3. Chuẩn bị mẫu thử
8.3.2. Định lƣợng Lipid toàn phần theo WEIBULL – STOLDT
1. Nguyên lý:
Giải phóng lipid từ các hợp chất với protid và glucid, bằng cách thủy phân acid ở môi trƣờng có cồn. Sau đó chiết lipid bằng phƣơng pháp Soxhlet.
2. Dụng cụ, vật liệu thuốc thử:
- Dụng cụ vật liệu nhƣ phƣơng pháp Soxhlet. - HCl tinh khiết loại 1, tỷ trọng 1,19.
3. Cách thực hiện:
Cân thật chính xác khoảng 10 g chất thử, cho vào cốc thủy tinh dung tích 400 ml, thêm 100 ml nƣớc cất, 60 ml acid clorhydric và mấy viên đá bọt hoặc bi thủy tinh để điều hòa độ sôi. Đun cách thủy trong 15 phút. Sau đó vừa khuấy vừa đun cho đến sôi. Đậy kín bằng mặt kính đồng hồ và tiếp tục đun sôi nhẹ trong nửa giờ.
Khi tất cả các chất albumin đều đã hòa tan, tráng mặt kính đồng hồ bằng nƣớc sôi, hứng nƣớc đó vào cốc. Đem lọc tất cả qua giấy lọc đã thấm ƣớt bằng nƣớc lạnh và có chứa một ít cát sạch. Tráng cốc bằng một ít nƣớc sôi, rồi cũng đem lọc nƣớc đó. Lọc xong, để giấy lọc với cặn ráo hết nƣớc, đem trải lên mặt kính đồng hồ, rồi sấy khô trong tủ sấy ở nhiệt độ 105oC, trong 2 – 4 giờ. Cuộn cặn vào giấy lọc và cho vào ống chiết của máy Soxhlet, lắp máy và tiếp tục tiến hành nhƣ ghi ở phƣơng pháp trên.
Chú ý tráng mặt kính đồng hồ bằng ête và cũng cho ête đó vào máy. Thời gian chiết là 2 giờ.
Tính kết quả cũng giống nhƣ phƣơng pháp trên.
Tính kết quả cũng giống nhƣ phƣơng pháp trên.
Hòa tan các chất không phải lipid bằng acid sulfuric. Ly tâm với sự có mặt của cồn amylic, lipid sẽ đƣợc tách thành một lớp. Đọc thể tích của lớp dung dịch lipid. Nếu dùng ống ly tâm đặc biệt cho phân tích sữa, thể tích của dung dịch lipid sẽ cho thẳng số g bơ trong mẫu sữa thí nghiệm.
2. Dụng cụ, vật liệu, thuốc thử:
- Acid sulfuric đậm đặc tỷ trọng 1,82.
- Cồn izoamylic không đƣợc có furfurol, tỷ trọng 0,815 và nhiệt độ sôi +130oC.