3. Nội dung nghiên cứu
3.4. Ảnh hưởng của α-NAA đến sự hình thành rễ cây quýt Bắc Kạn
α-NAA là chất điều hòa sinh trưởng nhân tạo thuộc nhóm auxin, có hoạt tính sinh lí như một auxin tự nhiên, có tác dụng thúc đẩy sự sinh trưởng và giãn nở của tế bào, tăng cường các quá trình sinh tổng hợp và trao đổi chất, đặc biệt là kích thích tạo rễ. Thông thường, α-NAA được sử dụng bổ sung vào môi trường nuôi cấy nồng độ từ 0,1mg/l -2,0mg/l. Chúng có hiệu quả sinh lý ở nồng độ thấp. Với những tìm hiểu về đặc tính của α-NAA, chúng tối tiến hành nghiên cứu ảnh hưởng của α-NAA tới sự hình thành rễ cây quýt Bắc Kạn bằng cách bổ sung vào môi trường nuôi cấy α-NAA với nồng độ khác nhau.
Các chồi khi đạt được chiều cao 1,5- 2,0cm được cấy chuyển sang môi trường MS cơ bản có bổ sung agar 9g/l + sucrose 30g/l + nước dừa 50ml/l + α-NAA 0,3mg/l, 0,5mg/l, 0,7mg/l, 0,9mg/l, 1,2mg/l. Đối chứng là môi trường MS cơ bản có bổ sung agar 9g/l + sucrose 30g/l + nước dừa 50ml/l. Qua nghiên cứu chúng tôi thu được bảng 3.6.
Qua bảng 3.6 cho thấy, ở môi trường nuôi cấy nồng độ α-NAA khác nhau thì tỉ lệ chồi ra rễ và chiều dài rễ khác nhau. Chứng tỏ nồng độ α-NAA ảnh hưởng đến sự hình thành và phát triển rễ của cây quýt Bắc Kạn trong nuôi cấy in vitro. Tỉ lệ chồi hình thành rễ, sỗ rễ/chồi cũng như chiều dài rễ tăng đần khi nồng độ α- NAA tăng từ 0,3-0,5mg/l, khi nồng độ α-NAA tiếp tục tăng thì tỉ lệ chồi hình thành rễ và số rễ/chồi giảm dần. Ở môi trường bổ sung α-NAA 1,2mg/l và môi trường không bổ sung α-NAA, các chồi đều không hình thành rễ. Môi trường có bổ sung α-NAA 0,5mg/l cho hiệu quả cao nhất. Sau 4 tuần nuôi cấy, tỉ lệ chồi ra rễ 26,67%, số rễ/chồi 1,75. Sau 6 tuần tỉ lệ chồi hình thành rễ và số rễ/chồi đều tăng nhanh, tỉ lệ chồi hình thành rễ là 63,33% số rễ/chồi là 2,44. Sau 8 tuần nuôi cấy tỉ lệ chồi phát sinh chồi là 90%, số rễ/chồi là 2,89.
Kết quả này cũng phù hợp với kết luận của Phan Hữu Tôn và cs (2014) [133], khi nghiên cứu trên quýt Đường Canh (nồng độ tối ưu cho chồi ra rễ là α- NAA 0,3mg/l) và cam Vinh (phát sinh rễ tốt nhất ở môi trường bổ sung α-NAA 0,4mg/l). Kết quả này cũng phù hợp với kết quả nghiên cứu của Sarker và cs (2015) [20], khi nghiên cứu nhân giống cây cam quýt (Citrus aurantifollia) và
Savita và cs (2010) [24], Hawkat A.S. Ushra M.I. (2006) [23], khi nghiên cứu nhân giống cây chanh thô (Citrus jambhiri Lush), đều khẳng đinh các chồi ra rễ tốt nhất ở môi trường MS cơ bản bổ sung NAA 0,5mg/l.
Nồng độ α-NAA cũng ảnh hưởng đến sự phát triển của rễ cây quýt Bắc Kạn. Chiều dài trung bình của rễ tăng khi nồng độ α-NAA trong môi trường nuôi cấy tăng từ 0,3-0,5mg/l, khi nồng độ α-NAA tiếp tục tăng thì chiều dài trung bình của rễ cũng giảm. Chiều dài trung bình của rễ cao nhất ở môi trường bổ sung α- NAA 0,5mg/l. Sau 8 tuần nuôi cấy, chiều dài trung bình của rễ là 2,10cm,
Bảng 3.6. Ảnh hưởng của α-NAA đến sự phát sinh rễ của cây quýt Bắc Kạn
Công thức α-NAA (mg/l) Tỉ lệ chồi phát sinh rễ (%) Số rễ/chồi Chiều dài rễ (cm) Chất lượng rễ Sau 4 tuần ĐC 0 0 0 0 CT1 0,3 13,33 1,25±0,23 0,5±0,04 ++ CT2 0,5 26,67 1,75±0,34 0,6± 0,03 +++ CT3 0,7 16,67 1,40±0,27 0,6±0,05 +++ CT4 0,9 10,00 1,33±0,22 0,4±0,02 ++ CT5 1,2 0 0 0 Sau 6 tuần ĐC 0 0 0 0 CT1 0,3 26,67 1,63±0,29 1,3±0,06 ++ CT2 0,5 63,33 2,42±0,46 1,7± 0,05 +++ CT3 0,7 46,67 1,36±0,21 1,2±0,05 +++ CT4 0,9 23,33 1,56± 0,39 0,6± 0,02 ++ CT5 1,2 0 0 0 Sau 8 tuần ĐC 0 0 0 0 CT1 0,3 53,33 2,21± 0,38 1,5± 0,08 ++ CT2 0,5 90,00 2,89± 0,58 2,1±0,06 +++ CT3 0,7 56,67 1,75± 0,19 1,4±0,04 +++ CT4 0,9 33,33 1,50± 0,40 0,7±0,03 ++ CT5 1,2 0 0 0
Ghi chú: (+): chồi nhỏ, ngắn, lá bé, màu xanh nhạt; (++): chồi nhỏ, lá bé, màu xanh đậm; (+++): chồi to, khỏe, lá to xanh đậm, phát triển cân đối.
Như vậy, môi trường tối ưu cho sự hình thành và phát triển rễ của cây quýt Bắc Kạn là môi trường MS cơ bản bổ sung agar 9g/l + sucrose 30g/l + nước dừa 50ml/l + α-NAA 0,5mg/l, với tỉ lệ chồi hình thành rễ là 90%, số rễ/chồi là 2,89 rễ, chiều dài trung bình của rễ là 2,10cm.
Đối chứng α-NAA 0,5mg/l
Hình 3.6. Ảnh hưởng của NAA đến sự hình thành và phát triển rễ của cây quýt Bắc Kạn (sau 8 tuần nuôi cấy)