Dung môi dùng tách chiết anthocyanin là ethanol với các nồng độ: 20°, 40°, 60°, 80°, 98o (Nhi và cộng sự, 2020). Thí nghiệm được bố trí và tiến hành với nhiệt độ phòng, tỷ lệ bã bụp giấm/ ethanol là 1:10 (Nguyễn và Trần, 2019), thời gian chiết là 120 phút(Nguyễn và Trần, 2019).
Tiến hành thí nghiệm:
Cho 25g bã bụp giấm vào 5 bình tam giác 250 ml, sau đó cho 50ml các nồng độ ethanol 20°, 40°, 60°, 80°, 98o lần lượt vào từng bình đậy kín để ở nhiệt độ phòng trong 120 phút. Sau đó ly tâm 5000 vòng/phút trong 15 phút thu dịch và bổ sung dung dịch đệm pH 1, pH 4,5 rồi xác định hàm lượng Anthocyanin theo phương pháp pH vi sai. Lăp lại thí nghiệm 3 lần. Nồng độ ethanol có hàm lượng anthocyanin cao nhất sẽ được chọn để làm các thí nghiệm sau.
2.2.3. Khảo sát sự ảnh hưởng của thời gian chiết đến quá trình tách chiết anthocyanin từ bã bụp giấm. anthocyanin từ bã bụp giấm.
Khảo sát sự ảnh hưởng của thời gian: 60 phút, 90 phút, 120 phút, 150 phút, 180 phút đến khả năng trích ly anthocyanin, từ đó tìm ra thời gian cho khả năng trích ly cao nhất. Tiến hành thí nghiệm:
Cho 25g bã bụp giấm vào 5 bình tam giác 250 ml, sau đó cho 50ml dung môi ethanol với nồng độ thích hợp đã được xác định ở thí nghiệm trên vào từng bình đậy kín để ở nhiệt độ phòng trong các khoảng thời gian khác nhau lần lượt là 60 phút, 90 phút, 120 phút, 150 phút, 180 phút. Sau thời gian tương ứng ly tâm 5000 vòng/phút trong 15 phút thu dịch và bổ sung dung dịch đệm pH 1, pH 4,5 rồi xác định hàm lượng Anthocyanin theo phương pháp pH vi sai. Thí nghiệm được lặp lại 3 lần.