CHƢƠNG 2 NGUYÊN LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
2.3. Chiết tách và xác định thành phần hóa học trong dịch chiết cây ngị ơm
Cân 900g cây ngị ơm đã đƣợc phơi khơ và nghiền nhỏ, chiết hồn lƣu với 1lít metanol ở nhiệt độ 85o (chiết 3 lần, mỗi lần 3 giờ) trong bình cầu có ống sinh hàn.
Dịch chiết gộp lại và tiến hành cô quay chân không thu đƣợc 76,892 g cao metanol.
Hòa tan cao metanol một lƣợng tối thiểu metanol, tiếp theo cho nƣớc cất vào thành dạng hỗn dịch rồi chiết phân bố nối tiếp với lần lƣợt các dung môi là n-hexane, diethyl ether, dichloromethane, chloroform, ethyl acetate, ethanol, buthanol thu đƣợc các dịch chiết tƣơng ứng.
Cao chiết n-hexane: chiết lỏng – lỏng, lắc với dung môi n-hexan cho đến khi màu của dịch chiết nhạt dần, thử trên mặt kính đồng hồ nếu khơng cịn vết thì dừng lại. Mỗi lần lắc trong vòng 30ph. Chiết 4 lần và mỗi lần là 50mL n-hexan, thời gian tách lớp là 15ph. Gộp các dịch chiết rồi tiến hành thu hồi dung môi, thu đƣợc cao n-hexan.
Cao chiết diethyl ether: bã chiết với n-hexane đƣợc lắc chiết tiếp với Diethyl ether. Chiết lỏng – lỏng, lắc với dung môi diethyl ether cho đến khi màu của dịch chiết nhạt dần, thử trên mặt kính đồng hồ nếu khơng cịn vết thì dừng lại. Mỗi lần lắc trong vòng 30ph. Chiết 4 lần và mỗi lần là 50mL diethyl ether, thời gian tách lớp là 15ph. Gộp các dịch chiết rồi tiến hành thu hồi dung môi, thu đƣợc cao diethyl ether.
Các dịch chiết còn lại ta thực hiện tƣơng tự, thu đƣợc các cao chiết tƣơng ứng. Các cao chiết sau khi thu đƣợc, trích một lƣợng nhỏ đem phân tích GC-MS để xác định thành phần và hàm lƣợng các cấu tử có trong mỗi cao chiết.