- Chiết mẫu bằng bằng dung môi n-Hexan và hỗn hợp dung môi n-Hexan: aceton (9:1), sau đó làm sạch dịch chiết bởicột chiết pha rắn Florisil với các dung môi n- Hexan và hệ dung môi kết hợp n-Hexan và Dichloromethane theo các tỉ lệ
khác nhau.
- Trong nghiên cứu chúng tôi thực hiện hai quy trình chiết như sau:
+ Quy trình 1:
tâm ở 4400 vòng/ phút trong vòng 5 phút. Hút l ớp dung môi phía trên. Lặp lại hai lần và gộp dịch chiết.
• Thêm 3 giọt iso- octan sau đó đểbay hơi (hoặc cô Nito) đến khoảng 2mL
• Bổ sung vào cột Florisil 1 gam 𝑁𝑁𝑁𝑁2𝑆𝑆𝑂𝑂4đã nung sau đó hoạt hóa bằng 10mL n- Hexan. Chuyển dịch chiết lên cột và rửa giải bằng 6mL n- Hexan và 6mL (n-Hexan: Dicloromethane = 5:1).
• Cô cạn và định mức bằng 1mL n- Hexan, lọc qua đầu lọc kích thước 0.45µm, sau đó phân tích trên GCMS.
+ Quy trình 2:
• 1mL huyết tương bổ sung 5mL hỗn hợn n-Hexan: Aceton (9:1)
• Sau đó lắc vontex 1 phút và ly tâm ở 4400 vòng/ phút trong vòng 5 phút. Hút lớp dung môi phía trên. Lặp lại hai lần và gộp dịch chiết.
• Thêm 3 giọt iso- octan sau đó để bay hơi (hoặc cô Nito) đến khoảng 2mL
• Bổ sung vào cột Florisil 1 gam 𝑁𝑁𝑁𝑁2𝑆𝑆𝑂𝑂4 đã nung sau đó hoạt hóa bằng 10mL n- Hexan. Chuyển dịch chiết lên cột và rửa giải bằng 6mL n- Hexan và 6mL (n-Hexan: Dicloromethane =5:1).
• Cô cạn và định mức bằng 1mL n- Hexan, lọc qua đầu lọc kích thước 0.45µm, sau đó phân tích trên GCMS.
Nhận xét: Phương pháp chiết pha rắn là phương pháp đã được sử dụng phổ
biến và đem lại hiệu quả chiết khá tốt với một số các nền mẫu thực phẩm, trầm tích,
dược liệu…Tuy nhiên khi chúng tôi áp dụng trên nền mẫu huyết tương thì đem lại hiệu suất thu hồi khá thấp (khoảng 40-45%). Vấn đề đặt ra ở đây có thể là do quá trình rửa giải qua cột chưa được hoàn toàn nên chúng tôi đã tiến hành khảo sát các
điều kiện chiết qua cột khác nhau. Tuy nhiên hiệu suất thu hồi của phương pháp chưa được khắc phục:
Hình 3.10: Hiệu suất thu hồi của phương pháp khi chiết mẫu chuẩn và mẫu thêm chuẩn ở cùng nồng độ 20ppb