Ejw育p"d鵜"eƒe"fwpi"f鵜ej"i嘘e MI (1838 mg /L) và MCI (1603 mg /L trong methanol và 8逢嬰e"d違q"sw違p"vtqpi"v栄"n衣pj"荏"6oC. Ejw育p"d鵜"f«{"eƒe"fwpi"f鵜ej"ejw育p"n o"xk羽e" e„"p欝pi"8瓜"v瑛"2.5"8院p"42"rro hòa trong dung môi MeOH: H2O (3: 7, v/x+0"Vt逢噂e" khi vk‒o"x q"j羽"vj嘘pi"u逸e"m#."eƒe"fwpi"f鵜ej"ejw育p"8逢嬰e"n丑e"swc"o pi"n丑c 2.67" o0
3.3. Kh違o uƒv"8k隠u ki羽n s逸c ký HPLC-UV
L詠a ch丑n c瓜t s逸c ký: Qua các tài li羽u tham kh違o, c瓜t s逸e"m#"rjc"8違q"nw»p"8逢嬰c s穎
d映pi"8吋 phân tích MI và MCỊ Các c瓜v"rjc"8違o hi羽n có t衣i Vi羽n ki吋m nghi羽m thu嘘c TPHCM phù h嬰p cho vi羽c phân tích là c瓜t RP column (100mmx 2.1mm,1.7
航兼岻 "Develosil Aqueous AR RP-5 RP-52" *472oo" '" 608oọ" 702 ợ" V5" eqnwop" *472"oó"608"oọ"702" ợ"E3:"eqnwop"*50mm x 2.0 mm, 1.7 µm). Vtqpi"8隠 tài này c瓜t HPLC 8逢嬰c s穎 d映ng là: Inertsil C18 Phenomenex (250 mm x 4.6 mm,
7 ợ"vk隠n c瓜t: (50 mm x 2.1 mm, 1.7 ơ.
L詠a ch丑n thành ph亥p"rjc"8瓜ng: Qua m瓜t s嘘 tài li羽w"8«"vjco"mj違o ti院n hành th穎 pha
8瓜ng v噂i h厩n h嬰p dung môi acetonitrile : 0.1% formic acid trong p逢噂c[18,19]. L詠a ch丑n th吋 tích tiêm m磯u: 25航詣
L詠a ch丑n t嘘e"8瓜 dòng: 1.0 mL/ 1 phút
L詠a ch丑n dung môi pha m磯u và chu育n: Dung d鵜ch chu育n hay dung d鵜ch m磯u sau khi
swc" d逢噂c x穎 lý m磯w" vj逢運pi" 8逢嬰c pha trong 100% dung môi methanol ho員c acetonitrile, ho員c trong h厩n h嬰r"fwpi"o»k"x "p逢噂c có ho員c không có thêm dung d鵜ej"8k羽m. Dung d鵜ch pha chu育n ho員c m磯u khác nhau có th吋 違pj"j逢荏pi"8院n hình d衣ng peak phân tích. Trong nghiên c泳u này, 違pj"j逢荏ng dung môi pha chu育p"8院n hình d衣pi"rgcm"OK"x "OEK"8逢嬰e"8ƒpj"ikƒ"f詠a trên s穎vjc{"8鰻i dung môi pha chu育n: 100% methanol, h厩n h嬰r"ogvjcpqn"x "p逢噂c (3:7, v/v), h厩n h嬰r"ogvjcpqn"x "p逢噂c
e„"vj‒o"8羽m photphat (Na2HPO4) pH =3 (3:7, v/v).
L詠a ch丑p"8k隠u ki羽n ch衣y s逸c ký HPLC-WX<"Pj逢"vtqpi"rj亥n t鰻pi"swcp"8«"8隠 c壱p (b違piÈ+."OK"x "OEK"e„"vj吋 tách ra kh臼i nhau dùng h羽 fwpi"o»k"ogvjcpqn"p逢噂c hay acetonitril p逢噂ce„"vj pj"mj»pi"8鰻i (isocratic). Tuy nhiên, vi羽c tách MI và MCI ra kh臼i các peak trong n隠n m磯w"mj»pi"8挨p"ik違n, ph映 thu瓜c r医t nhi隠u vào n隠n m磯ụ
Vtqpi"mjk"8„"p隠n m磯u m悦 ph育m hay các s違n ph育o"ej<o"u„e"eƒ"pj¤p"t医t ph泳c t衣p. Trong nghiên c泳u này, vi羽c tách MI và MCI ra kh臼i nhau, tách MI và MCI ra kh臼i các peak trong các n隠n m磯u khác nhau dùng k悦 thu壱t HPLC-UV v噂k"rjc"8瓜ng có thành ph亥p"mj»pi"8鰻k"*kuqetcvke+"jc{"vjc{"8鰻k"*itcfkgpv+"8逢嬰c kh違o sát.
3.4. Kh違o sát l詠a ch丑n qui trình x穎 lý m磯u
Ch丑n dung môi và ph逢挨ng pháp chi院t sao cho chi院v"8逢嬰c hoàn toàn ch医t phân tích t瑛 n隠n m磯u, gi違m 違nh h逢荏ng c栄a n隠n m磯u, ch医t phân tích b隠n trong môi tr逢運ng pha m磯ụ
D詠a vào thành ph亥n c医u t衣q"x "8員c tính c栄a t瑛ng s違n ph育m, 3 nhóm m磯w"8逢嬰c phân chia và th詠c hi羽n trong bài nghiên c泳u này th吋 hi羽p"f逢噂i b違ng sau:
B違ng 3. 1. Các nhóm m磯w"ej<o"u„e"eƒ"pj¤p"vtqpi"d k"pijk‒p"e泳u
STT Tên m磯u Tr衣ng thái v壱t lý Nhóm 1 D亥u g瓜i, s英a t逸m, s英a r穎a m員t,
p逢噂c r穎a tay
Là s違n ph育m r穎a trôi, tan trong
p逢噂c, s羽v."e„"ók"vj挨o0
Nhóm 2 Mgo"f逢叡ng da
Là s違n ph育o"n逢w"n衣i trên da, không tan vtqpi"p逢噂ẹ"8員c s羽t, có mùi
vj挨o0
Nhóm 3 Mj<p"ik医y Là s違n ph育o"n逢w"n衣i trên da, không
vcp"vtqpi"p逢噂c, không mùị 3.4.1. Nhóm1 (M磯u d亥u g瓜i, s英a t逸m, s英a r穎a m員v."p逢噂c r穎a tay)
Cân chính xác kho違ng 1g m磯u, chi院t b茨ng 5mL h厩n h嬰p methanol: NaH2PO4 (3: 7) [1;̲"vtqpi"d·pj"8鵜nh m泳e"32"oN"ucw"8„"xqtvgz"vtqpi"3"rj¿v0"Swƒ"vt·pj"ejk院t xu医t ti院p t映e"8逢嬰c th詠c hi羽n b茨pi"uk‒w"¤o"vtqpi"52"rj¿v0"A鵜nh m泳c b茨ng dung môi pha m磯u, d鵜ch chi院v"8逢嬰c ly tâm trong 10 phút 荏 t嘘e"8瓜 6222"x”pi"1"rj¿v"ucw"8„"8逢嬰c l丑c qua màng l丑c 0.45 µm vt逢噂e"mjk"d挨o"x q"j羽 th嘘ng.
3.4.2. Nhóm 2 (M磯w"mgo"f逢叡ng, kem m員t)
Cân chính xác kho違ng 1g m磯w"8逢嬰c chi院t v噂i 1mL h厩n h嬰p cloroform [6̲"ucw"8„" xqtvgz"vtqpi"3"rj¿v."6oN"ogvjcpqn"8逢嬰e"vj‒o"x q"vt逢噂c khi siêu âm trong 30 phút.
A鵜nh m泳c b茨ng methanol, d鵜ch chi院v"8逢嬰c ly tâm trong 10 phút 荏 t嘘e"8瓜 4000 vòng /
rj¿v" ucw" 8„" n丑c qua màng l丑c 0,45 µm egpnwnqug" czgvcvg" vt逢噂e" mjk" d挨o" x q" j羽
th嘘pi0"Vtqpi"vt逢運ng h嬰p d鵜ch chi院t b鵜 v育p"8映c, c亥n có màng l丑c 0.22 µm vt逢噂c khi
d挨o"x q"j羽 th嘘ng.
3.4.3. Nhóm 3 (M磯w"mj<p"ik医y 逢噂t)
Cân chính xác kho違pi"3i"mj<p"ik医{"8«"8逢嬰c chu育n b鵜 b茨ng cách c逸t nó thành các mi院ng nh臼 (kho違ng 1 cm2+0"Ucw"8„."o磯w"8逢嬰c chi院t b茨ng 5mL h厩n h嬰p metanol: H2O (3: 7) [22̲"vtqpi"d·pj"8鵜nh m泳e"32"oN"vt逢噂c khi l逸c trong 1 phút. Quá trình chi院t xu医t ti院p t映e"8逢嬰c th詠c hi羽n b茨pi"uk‒w"¤o"vtqpi"52"rj¿v0"Ucw"mjk"8鵜nh m泳c
8院n 10 mL b茨ng dung môi, d鵜ch chi院v"8逢嬰c l丑c qua màn l丑c 0.45 µm vt逢噂e"mjk"d挨o"
vào h羽 th嘘ng.
3.5. Aƒpj"ikƒ"rj逢挨pi"rháp phân tích 3.5.1. A瓜8員c hi羽u
Ti院n hành s逸e"m#"vjgq"8k隠u ki羽p"8«"ej丑n các m磯u sau:
- Dung d鵜ch m磯u tr逸ng: Cân chính xác kho違ng 1.0 g m磯u d亥u g瓜i Olive, m磯u không ch泳a Methylisothiazolinon và Methylcloroisothiazolinon, x穎 lý m磯u theo m映c 3.4.1 (nhóm 1) và phân tích b茨ng HPLC-UV (m映c 3.3)
- Dung d鵜ch m磯u tr逸ng (d亥u g瓜i Olive) thêm chu育n MI (n欝pi"8瓜 3.676 mg/kg) và MCI (n欝pi"8瓜 3.847 mg/kg). M磯u d亥u g瓜k"8逢嬰c x穎 lý theo m映c 3.4.1 và phân tích b茨ng HPLC-UV (m映c 3.3).
3.5.2. Kh違o sát kho違ng tuy院p" v pj" 8逢運ng chu育n và 違pj" j逢荏ng c栄a n隠n m磯ụ
Mjq違pi" vw{院p" v pj" e栄c" 8逢運pi" ejw育p" 8逢嬰e" 8ƒpj" ikƒ" d茨pi" eƒej" z¤{" f詠pi 8逢運pi" ejw育p" 荏" uƒw" p欝pi" 8瓜" mjƒe" pjcw" ucw<"MI 荏" 2." 205898." 30:5:." 50898." ;03;." 3:05:"
mg/L; MCI 荏"2."205:6:."30;46."50:6:.";084."3;046"og/L trong dung môi và trong
5f鵜ej"ejk院v"p隠p"o磯w khác nhau *f亥w"i瓜k"8亥w."mj<p"ik医{"x "mgơ0"謂pj"j逢荏pi"fq"p隠p" o磯w"*OG'+"8逢嬰e"v pjvjgq"o映e"407.2.
3.5.3. A瓜8¿pi"e栄c"rj逢挨pi"rjƒr
A瓜"8¿pi"e栄c"rj逢挨pi"rjƒr"8逢嬰e"8ƒpj"ikƒ"vj»pi"swc"jk羽w"uw医v"vjw"j欝k"e栄c"rj逢挨pi"
pháp. Cân 1,0000 g m磯u th穎 r欝i ti院n hành t衣o m磯u t詠 t衣o 泳ng v噂i t瑛ng n隠n m磯u
*mj»pi"ej泳c"jq員e"ej泳c"t医v" v"OK"x "OEK+ d亥u g瓜k"8亥u, kh<n 逢噂t, mj<p gi英 育m v噂i l逢嬰ng ho衣t ch医t MI và MCI thêm vào sao cho n欝pi"8瓜 ho衣t ch医t sau khi x穎 lý m磯u
泳ng v噂i n欝pi"8瓜 vj医r"j挨p"7"n亥p"x "ecq"j挨p"4"n亥p"uq"x噂k"o泳e"sw{"8鵜pj"ejq"rjfir"
(15ppm). 雲 m厩i n欝pi"8瓜 th詠c hi羽n v噂i 3 m磯ụ Ti院n hành z穎"n#"o磯w"x "s逸c ký theo
sw{"vt·pj"8«"z¤{"f詠ng. K院t qu違8瓜"vjw"j欝k"vt‒p"eƒe"p隠p"o磯w"mjƒe"pjcw"v衣k"eƒe"p欝pi" 8瓜"vj‒o"ejw育p"OK"x "OEK"mjƒe"pjcw"8逢嬰e"8ƒpj"ikƒ0
Gi噂i h衣n phát hi羽n (LOD) c栄a MCI và MI 8逢嬰e"zƒe"8鵜nh b茨ng cách thêm n欝pi"8瓜
MI và MCI v噂i n欝pi"8瓜 th医p trong các n隠n m磯u khác nhau (d亥u g瓜k."mj<p"逢噂t và n隠n kem), x穎 lý m磯u, phân v ej" vjgq" swk" vt·pj" 8«" z¤{" f詠ng. Gi噂i h衣n phát hi羽n (LOD) là n欝pi"8瓜 cho t益 l羽 tín hi羽u trên nhi宇u không nh臼j挨p"5<"30
Gi噂i h衣n phát hi羽n (LOQ) c栄a MCI và MI 8逢嬰e"zƒe"8鵜nh b茨ng cách thêm n欝pi"8瓜
MI và MCI v噂i n欝pi"8瓜 th医p trong các n隠n m磯u khác nhau (d亥u g瓜k."mj<p"逢噂t và n隠n kem), x穎 lý m磯w."rj¤p"v ej"vjgq"swk"vt·pj"8«"z¤{"f詠ng. Gi噂i h衣p"8鵜pj"n逢嬰ng (LOQ) là n欝pi"8瓜 cho t益 l羽 tín hi羽u trên nhi宇u không nh臼j挨p"32"<"3"x噂i RSD nh臼 j挨p"32'"x噂i phân tích ba l亥n.
3.6. Áp d映ng trên m瓜t s嘘 ch院 ph育m d亥u g瓜k"8亥u, kh<n 逢噂t, mgo"f逢叡ng trên th鵜
tr逢運ng:ぉ
Áp d映ng qui trình phân tích 8«"z¤{"f詠pi"8吋 8鵜pj"n逢嬰ng MI và MCI trong 84 s違n ph育o"ej<o"u„e"eƒ"pj¤p"dcq"i欝m d亥u g瓜i, s英a t逸m, s英a r穎a m員v."mgo"f逢叡pị"mj<p"
gi医{"逢噂t trên th鵜vt逢運ng thành ph嘘 H欝 Chí Minh t瑛vjƒpi"5"8院p"vjƒpi"9"p<o"4243. 3.7. Rj逢挨pi"rjƒr"z穎 lý s嘘 li羽u
M瓜t s嘘 8員c tr逢ng th嘘pi"m‒<"Eƒe"8員c tr逢ng th嘘pi"m‒"8逢嬰c tính d詠a vào các hàm s嘘
trong Microsoft Excel.
Giá tr鵜 trung bình (X): Hàm AVERAGE - A瓜 l羽ch chu育n (SD): Hàm STDEV - A瓜 l羽ch chu育n t逢挨pi"8嘘i (RSD) 怠待待掴聴帖
諜 "ガ
- T逢挨ng quan h欝i quy tuy院n tính:ぉPh逢挨ng trình h欝i quy tuy院n tính th吋 hi羽n quan h羽
gi英a di羽n tích pic s逸c ký và n欝pi"8瓜 ch医t phân tích: y = ax +b H羽 s嘘 góc a: Hàm SLOPEぉ
H羽 s嘘 ch逸n b: Hàm INTERCEPT H羽 s嘘 t逢挨ng quan r: Hàm CORREL
EJ姶愛PI"KX0"K蔭T QU謂 VÀ BÀN LU一N
4.1. Kh違o sát l詠a ch丑n qui trình phân tích 4.1.1. Kh違o sát l詠a ch丑n c瓜t s逸c ký
L詠a ch丑n c瓜t s逸c ký: Qua các bài nghiên c泳u, c瓜t s逸e"m#"rjc"8違q"nw»p"8逢嬰c s穎 d映ng
8吋 phân tích MI và MCỊ Các c瓜v" rjc" 8違o hi羽n có t衣i Vi羽n ki吋m nghi羽m thu嘘c TPHCM phù h嬰p cho vi羽c phân tích là c瓜t RP column (100mm x 2.1mm, 1.7
航兼岻 "Develosil Aqueous AR RP-5 RP-52" *472oo" '" 608oọ" 702 ợ" V5" eqnwop" *472"oo"'"608"oọ"702" ợ"E3:"eqnwop"*50mm x 2.0 mm, 1.7 µm). Vtqpi"8隠 tài này, chúng tôi ch丑n c瓜t Inertsil C18 Phenomenex *472"oo"'"608"oọ"702" ợ"vk隠n c瓜t: Phenomenex (50mm x2.1mm, 1.7 µm), 8吋 phân tích MI và MCI trong các s違n ph育o"ej<o"u„e"eƒ"pj¤p0
4.1.2. L詠a ch丑p"d逢噂c sóng phân tích:
D逢噂c sóng 膏陳銚掴 c栄a MI và MCI là 274nm và 271 nm. Vì trong m悦 ph育m, MI và
OEK"vj逢運pi"8逢嬰c dùng v噂i t雨 l羽 1:3 nên 逢u tiên s穎 d映ng max c栄a MI là 274 nm
n o"d逢噂e"u„pi"rj¤p"v ej"ejq"8亥u dò UV. B逢噂c sóng này c ng phù h嬰p v噂i các tài li羽w"8«"nghiên c泳ụ
Ti院n hành phân tích m磯u th穎 và m磯u chu育n c ng nh壱n th医y 荏 b逢噂c sóng 274 nm MI và MCI 8逢嬰c phát hi羽n t嘘t, t益 l羽4"rke"e¤p"8嘘i, pic nh丑p"x "8嘘i x泳ng (Hình 4.1), các thành ph亥n có trong n隠n m磯u th穎 không gây tr荏 ng衣i cho vi羽e"8鵜pj"v pj."8鵜nh l逢嬰ng MI và MCỊ Vì v壱y l詠a ch丑n b逢噂c sóng 274 nm làm b逢噂c sóng phân tích.
4.2. Kh違o sát l詠a ch丑n dung môi pha chu育n và m磯u
MI và MCI là nh英ng ho衣t ch医t d宇 vcp"vtqpi"p逢噂c, methanol,... Các dung môi này
8逢嬰c vj逢運pi"8逢嬰c l詠a ch丑n pha chu育p"e pi"pj逢"n "fwpi"o»k chi院t hai ch医t này ra kh臼i n隠n m悦 ph育m. M磯u sau khi chi院t có th吋 pha trong methanol 100% ho員c h厩n h嬰r"fwpi"o»k"x "p逢噂c. Hình 4.1 d衣ng peak có th吋 b鵜 違pj"j逢荏ng b荏i dung môi pha chu育n hay m磯ụ
Hình 4.1. S逸e"m#"8欝 HPLC-UV c栄a dung d鵜ch chu育n MI (29.8ppm) và MCI (72.4 ppm) trong các dung môi pha chu育n khác nhau (a) methanol (100%), (b) Methanol :Na2HPO4 (3:7,v/v) pH=3.0 và (c) MeOH: H20 (3:7, v/v).
(a)
(b)
Trong methanol (100%), peak không cân x泳ng, chân peak MCI b鵜 mfiq"vt逢噂c (Hình 4.1 (a)). Trong dung d鵜ch Na2HPO4: Methanol (7:3,v/v) pH=3.0 (Hình 4.1 (b)) và MeOH: H20 (3:7, v/v) (Hình 4.1 (c) ) peak cân x泳pị"8姻p, 2 peak tách kh臼i nhaụ
îJ厩p"j嬰r"fwpi"o»k"Pc2HPO4: Methanol (7:3+"rJ?502"jq員e"Ogvjcpqn<"J20 8逢嬰e ej丑p"n o"fwpi"o»k"rjcejw育p"jc{"o磯w0 J羽"methanol: p逢噂e"*5<9."x1x+"8挨p"ik違p."vk院v" mk羽o"fwpi"o»k0"Vw{"pjk‒p."vtqpi"o瓜v"u嘘"o磯w"f亥w"i瓜k"8亥w"ej泳e"vj違q"f逢嬰ẹ"j羽"fwpi"
môi Na2HPO4: Methanol (7:3, x1x+"f́pi"rjc"o磯w"v臼"tc"jk羽w"sw違"x·"rgcm"rj¤p"v ej" e¤p"8嘘k"j挨p [9].
4.3. Kh違o sát thành ph亥p"rjc"8瓜ng:
Qua các tài li羽w"8«"pijk‒p"e泳w"rjc"8瓜ng th逢運ng dùng th逢運ng là h厩n h嬰p các dung môi phân c詠c nh逢 Methanol, acetonitril, n逢噂c, p逢噂c ch泳a HCOOH 0.1%. Nghiên c泳w"dcp"8亥u t壱p trung kh違q"uƒv"ej逢挨pi"vt·pj"ej衣y isocratic dùng h厩n h嬰p methanol
4.4. Kh違o sát ch逢挨ng trình ch衣y isocratic
Hình 4.2. S逸e"m#"8欝 HPLC-UV c栄a dung d鵜ch chu育n MI (29.8ppm) và MCI (72.4 ppm) ch衣y isocratic (a) MeOH: H20 (20:80, v/v), (b) MeOH: H20 (40:60, v/v) và (c) MeOH: H20 (60:40, v/v).
(a)
(b)
Trong c違 3 t雨 l羽 MeOH: H2O các peak MI và MCI trong dung d鵜ej"8隠u tách hoàn toàn ra kh臼i nhau, peak cân x泳ng không có hi羽p" v逢嬰pi" mfiq" 8w»k0 H羽 rjc" 8瓜ng MeOH: H2O (60:40, v/v) (Hình 4.2 (c)), các peak có th運k"ikcp"n逢w"pi逸n, g亥n nhaụ
D逢噂e"8亥u, nghiên c泳w"8«"ej丑p"ej逢挨pi"vt·pj"kuqetcvke"x噂k"rjc"8瓜ng Methanol: H2O (40:60, v/v) cho các nghiên c泳u ti院r"vjgq0"Ej逢挨pi"vt·pj"ej衣y này cho pic MI và MCI tách hoàn toàn, th運k"ikcp"n逢w"v鰻ng c瓜ng kho違ng 15 phút, có th吋 áp d映ng cho n隠n m磯u th壱t.
Ej逢挨pi" vt·pj" kuqetcvke" x噂k" rjc" 8瓜ng Methanol: H2O (40:60, v/v) t臼 ra hi羽u qu違
trong vi羽c tách MI, MCI ra kh臼i các peak nhi宇u c栄a m瓜t s嘘 n隠n m磯w"mj<p 逢噂t, d亥u g瓜k"8亥ụ H亥u h院t m磯u có th吋 phân tích khi dùng h羽rjc"8瓜ng nàỵ
Hình 4.3. S逸e"m#"8欝 HPLC-UV v噂k"ej逢挨pi"vt·pj"kuqetcvke"x噂k"rjc"8瓜ng Methanol: H2O (40:60, v/v) cho n隠n m磯u d亥u g瓜i Pantenẹ
Tuy nhiên, trong m瓜t s嘘 m磯u d亥u g瓜k"8亥u peak MI và MCI b鵜 che l医p b荏i các peak nhi宇u trong n隠n m磯u (Hình 4.4).
Hình 4.4. S逸e"m#"8欝 HPLC-UV v噂k"ej逢挨pi"vt·pj"kuqetcvke"x噂k"rjc"8瓜ng Methanol: H2O (40:60, v/v) cho n隠n m磯u d亥u g瓜i X-men.
Khi ch衣{"ej逢挨pi"vt·pj"OgQJ<"J20 (40:60, v/v) peak MIT (3.077 phút) và MCT (4.770 phút) b鵜 ch欝ng l医p c栄a các peak trong n隠n m磯w0"Fq"8„."e亥n ph違i nghiên c泳u
ej逢挨pi"vt·pj"ej衣y s逸c ký sao cho các peak MI và MCI tách ra kh臼i các peak nhi宇u c栄a n隠n m磯w"8吋 có th吋8鵜pj"v pj"x "8鵜pj"n逢嬰ng b茨ng k悦 thu壱t HPLC-UV.
4.5. Kh違q"uƒv"ej逢挨pi"vt·pj"itcfkgpv
Sau khi tham kh違o m瓜t s嘘 ej逢挨pi" vt·pj dung môi (gradient) trong phân tích các ch医t b違o qu違n trong m悦 ph育m trong các tài li羽u tham kh違o, cùng v噂i th詠c hành thí nghi羽o"vjc{"8鰻k"ej逢挨pi"vt·pj"ej衣y gradient trong phòng thí nghi羽ọ"ej逢挨pi"vt·pj"
ch衣y gradient (B違ng 4.1) t臼 ra hi羽u qu違 trong vi羽c phân tích MI và MCI trong các n隠n m磯u ph泳c t衣p.
B違ng 4.1. MI và MCI ch衣{" ej逢挨pi" vt·pj" itcfkgpv" x噂k" rjc" 8瓜ng HCOOH 0.1% : ACN
Th運i gian Dung môi HCOOH 0.1%
(Kênh A) Dung môi ACN (Kênh B)
0 95 5 5 95 5 9 93 7 10 80 20 20 80 20 23 10 90 25 95 5 30 95 5
Hình 4.5. Trình bày s逸e"m#"8欝 HPLC-UV c栄a m瓜t dung d鵜ch chu育n h厩n h嬰p MI và MCI ch衣y b茨pi"ej逢挨pi"vt·pj"itcfkgpv"8隠 ngh鵜. Hai peak MI và MCI tách ra hoàn
vq p."rgcm"e¤p"8姻p nh丑n, không có tình tr衣pi"mfiq"8w»k. Hình 4.6 trình bày s逸e"m#"8欝
HPLC-UV c栄a m磯u Ramus ch衣{"ej逢挨pi"vt·pj"itcfkgpv"8隠 ngh鵜. K院t qu違 cho th医y các peak MI và MCI tách hoàn toàn ra kh臼i các peak nhi宇u c栄a n隠n m磯ụ
Hình 4.5. S逸e"m#"8欝 HPLC-UV c栄a m瓜t dung d鵜ch chu育n h厩n h嬰p MI và MCI ch衣y b茨pi"ej逢挨pi"vt·pj"itcfkgpv"8隠 ngh鵜.
Hình 4.6. S逸e"m#"8欝 HPLC-UV c栄a m磯u Ramus ch衣{"ej逢挨pi"vt·pj"itcfkgpv"8隠 ngh鵜. Nh壱n xét:
Rõ ràng, có th吋 th医y tuy th運k"ikcp"rj¤p"v ej"f k"pj逢pi"x噂k"ej逢挨pi"vt·pj"itcfkgpv"e„"
th吋vƒej"8逢嬰c 2 peak MIT và MCI ra hoàn toàn, áp d映ng cho c違 nh英ng n隠n m磯u m悦
ph磯m ph泳c t衣p o "ej逢挨pi"vt·pj"kuqetcvke"mj»pi"vj詠c hi羽p"8逢嬰c.
Vì v壱y, ngay t瑛 8亥u có th吋 ch丑p"ej逢挨pi"vt·pj"itcfkgpv"ejq"rj¤p"v ej"OK"x "OEK"
trong các s違n ph育o"ej<o"u„e"eƒ"pj¤p0"
Quy trình phân tích trong m悦 ph育m r医t ph泳c t衣p, không th吋 ch雨 ti院n hành d詠a trên m磯u chu育n mà quy trình b鵜違pj"j逢荏ng r医t nhi隠u b荏i n隠n m磯ụ Vì v壱y xây d詠pi"8逢嬰c qw{"vt·pj"d逢噂e"8亥w"pj逢pi"mjk"vk院n hành vào m磯u th穎8«"rj違i có nh英ng thay 8鰻k"8吋
phù h嬰p v噂i t瑛ng n隠n m磯u khác nhaụ Trong n隠n m磯u có nhi隠u ch医v"ej逢c"zƒe8鵜nh
8逢嬰e"vt逢噂c (có nh英ng ch医v"8逢嬰c ghi trên nhãn và nh英ng ch医v"mj»pi"8逢嬰c ghi) gây
mj„"mj<p"vtqpi"swƒ"vrình xây d詠ng quy trình phân tích. Th壱m chí trong cùng m瓜t n隠n
m磯w." sw{" vt·pj" rj¤p" v ej" e pi" e„" vj吋 ph違k" vjc{" 8鰻i theo t瑛ng nhà s違n xu医t khác nhaụ
Trong m瓜t s嘘 bài nghiên c泳w" vt逢噂e" 8¤{" ]3̲]20][27̲." ej逢挨pi" vt·pj" itcfkgpv" e pi" 8逢嬰e"逢w"vk‒p"u穎 d映ng vì hi羽u qu違 phân tách cao."8違m b違q"8栄 th運i gian r穎a gi違i và không 違pj"j逢荏pi"8院n nh英ng m磯u th穎 saụ
Tuy nhiên, th運i gian phân tích dài (kho違ng 30 phút). Ho員c có th吋 f́pi" ej逢挨pi"
trình ch衣{"kuqetcvke"8挨p"ik違n MeOH: H2O (40:60, v/v) cho các m磯u phân tích và 8鰻i
ucpi"ej逢挨pi"vt·pj"ej衣y gradient khi g員p n隠n m磯u ph泳c t衣p. 4.6. Th育o"8鵜pj"rj逢挨pi"rjƒr
4.6.1. A瓜8員c hi羽u
Hình 4.7. trình bày s逸e"m#"8欝 c栄a d鵜ch chi院t tr逸ng m磯u (d亥u g瓜i Olive) và d鵜ch chi院t c栄a tr逸ng m磯u thêm chu育n MI và MCỊ Các peak MI và MCI tách ra kh臼i nhau và tách ra kh臼i các peak nhi宇u c栄a n隠n m磯ụ MI MCI (a) (b) (c)
Hình 4.7. S逸e"m#"8欝"JRNE-UV e栄c"*c+"fwpi"f鵜ej"vk‒w"ejw育p"i欝o"OK"*50898"og/L) và MCI (3.848 mg/L) trong methcpqn."*d+"o磯w"f亥w"i瓜k"8亥w"mj»pi"ej泳c"OEK"x "OK,
*e+"f亥w"i瓜k"8亥w"e„"ej泳c MCI và MỊ
4.6.2. Kho違ng tuy院n tính c栄c"8逢運ng chu育n và 違pj"j逢荏ng c栄a n隠n m磯u
Mjq違pi" vw{院p" v pj" e栄c" 8逢運pi" ejw育p" 8逢嬰e" 8ƒpj" ikƒ" d茨pi" eƒej" z¤{" f詠pi" 8逢運pi" ejw育p" 荏"uƒw"p欝pi"8瓜" mjƒe"pjcw"ucw<" OKV" 荏"2."205898."30:5:."50898.";03;."3:05:"
mg/L; MCI 荏"2."205:6:."30;46."50:6:.";084."3;046"oi1N"vtqpi"fwpi"o»k"x "vtqpi" f鵜ej"ejk院v"e栄c"dc"p隠p"o磯w"*f亥w"i瓜k"8亥w."mj<p"ik医{"x "mgơ0"
Hình 4.8. Tt·pj"d {"8逢運pi"ejw育p"OK"x "OEK"rjc"vtqpi"fwpi"o»k"*ogvjcpqn< H2O,
52<92.xx+0"*D違pi"u嘘"nk羽w"zkp"zgo"vj‒o"rj映"n映e"3+0"M院t qu違 cho th医y h羽 s嘘 t逢挨ng quan gi英a n欝pi"8瓜 và di羽n tích pic c栄a c違 2 ch医t MIT, OEV"8隠w"e„"t"œ"2.;;9"*jc{"
R2 œ"2.;;7+"vtqpi"fwpi"o»k0"Pj逢"x壱{."e„"vj吋 k院t lu壱n có s詠 liên quan tuy院n tính gi英a n欝pi"8瓜 và di羽n tích pic c栄a các ch医t phân tích trong kho違ng n欝pi"8瓜 8«"mj違o sát. ぉ y = 67048x - 893.64 R² = 0.9997 -200000 0 200000 400000 600000 800000 1000000 1200000 1400000 0 5 10 15 20 MI y = 60317x + 104.44 R² = 0.9998 0 200000 400000 600000 800000 1000000 1200000 1400000 0 5 10 15 20 25 MCI
Hình 4.8. Rj逢挨pi"vt·pj"vw{院n tính c栄a chu育n MIT và MCT trong dung môi
K院t qu違 h羽 s嘘 t逢挨ng quan gi英a n欝pi"8瓜 và di羽n tích pic c栄a c違 2 ch医t MIT, MCT
8隠w"e„"t"œ"2.;;9"*jc{"T2 œ"2.;;+"vtqpi"eƒe"f鵜ej"ejk院v"e栄c"eƒe"p隠p"o磯w"mjƒe"pjcw0" *D違pi"u嘘"nk羽w"x "8欝"vj鵜"8逢運pi"ejw育p"zkp"zgo"vj‒o"rj映"n映e"3+0
Mj違q"uƒv"違pj"j逢荏pi"e栄c"p隠p"o磯w"n‒p"8逢運pi"ejw育p"e栄c"OK"x "OEK"8逢嬰e"vt·pj"d y trong các hình 4.9 và hình 4.10.
Hình 4.9. So sánh 違pj"j逢荏ng c栄a n隠n m磯u lên h嬰p ch医t MI pha trong n隠n m磯u và trong dung môị
-200000 0 200000 400000 600000 800000 1000000 1200000 1400000 1600000 1800000 0 5 10 15 20 7ｷ 茨ﾐ "ｹ Iｴ d員ﾐｪ"U引 MI Linear (Shampoo) Linear (Tissue) Linear (Cream) Linear (Standard)
Hình 4.10. So sánh 違pj"j逢荏ng c栄a n隠n m磯u lên h嬰p ch医t MCI pha trong n隠n m磯u và trong dung môi
B違ng 4.2. H羽 s嘘 v逢挨pi"swcp"eƒe"8逢運ng tuy院n tính gi英a các n隠n m磯u, dung môi và %ME
H嬰p ch医t
Dung môi D亥u g瓜i Khƒn gi医{"逢噂t Mgo"f逢叡ng
Slope R2 Slope R2 ME% Slope R2 ME% Slope R2 ME%
MIT 67048 0.99 91602 0.99 36.6% 87450 0.99 30.5% 72219 0.99 7.7%
MCI 60317 0.99 83116 0.99 37.7% 78768 0.99 30.5% 70749 0.99 17.2%
V́{"vjw瓜e"x q"ikƒ"vt鵜"e栄c"v益"n羽"rj亥p"vt<ọ"eƒe"違pj"j逢荏pi"e栄c"p隠p"o磯w"8逢嬰e"rj¤p" nq衣k"vj pj"eƒe"nq衣k"mjƒe"pjcw0"V益"n羽"rj亥p"vt<o"v瑛"&42'"8院p"42'"8逢嬰e"eqk"n "mj»pi" d鵜" 違pj" j逢荏pi" d荏k" p隠p" o磯w0" M院v" sw違" vtwpi" d·pj" z違{" tc" mjk" eƒe" ikƒ" vt鵜" p茨o" vtqpi" mjq違pi"v瑛"42'"8院p"72'"8逢嬰e"zgo"o磯w"d鵜"違pj"j逢荏pi"d荏k"p隠p [21̲0"Uq"x噂k"m院v"sw違" 8逢嬰e"vj吋"jk羽p"vtqpi"d違pi"4.2."OG"8嘘k"x噂k"e違"OKV"x "MCI trong f亥w"i瓜k"n亥p"n逢嬰v"n "
36.6% và 37.9'."OG"8嘘k"x噂k"pj英pi"pi逢運k"荏"mj<p"ik医{"n "5207'0"Pj英pi"v益"n羽"rj亥p" vt<o"p {"e„"vj吋"m院v"nw壱p"t茨pi"f亥w"i瓜k"x "mj<p"ik医{"逢噂v"d鵜"違pj"j逢荏pi"d荏k"p隠p"o磯w0"
-200000 0 200000 400000 600000 800000 1000000 1200000 1400000 1600000 1800000 0 5 10 15 20 25 A re a Concentration MCI Linear (Shampoo) Linear (Tissue) Linear (Cream) Linear (Standard)
Vtqpi"mjk"8„."OG"8嘘k"x噂k"OKV"x "MCI 荏"f衣pi"mgo"n "909'"x "3904'"ejq"vj医{"t茨pi" mj»pi"e„"u詠"i¤{"pjk宇w"p q"zw医v"jk羽p"x "o磯w"mj»pi"d鵜"違pj"j逢荏pi"fq"p隠p0"Fq"8„."8吋" vtƒpj"pj英pi"違pj"j逢荏pi"p {"x "8違o"d違q"m院v"sw違"8ƒpi"vkp"e壱{."e亥p"u穎 f映pi"8逢運pi" ejw育p"rj́"j嬰r"x噂k"o磯w"ejq"f亥w"i瓜k"x "mj<p"ik医{"逢噂v0"A逢運pi"ejw育p"vtqpi"fwpi"o»k" e„"vj吋"8逢嬰e"u穎"f映pi"8吋"8鵜pj"n逢嬰pi"ej pj"zƒe"vtqpi"mgo0
4.6.3. Kh違q"uƒv"8瓜 thu h欝k"x "8瓜 l員p l衣i c栄c"rj逢挨pi"rjƒr"
Vt逸pi"o磯w"*mjq違pi"3i+"*p隠p"f亥w"i瓜k."mj<p"逢噂v"x "p隠p"mgơ"8逢嬰e"vj‒o"ejw育p"j瓜p" j嬰r"ejw育p"OK"x "OEK"v衣k"5"o泳e"p欝pi"8瓜"mjƒe"pjcw"mjq違pi4."32"x "3;"rro"*D違pi"