1. đặt vấn ựề
3.3.2. Phương pháp phân tắch
- Chì và cadimi ựược phân tắch bằng phương pháp cực phổ xung vi phân theo phương pháp AOAC 986.15 1998
3.3.3. Hoá chất và dụng cụ
3.3.3.2. Hóa chất
- Chuẩn chì, cadimi tinh khiết 99,9%, Axit Nitric ( HNO3), Hydroperoxyt (H2O2), muối KCl, khắ Argon ựều thuộc loại tinh khiết phân tắch...
3.3.4. Các bước tiến hành
a. Xử lý mẫu: Mẫu ựược ựồng nhất ngay sau khi lấy về (tránh ô nhiễm KLN ở các dụng cụ & thuốc thử), cân chắnh xác vào túi PE hoặc lọ PE một lượng mẫu nhất ựịnh. Bảo quản trong tủ ựông ựá T= -20oC
b.Vô cơ hóa mẫu
đây là bước vô cùng quan trọng vì nó ảnh hưởng trực tiếp ựến ựộ chắnh xác của mẫu ựo. Bởi có thể gây hiện tượng mất mẫu và nhiễm mẫu.
Sử dụng bếp chuyên dụng 6 ống của hang VELP. Ban ựấu ựốt ở 105oC, khi nhiệt ựộ ựạt ựến 105oC thì có khói nâu bay ra. Khi hết khói nâu và dung dịch ổn ựịnh ta tăng nhiệt ựộ lên 120oC trong 8 giờ. Sau ựó tiếp tục tăng lên 150oC, rồi lên 172oC. đến khi dung dịch mầu trắng hoặc mầu vàng chanh nhạt ta ựun ở 182oC ựến cạn. đuổi axit bằng 100ml nước cất/ 3 lần, ựun cạn Hòa cuối bằng 50ml HNO3 1%, dung dịch này ựem ựo máy
c. Xác ựịnh chì và cadimi trong mẫu bằng Phương pháp cực phổ xung vi phân.
Phương pháp cực phổ là phương pháp quan trọng và phổ biến nhất trong các phương pháp phân tắch ựiện hóa. Ưu ựiểm cơ bản của phương pháp này là trang thiết bị tương ựối ựơn giản, tốn ắt hóa chất mà có thể phân tắch nhanh với ựộ nhạy và ựộ chắnh xác khá cao. Trong nhiều trường hợp có thể xác ựịnh hỗn hợp các chất vô cơ hoặc hữu cơ mà không cần tách riêng chúng ra.
Phương pháp cực phổ do nhà bác học người Tiệp: Hayrovski phát minh vào năm 1922. Với phương pháp này ông ựã ựạt giải Nobel năm 1959.
Ớ Nguyên tắc của phương pháp cực phổ:
Phương pháp cực phổ là phương pháp ựiện hóa dựa trên việc nghiên cứu và sử dụng các ựường dòng thế ựược ghi trong những ựiều kiện ựặc biệt.
Các chất ựiện phân có nồng ựộ khá nhỏ từ 10-3 ựến n.10-6 mol/l trong sự có mặt lượng lớn chất ựiện ly trơ ( với nồng ựộ ≥ 100 lần). Như vậy chất ựiện phân chỉ vận chuyển ựến cực bằng khuếch tán.
điện cực làm việc ( ựiện cực chỉ thị ) là một ựiện cực phân cực có bề mặt rất nhỏ, khoảng vài mm2. Trong cực phổ cổ ựiển người ta dùng ựiện cực chỉ thị là ựiện cực giọt thủy ngân ( Hg )
điện cực so sánh là ựiện cực không phân cực. đầu tiên người ta dùng ựiện cực ựáy Hg có diện tắch bề mặt tương ựối lớn, sau ựó thay bằng ựiện cực calomen hay ựiện cực Ag/AgCl.
đặt vào ựiện cực làm việc ựiện thế một chiều biến thiên liên tục nhưng tương ựối chậm ựể có thể ựược coi là không ựổi trong quá trình ựo dòng ựiện .
- Tiến hành:
- Lấy chắnh xác 10,00ml dịch mẫu ựã vô cơ + 500ộL CH
3COONH3 pH 4.6 + 100ộL KCl 3M cho vào bình ựiện phân.
- Tiến hành khuấy 180,0s, tốc ựộ khuấy 2000vòng/phút; ựồng thời thổi khắ trơ vào bình ựiện phân ựể ựuổi oxy ra.
- Thêm 100ộL dung dịch chứa, Cd2+, Pb2+, từ mẫu nghiên cứu cho vào bình ựiện phân.
- Khuấy 50,0s - Ngừng thổi
- Biên ựộ xung ựặt là 50mV, với thời gian ựo là 20,0ms, thời gian xung là 40,0ms, bước xung là 4mV.
- Thực hiện chương trình con:
* Giáng giọt thuỷ ngân và treo (HMDE)
* Quét thế với U
ựầu=−1150mV; U
cuối=+150mV, tốc ựộ quét 13,33mV/s; thời gian quét tương ứng là 98,1s
Thêm dung dịch chuẩn chứa Cd2+, Pb2+, với thể tắch thêm là 100ộL (nồng ựộ chuẩn của mỗi một ion kim loại ựược nhập vào trang tắnh toán)
- Thực hiện chương trình con.
- Thêm dung dịch chuẩn chứa Cd2+, Pb2với thể tắch thêm là 100ộL - Thực hiện chương trình con:
- Số lần thêm >2 thì kết thúc chương trình phân tắch - Hiển thị kết quả phân tắch trên màn hình
Hàm lượng chì và cadimi trong mẫu ựược tắnh theo công thức sau:
X= (C*V)/(1000*m) ( ộg/g)
Trong ựó:
X: Hàm lượng chì và cadimi trong mẫu phân tắch (ộg/g) C: Hàm lượng chì và cadimi ựo ựược trên máy (ộg/l) V: Thể tắch hòa tan cuối ( ml )
1000: Hệ số chuyển ựổi từ ml sang Lắt m: Khối lượng mẫu ựem vô cơ ( g)
* Tổng hợp quy trình phân tắch chì và cadimi trong gạo tẻ và thịt lợn nạc vai: Thắ nghiệm 1: Phân tắch hàm lượng chì và cadimi trong gạo tẻ:
Gạo mua tại chợ Cân khối lượng (Mo)
Vo 2 lần trong xoong bằng nước máy Gạn sạch nước, ựể ráo (trong 15 phút)
Cân lại khối lượng (M1)
Xay mẫu bằng máy xay Tigers
Cân mẫu, vô cơ hóa mẫu phân tắch Bảo quản trong túi PE
chỉ tiêu chì và cadimi trên máy cực phổ lưu trong tủ âm sâu
Thắ nghiệm 2: Phân tắch hàm lượng chì và cadimi trong thịt lợn nạc vai:
Thịt mua tại chợ
Cân khối lượng ban ựầu Rửa sạch dưới vòi nước, ựể ráo
Xay nhuyễn bằng máy say cầm tay Bramix
3.5. Xử lý số liệu:
Số liệu ựược tắnh toán bằng: - Giá trị trung bình, tỉ lệ %
- So sánh kết quả này với giới hạn tối ựa chì và cadimi theo Qđ 46- BYT - Ước tắnh lượng tiêu thụ thực phẩm trung bình của người Việt nam, dựa vào kết quả ựiều tra thực phẩm năm 2005
PHẦN 4: KẾT QUẢ đẠT đƯỢC
4.1. Thẩm ựịnh phương pháp
Thẩm ựịnh lại phương pháp AOAC 986.15 1998 nhằm ựánh giá phép thử áp dụng trong phòng thắ nghiệm có ựạt ựộ chắnh xác của phương pháp ựo và kết quả ựo hay không, nếu ựạt thì phương pháp ựược áp dụng trong nội bộ, hoặc thông qua phê duyệt ựể ban hành tiêu chuẩn ngành và Việt Nam. Theo quy ựịnh các tham số cần thẩm ựịnh gồm: ựộ lặp lại và ựộ thu hồi.
a. độ lặp lại
Phân tắch lặp lại 5 lần trên cùng một mẫu trong cùng một ựiều kiện. Tắnh giá trị trung bình (trung vị, M), ựộ lệch chuẩn (SD) và hệ số biến thiên (CV) Kết quả thu ựược như sau:
Mẫu gạo Hàm lượng Chì
ựo ựược(ộộộộg/g) Hàm lượng Cadimi ựo ựược (ộộộộg/g) Lần 1 0,0053 0,018 Lần 2 0,0061 0,020 Lần 3 0,0057 0,016 Lần 4 0,0058 0,014 Lần 5 0,0059 0,017 Trung bình 0,00576 0,017 độ lệch chuẩn (SD) 0,0003 0,0022 Hệ số biến thiên (CV%) 4,25 4,25 b. độ thu hồi (độ ựúng)
Xác ựịnh tắnh ựúng của phương pháp bằng cách phân tắch mẫu gạo (mẫu không nạp chuẩn) ký hiệu là M0, cũng với mẫu gạo ựó nhưng ựược nạp chuẩn chì - cadimi có nồng ựộ10ộg/mL với các thể tắch 1mL - 0.5mL, 2mL -1mL(làm lặp lại 5 lần, ký hiệu lần lượt là M1, M2). Tắnh hàm lượng chì - cadimi trong mẫu gạo ựược nạp chuẩn rồi trừ hàm lượng chì - cadimi trong
Kết quả như sau: Số lần thắ nghiệm Khối lượng mẫu vô cơ (g) Hàm lượng Chì - Cadimi ựược nạp thêm theo lý thuyết (ộộộộg/g) Hàm lượng Chì-Cadimi thu ựược thực tế (ộộộộg/g) độ thu hồi Chì-Cadimi (%) độ thu hồi trung bình Chì- Cadimi (%) M0 1 4,030 0,006 -0,011 1 4,001 2,499 Ờ 1,250 1,818-0,784 72,467 Ờ 61,839 2 4,002 2,499 Ờ 1,249 1,790-0,812 71,399 - 64,052 3 4,015 2,491 Ờ 1,245 1.829-0.795 73,178 Ờ 62,926 4 4,019 2,488 - 1,244 1,754-0,808 70,236 - 64,034 M1 5 4,022 2,486 -1,243 1,863-0,799 74,673 Ờ 63,357 72,39 Ờ 83,24 1 4,066 4,919 Ờ 2,459 6,064-2,508 123,149 Ờ 101,518 2 4,098 4,880 Ờ 2,440 5,476-2,396 112,079 Ờ 97,729 3 4,074 4,909 Ờ 2,455 5,980-2,457 121,682 Ờ 99,635 4 4,109 4,867 Ờ 2,434 5,749-2,482 117,982 Ờ 101,518 M2 5 4,122 4,852 Ờ 2,426 6,012-2,506 123,776 - 102,829 119,73 -100,65 Trung bình 96,063 Ờ 81,944 Hình 1. Hỗn hợp chuẩn chì & caidmi nồng ựộ 0.2ppm
Chuan pb- Cd 0.2ppm -0.80 -0.60 -0.40 -0.20 U (V) 0 50.0n 100n 150n 200n 250n 300n I (A) Cd Pb