2.5.1.1. Dụng cụ, máy móc, hóa chất
- Kim đầu tù chuyên dùng của Nhật Bản, dùng để cho chuột uống thuốc. - Cân phân tích 10-4, model CP224S (Sartorius – Đức).
- Bộ dụng cụ mổ động vật cỡ nhỏ và các dụng cụ thí nghiệm khác.
2.5.1.2. Thiết kế nghiên cứu
Nghiên cứu độc tính cấp của bài thuốc ĐT-HV trên chuột nhắt trắng bằng đường uống theo phương pháp Litchfield – Wilcoxon, hướng dẫn của Tổ chức Y tế thế giới, quy định của Bộ Y tế Việt Nam [36],[37].
2.5.1.3. Các bước tiến hành
Trước khi tiến hành thí nghiệm, cho chuột nhịn ăn 16 giờ, nước uống tự do. Sau 16 giờ, chuột được chia ngẫu nhiên thành các lô, mỗi lô 10 con.
Các lô thử được cho uống ĐT-HV với thể tích 0,2 ml/10g, 3 lần/24 giờ, mỗi lần cách nhau 3 giờ. Mức liều cho uống ở mỗi lô tăng dần.
Theo dõi tình trạng chung của chuột và số lượng chuột chết ở mỗi lô trong vòng 72 giờ sau khi chuột uống thuốc lần cuối.
Tìm liều cao nhất không gây chết chuột (0%), liều thấp nhất gây chết chuột hoàn toàn (100%) và các liều trung gian. Từ đó xây dựng đồ thị tuyến
tính đến xác định LD50 của thuốc thử (nếu có). Sau đó tiếp tục theo dõi tình
trạng chung của chuột ( hoạt động, ăn uống, bài tiết,...) ở mỗi lô cho đến 07 ngày sau khi uống thuốc.
Tiến hành mổ chuột quan sát tình trạng các tạng ngay sau khi có chuột chết (nếu có) để xác định nguyên nhân gây độc.
2.5.2. Nghiên cứu lâm sàng 2.5.2.1. Thiết kế nghiên cứu 2.5.2.1. Thiết kế nghiên cứu
Nghiên cứu thử nghiệm lâm sàng, so sánh trước và sau điều trị, và so sánh với nhóm chứng.
2.5.2.2. Chọn mẫu và cỡ mẫu
- Chọn mẫu có chủ đích
- Cỡ mẫu: chọn mẫu thuận tiện: lấy toàn bộ bệnh nhân được chẩn đoán hội chứng ruột kích thích đến khám và điều trị tại Bệnh viện Tuệ Tĩnh trong thời gian diễn ra nghiên cứu. Trong nghiên cứu này, chúng tôi lấy được 60 bệnh nhân được chẩn đoán xác định hội chứng ruột kích thích vào nghiên cứu, trong đó có 30 bệnh nhân NNC và 30 bệnh nhân NĐC.
2.5.2.3. Các bước tiến hành nghiên cứu
Bước 1: Bệnh nhân hội chứng ruột kích thích chấp thuận tham gia nghiên cứu, ký cam kết tình nguyện
Bước 2: Bệnh nhân được chia ngẫu nhiên thành hai nhóm, đảm bảo tính tương đồng trong ghép cặp (giới, tuổi, thời gian mắc bệnh, triệu chứng lâm sàng nhập viện…) và được chia thành 2 nhóm điều trị:
- Nhóm nghiên cứu: điều trị bằng bài thuốc ĐT-HV với liều 300ml/ngày chia làm 2 lần, tương ứng với 2 túi thuốc sắc 150ml, mỗi lần 1 túi uống sáng - chiều sau bữa ăn, liên tục trong 30 ngày.
- Nhóm đối chứng: điều trị bằng Mebeverine hydrochloride 200mg ngày 2 viên chia 2 lần, trước ăn 20 phút, uống với nhiều nước, trong thời gian 30 ngày.
Bước 3: Theo dõi các tiêu chí nghiên cứu Bước 4: Đánh giá kết quả và viết báo cáo