* Dung hợp protoplast
- Khi các tế bào trần dung hợp với nhau và tạo thành một tế bào lai mang trong mình vật chất di truyền tất cả các bố mẹ. Các tế bào trần có nguồn gốc từ tế bào soma nên gọi là lai somạ
- Chọn lọc các thể lai soma
+ Do lai ngẫu nhiên nên có thể A+B→AB A+A→AA B+B→BB + Các cách chọn lọc thể lai vô tính • Phương pháp tế bào học • Phân tích isoenzym • Lai ADN, PCR
• Trồng cây tái sinh và đánh giá các đặc điểm nông sinh học…
* Chọn dòng tế bào
- Xử lý đột biến tế bào trần rồi đưa chúng vào tình trạng stress để thanh lọc nhằm chọn ra các dòng có tính chống chịu với điều kiện bất thuận. Các tế bào sống sót
Xung điện
trong các test thanh lọc sẽ được tái sinh thành cây để khảo sát tính chống chịu của
chúng.
- Một số hệ thống chọn lọc:
+ Chọn lọc dòng tế bào kháng kháng sinh, các dòng tế bào kháng sâu bệnh, chịu thuốc trừ cỏ, chịu điều kiện bất thuận, và các dòng tế bào có khả năng sinh trưởng trên các amono acid đặc thù trong số những acid amin khác.
+ Chọn các dòng tế bào có khả năng sản xuất các hợp chất thứ cấp.
* Biến nạp di truyền
- Nhận biết gen thông qua chức năng sinh học ( tính trạng liên quan đến đặc điểm hình thái, đặc điểm chức năng…). Xác định điều kiện đặc trưng cho quá trình biểu hiện và kìm hãm gen.
- Gen gắn với các vectơ: thông thường người ta sử dụng các loại plasmid mang gen kháng sinh để tiện lợi cho việc chọn lọc sản phẩm biến nạp sau nàỵ
- Chuyển gen vào protoplast: có nhiều phương pháp chuyển gen bằng hoá học, xung điện, súng bắn gen, thông qua vi khuẩn Agrobacterium.
- Chọn lọc sản phẩm biến nạp.
- Đánh giá kết quả và theo dõi biểu hiện của gen biến nạp.
Protoplast ngay sau khi tách
Tế bào giống, loài A Tế bào giống ,loài B
Câu 7. Trình bày kỹ thuật bảo quản nguồn gen in vitro --- o 0 o ---
ạ Mục đích của bảo quản nguồn gen in vitro
Mục đích cơ bản của việc bảo quản nguồn gen thực vật là duy trì sự phong phú đa dạng di truyền trong loài, giữa các loài và trong hệ sinh thái nói chung để làm cơ sở cho việc khai thác và sử dụng chúng một cách hợp lý cho hiện tại và trong tương laị