L Ờ IC ẢM ƠN
2.2.2. Phương pháp nghiên cứu
2.2.2.1. Phương pháp thu thập số liệu
Phương pháp thu thập, kế thừa số liệu, dữ liệu từ các tài liệu trong nước và quốc tếliên quan đến hiện trạng hoá chất acetaminophen trong không khí và bụi không khí. Tham khảo các phương pháp thu thập mẫu, chiết tách, phân tích mẫu, tổng hợp số liệu điều tra, khảo sát và phân tích kết quả. Các phương pháp đánh giá độc tính và truy tìm nguồn ô nhiễm.
2.2.2.2. Phương pháp điều tra thực địa
Phương pháp nghiên cứu thực địa nhằm khảo sát và lựa chọn được vị trí lấy mẫu phù hợp (đảm bảo các yêu cầu về mật độ dân cư, loại hình sản xuất, kinh doanh trong khu vực...).
2.2.2.3. Phương pháp xử lý số liệu
Sử dụng phần mềm trợ giúp Microsoft Excel Professional Plus 2013. Phương pháp xử lý số liệu thống kê được dùng đểđánh giá độ lặp, độ tin cậy của phép đo. Một sốđại lượng thống kê sử dụng trong xử lý số liệu:
- Giá trị trung bình :
(2.1) - Độ lệch chuẩnS của phép đo (SD):
31
- Độ lệch chuẩn tương đối (relative standard deviation) Sr (2.3)
- Giới hạn phát hiện (LOD):
(2.4)
Cmin: Nồng độ nhỏ nhất mà chiều cao tín hiệu pic của chất phân tích gấp 3 lần tín hiệu đường nền. S/N: Tín hiệu nền
- Giới hạn định lượng (LOQ) :
(2.5)
- Độ chính xác của phép đo: Theo ISO, độ chính xác của phép đo được đánh giá qua độ đúng và độ chụm. Độ chụm là mức độ gần nhau của các giá trị riêng lẻ của các phép đo lặp lại. Độ đúng là mức độ gần nhau của giá trị phân tích với giá trị thực. Độ đúng được biểu diễn dưới dạng sai số tuyệt đối hoặc sai số tương đối. Sai số được tính theo công thức:
(2.6)
(2.7) Trong đó: %X: Sai số phần trăm tương đối. Si : giá trị đo được tại mỗi lần đo i.
St : giá trị tìm được theo lý thuyết (đường chuẩn). n: số lần đo.
- Độ lặp lại của phép đo: Được xác định theo các đại lượng S2, CV.
32
Trong đó: Stb: Nồng độ trung bình, n: số lần đo, S: độ lệch chuẩn - CV: hệ số biến động của phép đo.
- Khoảng tin cậy:
hay (2.10)
Với cơ số mẫu bé, σ chính là S hoặc SRD. Trong nghiên cứu này với xác suất tin cậy là 96%, tương ứng với Z = 2 (quy tắc 2σ) được sử dụng để đánh giá độ tin cậy của phép đo.
2.2.2.4. Đánh giá mức độ rủi ro
Nồng độ acetaminophen dưới giới hạn phát hiện của phương pháp (MDL) và dưới giới hạn định lượng (LOQ) coi là giá trị 0 để phân tích dữ liệu.
Trong nghiên cứu này đã đánh giá mức độ phơi nhiễm khi ăn phải acetaminophen trong bụi nhà đối với sức khoẻ con người bao gồm vả người lớn và trẻ em ở Hà Nội. Liều lượng hấp thụ hàng ngày ID của acetaminophen do ăn phải bụi và việc đo lường tác động có hại có thể xảy ra của một cá nhân liên quan đến sức khoẻ con người. Chỉ số nguy hiểm (HQ) được ước tính theo phương trình như sau [65,66].
𝐼𝐷𝑖 = 𝐶𝑖×𝐼𝑅×𝐹𝑇 ×𝐴𝐹𝐵𝑊 (2.11) 𝐻𝑄 =𝑅𝑓𝐷𝑖𝐼𝐷𝑖 (2.12) Trong đó:
C là nồng độ Σ 10 acetaminophen trong bụi ở các địa điểm nghiên cứu; FT là tỉ lệ phần trăm thời gian ở tại nhà;
IR và AF là tốc độ trung bình hít bụi và khả năng hấp thụ acetaminophen trong cơ thể người.
BW là trọng lượng trung bình của cơ thể.
Chỉ số FT trong nghiên cứu này được giả định lần lượt là 86% và 64% đối với trẻ em và người lớn [67].
33
Trong nghiên cứu này, liều tham chiếu chế độ ăn uống mãn tính (cRfD) và liều tham chiếu chế độ ăn uống cấp tính (aRfD) do USHHS cung cấp được sử dụng là liều tham chiếu khi ăn phải bụi nhà [68,69]. Ngoài ra cả nồng độ hấp thụ được sử dụng trong hai trường hợp là tỷ lệ hấp thụ trung bình (tương ứng là 20 mg/ ngày và 50 mg/ ngày đối với người lớn và trẻ em) và tỷ lệ hấp thụ cao (50 mg/ ngày và 200 mg/ ngày tương ứng với trẻ em và người lớn) [70]. Cân nặng trung bình của người lớn và trẻ em được giả định lầm lượt là 60 kg và 18 kg.
2.2.2.5. Các bước thực hiện khi phân tích trên thiết bị LC-QTOF-MS.
❖ Bước 1: Chuẩn bị pha động Bước 2: Chuẩn bị chất chuẩn
- Quy trình chuẩn bị chuẩn (standards) theo quy trình của từng ứng dụng.
❖ Bước 3: Chuẩn bị hệ thống LC
- Bậtcác thiết bị của LC (Autosampler, pump 1, pump 2, oven, CBM). - Chuẩn bị pha động, dung dịch rửa cho kim tiêm, dung dịch rửa pump. - Điền đầy đủ đường ống bằng pha động mới bằng cách xoay vavle của pump 1 và pump 2 trên pump (xoay núm 1 vòng nhấn purge. Có thể nhấn thêm purge 1 lần nữa nếu thấy 1 lần purge chưa đủ). Sau khi purge xong, khóa chặt vavle lại.
- Purge đường nước rửa cho autosampler. - Lắp cột phân tích vào lò cột (nếu chưa lắp).
- Nếu cột mới, cần phải cân bằng cột trong thời gian từ 2 - 3 giờ với tốc độ dòng khoảng 0,2 - 0,3 mL/ min của MeOH : H2O (tỷ lệ 60: 40) (khi cân bằng cột, đầu ra của cột tháo khỏi detector MS, cho vào một lọ thải, tránh làm bẩn detector).
- Nếu cột cũ đang sử dụng, cân bằng cột trong thời gian 30 min với pha độngnhư trên (dung môi cho pha động lựa chọn tùy thuộc loại mẫu phân tích).
- Kiểm tra mực nước thải trong chai thải, đổ đi nếu đầy . - Mở máy tính .
34
- Thiết bị LC sẵn sàng cho quá trình phân tích.
❖ Bước 4: Tạo phương pháp phân tích/Acquisition.
❖ Bước 5: Xem lại dữ liệu/ Data review và xử lý số liệu.