Xác định giới hạn phát hiện LOD

Một phần của tài liệu (LUẬN văn THẠC sĩ) nghiên cứu sàng lọc và thu nhận aptamer đặc hiệu kháng sinh streptomycin và ứng dụng để xác định dư lượng kháng sinh trong sữa​ (Trang 43 - 46)

CHƢƠNG III: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN ***

3.4.Xác định giới hạn phát hiện LOD

y = -0,582x + 2492,R² = 0,948 R² = 0,948

Đặng Thị Thu Phương Viện Sinh Thái&Tài Nguyên Sinh Vật K17 44

Số hoá bởi Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn

Tiến hành đo mẫu trắng, lặp lại 10 lần, xác định LOD bằng công thức : LOD =3 X SD (trong đó SD là độ lệch chuẩn)

Tính giới hạn phát hiện; LOD = 45 ng/ml

3.5.Đánh giá tính đặc hiệu của aptasensor streptomycin

Để đánh giá tính đặc hiệu của aptasensor với kháng sinh streptomycin, tiến hành bổ sung các kháng sinh neomycin, penicillin, tetracycline vào đệm, đồng thời ở hỗn hợp khác, ngoài 3 kháng sinh trên còn bổ sung streptomycin. Nồng độ các kháng sinh trong hỗn hợp được bổ sung như sau:

Bảng 3.1. Nồng độ các kháng sinh trong hỗn hợp

Tên Nồng độ kháng sinh trong hỗn hợp ( ng/ml) Tetracycline 10 Penicillin 0,4 Streptomycin 200 Neomycin 150 download by : skknchat@gmail.com

Đặng Thị Thu Phương Viện Sinh Thái&Tài Nguyên Sinh Vật K17 45

Số hoá bởi Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn

Thực hiện đo EIS. Kết quả thể hiện trên hình:

Hình 3.9: Giản đồ Nyquist kiểm tra tính đặc hiệu của aptasensor Streptomycin

Kết quả kiểm tra nhận thấy, trong đệm có chứa 3 kháng sinh neomycin, peniciline, tetracycline tín hiệu điện hóa không thay đổi sơ với tín hiệu điện hóa của aptasensor (điện cực Au-ap streptomycin). Tuy nhiên, khi streptomycin được thêm vào với nồng độ 200ng/ml, tín hiệu thay đổi, trở kháng giảm đáng kể. Như vậy, aptasensor đã chế tạo, có thể được sử dụng để phát hiện kháng sinh streptomycin với độ đặc hiệu cao.

3.6.Phát hiện streptomycin trong mẫu sữa

Mẫu sữa sau khi được thu nhận, bổ sung kháng sinh với các nồng độ là 150 ng/ml, 700 ng/ml, và 2000 ng/ml. Tiếp theo, xử lý sữa theo quy trình đã được trình bày ở mục phương pháp. Xác định streptomycin trong mẫu sữa bằng aptasesor, đồng thời xác định phần trăm kháng sinh bị mất sau khi xử lý mẫu sữa. Kết quả thể hiện trên bảng sau:

Đặng Thị Thu Phương Viện Sinh Thái&Tài Nguyên Sinh Vật K17 46

Số hoá bởi Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn

Bảng 3.2: Phát hiện Streptomycin trong mẫu sữa và phần trăm kháng sinh thu hồi sau khi xử lý mẫu

Nồng độ streptomycin được bổ sung (ng/ml)

Nồng độ streptomycin được phát hiện bằng apt

sensor (ng/ml)

Phần trăm kháng sinh thu hồi (%)

150 124 82,67

700 641 91,57

2000 1876 93,80

Như vậy, sau khi xử lí mẫu sữa, thì khả năng thu hồi lại kháng sinh là 82,67 -93,8%

Hình 3.10: Giản đồ nyquist xác định một số mẫu kháng sinh của aptasensor Streptomycin

KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ *** ***

Một phần của tài liệu (LUẬN văn THẠC sĩ) nghiên cứu sàng lọc và thu nhận aptamer đặc hiệu kháng sinh streptomycin và ứng dụng để xác định dư lượng kháng sinh trong sữa​ (Trang 43 - 46)