- Xác định biến đổi đại thể của gà bị bệnh.
- Xác định biến đổi vi thể ở một số khí quan của gà bệnh.
3.4.3. Nghiên cứu phương pháp phịng và trị bệnh
- Thí nghiệm sử dụng một số phác đồ điều trị bệnh trên gà do
Leucocytozoon spp gây ra.
- Đưa ra một số biện pháp giúp phòng bệnh do đơn bào Leucocytozoon spp gây ra trên gà.
3.5. PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 3.5.1. Bố trí thí nghiệm 3.5.1. Bố trí thí nghiệm
- Mẫu được chọn để nghiên cứu là 720 mẫu máu gà được lấy theo phương pháp chọn mẫu có chủ đích kết hợp giữa việc chọn mẫu chùm nhiều tầng và chọn mẫu phân tầng. Chùm được chọn là một số hộ chăn nuôi thuộc 3 xã có số lượng đàn gia cầm chăn ni lớn nhất huyện Mê Linh gồm Chu Phan, Hoàng Kim và Tráng Việt. Tầng mẫu được chọn nghiên cứu được phân theo lứa tuổi, mùa vụ và phương thức chăn ni. Bố trí thí nghiệm được thực hiện cụ thể theo bảng sau
Bảng 3.1. Bố trí thí nghiệm kiểm tra tỷ lệ và cường độ nhiễm
Leucocytozoon trên gà
Đơn vị: con
Đối tượng
Mùa xuân Mùa hè Mùa thu Mùa đông
Tổng Thả vườn Nuôi nhốt Thả vườn Nuôi nhốt Thả vườn Nuôi nhốt Thả vườn Nuôi nhốt <2 tháng tuổi 30 30 30 30 30 30 30 30 240 2-4 tháng tuổi 30 30 30 30 30 30 30 30 240 >4 tháng tuổi 30 30 30 30 30 30 30 30 240 Tổng 90 90 90 90 90 90 90 90 720
3.5.2. Phương pháp làm tiêu bản máu và xác định sự có mặt của căn nguyên gây bệnh gây bệnh
* Phương pháp phiết kính
Chuẩn bị những phiến kính đã được rửa xà phịng, sau đó ngâm trong cồn
960 trong 3 giờ rồi lau khơ bằng khăn mềm khơng có xơ. Dùng kim lấy một giọt
máu tươi của gà ở tĩnh mạch cánh, nhỏ giọt máu lên một đầu phiến kính, cách rìa phiến kính khoảng 1 cm. Đặt cạnh ngắn hơn của phiến kính thứ 2 lên giọt máu,
nghiêng 450 so với phiến kính thứ nhất. Khi giọt máu đã dàn ra khắp cạnh nhỏ
của phiến kính thứ 2 thì kéo phiến kính thứ hai dọc theo chiều dài của phiến kính thứ nhất, làm cho máu được dàn thành một lớp mỏng và đều trên phiến kính thứ
nhất. Sau khi máu trên phiến kính khơ tiến hành cố định bằng cồn 900 bằng cách
nhỏ cồn lên bề mặt phiến kính và để khơ tự nhiên. Tiêu bản được đánh số thứ tự bằng bút đánh dấu, đồng thời ghi các thông tin của tiêu bản vào sổ nhật ký bao gồm: chủ hộ, địa chỉ, ngày lấy mẫu, tuổi gà, phương thức chăn nuôi.
* Phương pháp nhuộm giemsa tiêu bản máu
- Xếp các tiêu bản máu đã được cố định bằng cồn 900 lên giá.
50 phút.
- Rửa sạch tiêu bản nhẹ nhàng dưới vòi nước cất, chú ý khơng xối trực tiếp nước vào vị trí máu.
- Xếp tiêu bản nghiêng trên giá, để khô tự nhiên.
* Phương pháp kiểm tra tìm Leucocytozoon spp trên tiêu bản nhuộm
- Nhỏ 1 giọt dầu lên tiêu bản, kiểm tra tiêu bản dưới kính hiển vi bằng vật kính dầu, độ phóng đại 10 x 100.
- Những mẫu máu tìm thấy đơn bào Leucocytozoon được xác định là có
nhiễm, ngược lại là không nhiễm.
- Cường độ nhiễm được xác định bằng cách đếm số đơn bào
Leucocytozoon trên vi trường kính hiển vi và phân theo 3 cấp độ: nhẹ, trung bình
và nặng.
1 – 2 đơn bào /vi trường: nhiễm nhẹ 3 – 5 đơn bào /vi trường: nhiễm trung bình > 5 đơn bào / vi trường: nhiễm nặng
3.5.3. Phương pháp nghiên cứu đặc điểm bệnh lý lâm sàng
* Phương pháp khám tổng quát bên ngoài
- Quan sát thể trạng chung: trọng lượng, tình trạng tăng trọng, khả năng
vận động.
- Quan sát vùng đầu: quan sát mào, yếm (kích thước, màu sắc...), quan sát dịch mũi, dịch mắt, dịch miệng.
- Quan sát vùng lơng, da: lơng khơ hay bóng mượt, vùng da khơng có lơng có bị xuất huyết, muỗi đốt...
* Phương pháp mổ khám quan sát biến đổi đại thể các cơ quan, tổ chức bên trong.
Mổ khám những gà có triệu chứng của bệnh và khi xét nghiệm máu có đơn bào Leucocytozoon trong máu theo quy trình mổ khám gia cầm của Cục Thú y.
Bước 1: chuẩn bị xác gà. Đối với những con gà còn sống dùng dao sắc
hoặc kéo cắt tĩnh mạch cổ.
Bước 2: Nhúng ướt xác gà vào dung dịch thuốc sát trùng (trừ phần đầu) để
hạn chế sự phát tán mầm bệnh trong quá trình mổ.
Bước 3: mổ xác gà
- Lột da ngực, da đùi
- Dùng kéo cắt da ở dưới xương ức, sau đó lột ngược về phía trước và sang 2 bên, bẻ dỗng 2 khớp đùi.
- Kiểm tra trạng thái của cơ ngực, cơ đùi.
Bước 4: kiểm tra các cơ quan nội tạng
- Trước tiên phải mổ lật ngực. Dùng kéo cắt hai bên sườn, cắt rời khớp xương đòn rồi quan sát.
- Quan sát hệ tuần hoàn (tim): quan sát màng bao tim, đặc điểm hình
thái tim...
- Kiểm tra đường tiêu hóa: Cắt ngang ống tiêu hóa vị trí đoạn giữa diều và dạ dày tuyến và cắt đến kết trực tràng. Tách gan ra khỏi đường tiêu hóa (chú ý túi mật dễ bị vỡ ), phơi bày ống tiêu hóa ra. Dạ dày tuyến và dạ dày cơ: Quan sát niêm mạc và chất chứa. Không tràng, hồi tràng, trực tràng, manh tràng: Quan sát niêm mạc và chất chứa.