V t li ê
PHỤ LỤC Phụ lục 1: Thành phần vi lượng môi trường MS:
Phụ lục 1: Thành phần vi lượng môi trường MS:
Thành phần khoáng vi lượng được thể hiện trong bảng sau:
Nhóm Muối khoáng Nồng độ (mg/L) Khoáng vi lượng MnSO4 22,30 H3BO3 6,20 ZnSO4.7H2O 8,60 KI 0,83 Na2MoO4.2H2O 0,25 CuSO4.5H2O 0,025 CoCl2.6H2O 0,025
Phụ lục 2: Xác định hàm lượng carotenoid trong mẫu cây CVT bằng phương pháp đo quang phổ
Nguyên tắc: Dựa trên nguyên lý của hiện tượng quang phổ hấp thụ.
Quang phổ hấp thụ thực chất là quá trình tương tác giữa hạt photon của ánh sáng với các phần vật chất. Khi ta chiếu một chùm tia sáng gồm các photon có các mức năng lượng khác nhau đi qua một dung dịch chất hấp thụ. Dung dịch chỉ hấp thụ chọn lọc những photon nào có mức năng lượng phù hợp với các mức năng lượng điện tử, năng lưượng dao động và năng lượng quay của phân tử chất đó. Như vậy các phân tử vật chất có cấu trúc khác nhau sẽ cho những phổ hấp thụ với các đỉnh và bước sóng đặc trưng khác nhau.
Tiến hành:
Chuẩn bị các ống nghiệm đã được làm sạch, cân 1 g mẫu CVT đã được sấy đến khối lượng không đổi, nghiền nhuyễn, cho vào các ống nghiệm. Thêm 3 mL hỗn hợp dung môi ethanol: hexane (2:1 v/v). Lắc nhẹ, sau đó cho thêm 2 mL nước cất và 4 mL hexane, vortex hỗn hợp này. Dùng micro pipet hút 1 mL dung dịch cho vào eppendorf, li tâm hỗn hợp li trích này ở 3000 v/p trong 5 phút. Hút 100 µL lớp sắc tố nổi bên trên hòa với 900 µL hỗn hợp dung môi ethanol: hexane (2:1 v/v). Tiến hành đo OD ở bước sóng 450 nm bàng cuvet thạch anh. Hàm lượng carotenoid tổng được xác định theo công thức: Carotenoid (µg/mL) = A450 x 25,2.
Phụ lục 3: Phương pháp xác định hàm lượng khô trong cây CVT
Nguyên tắc: dùng nhiệt độ cao làm bốc hơi nước trong mẫu phân tích, dựa vào hiệu khối lượng trước và sau sấy ta tính được hàm lượng nước và chất khô trong mẫu phân tích.
Thiết bị: cân sấy ẩm XM60 precica
Tiến hành: mẫu tươi CVT sau khi thu hái sẽ được xác định khối lượng tươi. Sau đó chọn phần mẫu đồng nhất, cắt nhỏ mẫu, cân chính xác 20 g mẫu, tiến hành sấy đến khối lượng không đổi. Khối lượng khô của mẫu được tính theo công thức Khối lượng khô (g) = (100 - %ẩm) x 20.
Phụ lục 4: Khối lượng các chất trong dung dịch dinh dưỡng
Nồng độ N (ppm)
Lượng chất tan có trong 100L môi trường (g)
CaCl2 MgSO4 KH2PO4 KNO3 (NH4)2SO4
50 36,1 25 65,8 3,1 23,2
100 36,1 25 65,8 3,1 46,9
150 36,1 25 65,8 3,1 70,5