Phase Blocking ELISA (LPB-ELISA)
Phương pháp LPB-ELISA được tiến hành theo Tiêu chuẩn quốc gia TCVN 8400-1:2010.
* Mục đích thí nghiệm
- Xác định sự có mặt của kháng thể kháng virus LMLM type O trong huyết thanh trâu, bò sau khi tiêm phòng vaccine LMLM đơn giá type O.
- Theo yêu cầu của Cục Thú y, chúng tôi chỉ tiến hành kiểm tra sự có mặt của kháng thể kháng virus LMLM trong huyết thanh trâu, bị được pha lỗng ở nồng độ 1/64.
* Nguyên liệu và các bước tiến hành phản ứng (xem trong phần Phụ lục) 2.4.3. Phương pháp đánh giá tác dụng của vaccine phòng bệnh LMLM cho trâu, bò, lợn nái tại tỉnh Quảng Ninh
Để xác định tác dụng của vaccine phịng bệnh LMLM chúng tơi đã đánh giá sự có mặt của kháng thể kháng virus LMLM type O bằng phương pháp ELISA FMD-3ABC.
2.4.4. Phương pháp xử lý số liệu
Số liệu được xử lý bằng phần mềm Excel 2010.
Tỷ lệ bảo hộ cá thể/tổng đàn được tính theo cơng thức:
Tỷ lệ bảo hộ (%) = Số mẫu đạt HGKT bảo hộ x 100 Tổng số mẫu kiểm tra
Chương 3
KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN
3.1. NGHIÊN CỨU MỘT SỐ ĐẶC ĐIỂM DỊCH TỄ CỦA BỆNH LMLM Ở TRÂU, BÒ, LỢN TẠI TỈNH QUẢNG NINH TỪ THÁNG 1/2018 ĐẾN THÁNG 6/2020
3.1.1. Diễn biến của tình hình dịch LMLM ở trâu, bò, lợn của tỉnh Quảng Ninh từ tháng 1/2018 đến tháng 6/2020
Tiến hành tổng hợp tình hình dịch lở mồm long móng tại Quảng Ninh từ tháng 1/2018 đến tháng 6/2020; thấy dịch LMLM xảy ra trên đàn gia súc (trâu, bò và lợn) vào cả 3 năm nghiên cứu. Diễn biến cụ thể ở các năm có dịch tại các địa phương thuộc tỉnh Quảng Ninh được thể hiện qua bảng 3.1.
Bảng 3.1. Tình hình dịch LMLM ở trâu, bị, lợn của tỉnh Quảng Ninh từ tháng 1/2018 đến tháng 6/2020 TT Địa phương (huyện, thành phố, thị xã) Số xã có dịch LMLM Tính chung theo địa phương 2018 2019 6/2020 Trâu, bò Lợn Trâu, bò Lợn Trâu, bò Lợn Trâu, bò Lợn 1 H. Ba Chẽ 1 2 3 2 H. Bình Liêu 4 1 2 6 1 3 H. Cô Tô 4 H. Đầm Hà 5 TX. Đông Triều 2 2 6 H. Hải Hà 7 H. Hoành Bồ 1 1 8 H. Tiên Yên 9 H. Vân Đồn 10 TX. Quảng Yên 11 TP. Cẩm Phả 12 TP. ng Bí 2 2 13 TP. Hạ Long 14 TP. Móng Cái Tổng số xã có dịch 0 2 5 4 4 0 9 6
Kết quả bảng 3.1 cho thấy: dịch LMLM ở trâu, bò, lợn xảy ra từ tháng 1/2018 đến tháng 6/2020 tại 5/14 địa phương của tỉnh Quảng Ninh, bao gồm: huyện Ba Chẽ, huyện Bình Liêu, thị xã Đơng Triều, huyện Hồnh Bồ và thành phố ng Bí.
* Tình hình dịch LMLM xảy ra trên các đối tượng gia súc như sau:
- Ở trâu, bò: dịch LMLM xảy ra ở trâu, bò tại tỉnh Quảng Ninh tập trung vào năm 2019 và nửa đầu năm 2020 tại 3 xã của huyện: Ba Chẽ và 6 xã của huyện Bình Liêu; các địa phương khác không ghi nhận trường hợp trâu, bò nào mắc bệnh LMLM trong cả 3 năm điều tra.
- Ở lợn: tại tỉnh Quảng Ninh, bệnh LMLM ở lợn xảy ra vào năm 2018 và 2019; trong nửa đầu năm 2020 khơng thấy có lợn mắc bệnh tại tất cả các huyện, thành của tỉnh. Năm 2018, bệnh LMLM ở lợn chỉ xảy ra tại 2 xã của thị xã Đông Triều; đến năm 2019, dịch LMLM lợn xảy ra tại 5 xã, phường thuộc 4 huyện thành của tỉnh Quảng Ninh là: huyện Bình Liêu (1 xã), thị xã Đông Triều (1 xã), huyện Hồnh Bồ (1 xã) và thành phố ng Bí (2 xã, phường).
* Tình hình mắc LMLM tại tỉnh Quảng Ninh theo năm như sau:
- Năm 2018: Dịch LMLM chỉ xảy ra trên đàn lợn tại thị xã Đông Triều, khơng ghi nhận trường hợp trâu, bị nào mắc bệnh LMLM trên phạm vi toàn tỉnh. Dịch LMLM xảy ra trên lợn nuôi tại 2 xã thuộc Đông Triều.
- Năm 2019: Dịch LMLM xảy ra với quy mô rộng hơn năm 2018, bệnh xuất hiện trên cả trâu, bò và lợn tại các địa phương. Dịch LMLM ở trâu, bò xảy ra tại 4/14 địa phương của tỉnh, bao gồm: huyện Ba Chẽ, huyện Bình Liêu, huyện Hồnh Bồ và thành phố ng Bí. Có 4 xã thuộc 2 huyện Ba Chẽ và Bình Liêu ghi nhận trâu, bị mắc bệnh LMLM; có 4 xã thuộc 3 huyện, thành thấy lợn mắc bệnh LMLM.
- Nửa đầu năm 2020: Dịch LMLM chỉ xảy ra tại 2/14 địa phương của tỉnh là huyện Ba Chẽ và huyện Bình Liêu; dịch cũng chỉ xảy ra trên đàn trâu, bị của 2 địa phương này, khơng ghi nhận trường hợp lợn nào mắc LMLM. Đợt dịch LMLM này xảy ra tại 4 xã thuộc 2 huyện nói trên.
* Tính theo địa phương (huyện, thành, thị): Trong 3 năm điều tra, có địa phương xảy ra dịch 2 năm liên tiếp, có địa phương chỉ xuất hiện dịch trong 1 năm
- Tại huyện Bình Liêu: dịch LMLM xảy ra nhiều nhất, quy mô rộng nhất và trên cả 3 đối tượng (trâu, bị, lợn), ghi nhận 6 xã có trâu, bị mắc LMLM và 1 xã có lợn mắc LMLM trong năm 2019 và nửa đầu năm 2020.
- Tại huyện Ba Chẽ: dịch LMLM chỉ xảy ra ở trâu, bò trong năm 2019 và nửa đầu năm 2020; ghi nhận 3 xã có trâu, bị mắc bệnh. Khơng có trâu, bị nào tại huyện Ba Chẽ mắc LMLM trong suốt thời gian điều tra.
- Tại thị xã Đông Triều: dịch LMLM chỉ xảy ra trên đàn lợn của 2 xã vào năm 2018. Khơng có trâu, bị nào tại địa phương mắc LMLM trong suốt thời gian điều tra.
- Tại huyện Hoành Bồ: dịch LMLM chỉ xảy ra trên lợn của 1 xã vào năm 2019. Khơng có trâu, bị nào tại huyện Hồnh Bồ mắc LMLM trong suốt thời gian điều tra.
- Tại thành phố ng Bí: dịch LMLM chỉ xảy ra trên đàn lợn của 2 xã vào năm 2019. Khơng có trâu, bị nào tại địa phương mắc LMLM trong suốt thời gian điều tra.
Như vậy, diễn biến dịch LMLM tại tỉnh Quảng Ninh kéo dài liên tục trong 3 năm nghiên cứu. Đồng thời, có thể thấy dịch LMLM tại tỉnh Quảng Ninh trong năm 2019 diễn ra khá phức tạp trên cả trâu, bị, lợn với quy mơ lớn và trên diện rộng. Từ tháng 1 đến tháng 3/2020, bệnh phát sinh khá phức tạp trên đàn trâu bò tại 32 hộ dân thuộc 4 xã của huyện Bình Liêu và huyện Ba Chẽ ghi nhận 165 trâu, bò mắc bệnh LMLM. Tuy nhiên, do thực hiện tốt các phương pháp phòng chống dịch nên khi có dịch xảy ra thì các chủ hộ chăn nuôi đã phối hợp với cơ quan chức năng khoanh vùng và dập dịch kịp thời nên đến 22/6 các địa phương đã công bố hết dịch.
3.1.2. Tỷ lệ trâu, bò, lợn mắc bệnh và chết do LMLM tại tỉnh Quảng Ninh từ tháng 1/2018 đến tháng 6/2020
3.1.2.1. Tỷ lệ trâu, bò mắc bệnh và chết do LMLM từ tháng 1/2018 đến tháng 6/2020 tại tỉnh Quảng Ninh
Trâu, bị là lồi vật ni có giá trị kinh tế, vì vậy khi dịch LMLM xảy ra ở trâu, bò đã gây ảnh hưởng không nhỏ đến kinh tế các hộ nông dân. Để thấy rõ hơn
bức tranh về tình hình dịch LMLM ở trâu, bò tại tỉnh Quảng Ninh từ tháng 1/2018 đến tháng 6/2020, chúng tôi đã tiến hành tổng hợp tỷ lệ trâu, bò mắc bệnh và chết do LMLM trong thời gian này. Kết quả được thể hiện ở bảng 3.2.
Bảng 3.2. Tỷ lệ trâu, bò mắc bệnh và chết do LMLM tại Quảng Ninh từ 1/2018 đến tháng 6/2020 Thời gian Tổng đàn trâu, bò của tỉnh (con)
Số trâu, bò mắc bệnh Số trâu, bò chết và tiêu hủy n (con) Tỷ lệ (%) n (con) Tỷ lệ (%)
2018 72.481 0 0,00 0 0,00
2019 69.700 146 0,21 2 1,37
1-6/2020 66.395 159 0,24 2 1,26
Kết quả bảng 3.2 cho thấy: tỷ lệ trâu, bò mắc bệnh; chết và tiêu hủy do LMLM tại tỉnh Quảng Ninh từ tháng 1/2018 đến tháng 6/2020 tương đối thấp. Trong đó, tỷ lệ trâu, bị mắc bệnh LMLM biến động từ 0,00 - 0,24%; tỷ lệ trâu, bò chết và tiêu hủy do LMLM biến động từ 0,00 - 1,37% qua các năm điều tra. Cụ thể:
- Năm 2018: tổng đàn trâu, bò của tỉnh Quảng Ninh là 72.481 con, không thấy có trâu, bị nào trên địa bàn tồn tỉnh mắc bệnh, chết và tiêu hủy do LMLM, chiếm tỷ lệ 0,00%.
- Năm 2019: Có 146 con trâu, bị mắc bệnh LMLM trong tổng đàn 69.700 con của tỉnh, chiếm tỷ lệ 0,19%. Trong số trâu, bị mắc bệnh chỉ có 2 con chết, chiếm tỷ lệ 1,37%.
- Nửa đầu năm 2020: Trong tổng đàn 66.395 con trâu, bị của tồn tỉnh có 159 trâu, bò mắc bệnh LMLM, chiếm tỷ lệ 0,24%. Trong số trâu, bị mắc bệnh có 2 con chết và tiêu hủy, chiếm tỷ lệ 1,26%.
Hình 3.1. Biểu đồ về tỷ lệ trâu, bò mắc bệnh, chết và tiêu hủy do LMLM tại Quảng Ninh từ tháng 1/2018 đến tháng 6/2020
Nhìn vào biểu đồ hình 3.1 thấy, các cột màu cam biểu thị tỷ lệ trâu, bò mắc bệnh LMLM tại tỉnh Quảng Ninh qua các năm nghiên cứu, các cột màu xanh biểu thị tỷ lệ trâu, bị chết hoặc tiêu hủy do bệnh LMLM. Năm 2018, khơng có trâu, bị nào mắc bệnh, chết và tiêu hủy do LMLM. Trong 2 năm còn lại, số trâu, bò bệnh và chết do LMLM chiếm tỷ lệ thấp.
Lại Văn Lý (2015) cho biết: tỷ lệ trâu, bò mắc bệnh LMLM tại tỉnh Quảng Ninh năm 2010 là 1,69%. Trong số trâu, bò mắc bệnh có 137 con chết, chiếm 9,12%. Năm 2011, tỷ lệ trâu, bò mắc bệnh LMLM là 3,93%; tỷ lệ trâu, bò chết và tiêu hủy là 8,03%. Năm 2012, chỉ có 0,10% số trâu, bị của tỉnh mắc bệnh và có 6,58% số trâu, bị chết do LMLM. Từ 2013 – 2015 không thấy bệnh LMLM xảy ra trên đàn trâu, bò của tỉnh Quảng Ninh. Kết quả nghiên cứu về tỷ lệ trâu, bò mắc bệnh LMLM năm 2018 - 2020 của chúng tôi thấp hơn so với tác giả trên.
3.1.2.2. Tỷ lệ lợn mắc bệnh và chết do LMLM tại tỉnh Quảng Ninh từ tháng 1/2018 đến tháng 6/2020
Trong các năm điều tra bệnh LMLM tại tỉnh Quảng Ninh thấy bệnh khơng chỉ xảy ra trên đàn trâu, bị mà còn xảy ra trên đàn lợn của tỉnh vào năm 2018 và 2019, nửa đầu năm 2020 không thấy bệnh xảy ra trên đàn lợn. Tuy nhiên, do phát hiện, khoanh vùng và phòng chống dịch kịp thời nên dịch LMLM chỉ xảy ra ở quy mô nhỏ, không gây thiệt hại lớn đến ngành chăn ni lợn của tỉnh. Kết quả tổng hợp được trình bày ở bảng 3.3.
Bảng 3.3. Tỷ lệ lợn mắc bệnh và chết do LMLM tại tỉnh Quảng Ninh từ tháng 1/2018 đến tháng 6/2020 Thời gian Tổng đàn lợn của tỉnh (con) Số lợn mắc bệnh Số lợn chết và tiêu hủy n (con) Tỷ lệ (%) n (con) Tỷ lệ (%) 2018 430.982 105 0,02 45 42,86 2019 228.841 229 0,10 207 90,39 1-6/2020 265.200 0 0,00 0 0,00
Kết quả bảng 3.3 cho thấy, dịch LMLM chỉ xảy ra trên đàn lợn vào năm 2018 và năm 2019; đến nửa đầu năm 2020, khơng thấy có địa phương nào thuộc tỉnh Quảng Ninh ghi nhận lợn mắc bệnh LMLM. Cụ thể:
- Năm 2018: Trong tổng số 430.982 con lợn của tồn tỉnh có 105 lợn mắc bệnh LMLM (bệnh ghi nhận trên đàn lợn nuôi tại xã Nguyễn Huệ và xã An Sinh thuộc thị xã Đông Triều), chiếm tỷ lệ 0,24%. Trong số lợn mắc bệnh có 45 lợn chết và tiêu hủy (18 con chết và 27 con tiêu hủy), chiếm tỷ lệ 42,86%.
- Năm 2019: Có 229 lợn mắc bệnh LMLM trong tổng số 228.841 con của tỉnh Quảng Ninh, chiếm tỷ lệ 0,10%. Trong số lợn mắc bệnh chỉ có 207 con chết và tiêu hủy, chiếm tỷ lệ 90,39%.
- Nửa đầu năm 2020: tổng đàn lợn của tỉnh Quảng Ninh là 265.200 con. Tuy nhiên, không có lợn nào trên địa bàn toàn tỉnh mắc bệnh, chết và tiêu hủy do LMLM, chiếm tỷ lệ 0,00%.
Tỷ lệ lợn mắc bệnh và chết do LMLM tại tỉnh Quảng Ninh từ tháng 1/2018 đến tháng 6/2020 được thể hiện rõ hơn trong biểu đồ hình 3.2.
Hình 3.2. Biểu đồ về tỷ lệ lợn mắc bệnh, chết và tiêu hủy do LMLM tại tỉnh Quảng Ninh từ tháng 1/2018 đến tháng 6/2020
Nhìn biểu đồ hình 3.2 thấy: các cột màu đỏ biểu thị lợn mắc bệnh LMLM với tỷ lệ rất thấp vào năm 2018 và 2019 (tỷ lệ tương ứng là 0,02% và 0,10%). Nửa đầu năm 2020, không thấy dịch LMLM xảy ra trên lợn tại tỉnh Quảng Ninh. Các cột màu xanh biểu thị tỷ lệ lợn chết và tiêu hủy do bệnh LMLM. Trong năm 2019, tỷ lệ lợn chết và tiêu hủy do LMLM là khá cao (90,39%); năm 2018, tỷ này thấp hơn và