M.dubia được bắt tại hồ Trúc Bạch là hồ nhỏ điển hình của đô thị, phì dưỡng quanh năm. Sau khi được thu về, M. dubia được bắt bằng pipet Paster và thả nhẹ vào môi trường nuôi đã chuẩn bị sẵn là môi trường nuôi cơ bản là nước lọc tự nhiên có bổ sung thêm tảo. Quá trình nuôi thích nghi kéo dài 3 thế hệ trước khi đưa vào môi trường thử nghiệm lựa chọn dung dịch thích hợp. Nhiệt độ được giữ ở 24 ± 1 °C và pH 7.5. Thức ăn của M. dubia là Chlorella Vulgaris. C. vulgaris được chiết nước và cho ăn mật độ 1 × 106 cells/mL. Mật độ M. dubia được nuôi ổn định trong môi trường phòng thí nghiệm là 150 cá thể/ lít. Ánh sáng duy trì < 1000lux thời gian chiếu sáng 12h sáng: 12h tối. Chlorella Vulgaris được nuôi bằng môi trường cơ bản theo tác giả Pratt, Robertson[129], thức ăn tảo được li tâm 2500 vòng/phút trước khi ăn. M.dubia được cho ăn hàng ngày và 2 ngày thay nước một lần. pH được kiểm soát hàng ngày. M.dubia được nuôi thích nghi trong phòng thí nghiệm đến thế hệ F7 mới bắt đầu lấy ra và tiến hành thí nghiệm phơi nhiễm.
Sau quá trình nuôi thích nghi, M.dubia được đưa vào nuôi ở dung dịch thử nghiệm. Dung dịch nuôi thử nghiệm trong giai đoạn thich nghi là dung dịch Combo [116] và dung dịch Common Basal [117]. Thời gian nuôi thích nghi là 1 tháng qua 5-7 thế hệ tùy từng môi trường. Trong quá trình nuôi thích nghi, các chỉ số sinh sản (số lứa đẻ, cố con mỗi lứa đẻ được quan trắc theo dõi trong nhiều thế hệ) nhằm chọn ra môi trường nuôi tốt nhất cho M.dubia.
45
Bảng 2.2 Yêu cầu cơ bản môi trường sống của Moina dubia
Điều kiện cơ bản Yêu cầu cơ bản cần đảm bảo
Môi trường nuôi Nước cất 2 lần được bổ sung thêm các nguyên tố vi lượng, đa lượng tạo nên môi trường nuôi Combo, mật độ 50 con/l
Nhiệt độ 24 ± 1oC đối với Moina dubia
Oxy/ khí bổ sung Oxy hòa tan trong khoảng 60 – 100% so với bão hòa (khoảng ≥ 5mg/l)
pH Trong khoảng từ 7,2 đến 7,8
Ánh sáng Ánh sáng trắng lạnh, 550 – 900 lux tại bề mặt nước, quang kỳ 12 giờ sáng/12 giờ tối
Thức ăn Chlorella vulgaris
Thay nước 1-2ngày/lần, nhẹ nhàng tránh làm tổn thương sinh vật, sử dụng ống hút có miệng rộng
Sức khỏe cá thể Tỉ lệ chết ≤ 25% ở một tuần trước khi thử nghiệm, thời gian đến lứa đẻ đầu tiên ≤ 12 ngày, con cái 10 - 18 ngày tuổi phải có ≥ 15 con non Moina dubia sẽ được loại bỏ nếu xuất hiện trứng ngủ.
Bình nuôi M. dubia Kiểm tra pH dung dịch nuôi Nuôi tảo làm thức ăn Hình 2.3 Nuôi thích nghi M.dubia trong phòng thí nghiệm
46