2.1. Chuẩn bị ống nghiệm thạch nghiêng và ống nghiệm môi trường thạch sâu thạch sâu
Để làm ống nghiệm thạch nghiêng, môi trường được tiệt trùng trong
autoclave. Sau đó, môi trường nóng chảy được lấy ra và đặt lên một mặt phẳng ngang với phần đầu được kê cao hơn so với đáy ống nghiệm sao cho môi trường bên trong chiếm 2/3 chiều cao ống nghiệm. Để yên cho
môi trường đông đặc lại hoàn toàn và bảo quản ống nghiệm ở vị trí thẳng đứng.
ống thạch nghiêng sâu được chuẩn bị tương tự ống nghiệm thạch nghiêng
nhưng môi trường được đông cứng và để nguội ở trạng thái thẳng đứng.
2.2. Cấy chuyền và cấy đâm sâu
Cấy chuyền ở ống nghiệm thạch nghiêng
1) Dùng que cấy vòng đã vô trùng bằng ngọn lửa đèn cồn, chuyển giống vi sinh
vật (nấm mốc) từ đĩa petri sang ống nghiệm thạch nghiêng PDA bằng cách cấy ria, vuốt nhẹ dây cấy để tạo đường zic-zac trên bề mặt môi trường thạch nghiêng.
2) Đưa que cấy ra khỏi ống nghiệm sao cho không chạm vào thành và miệng
ống nghiệm. Sau đó hơ ống nghiệm dưới ngọn lửa đèn cồn để vô trùng
3) Đậy miệng ống nghiệm và đặt ống nghiêm lên giá đỡ, ủ ở nhiệt độ phù hợp
trong 24-48 giờ. Sau đó kiểm tra sự phát triển của vi sinh vật.
4) Ghi nhận kết quả.
Cấy đâm sau ở ống thạch đứng
1) Dùng que cấy thẳng đã vô trùng bằng ngọn lửa đèn cồn, chuyển giống vi
sinh vật (nấm mốc) từ đĩa petri sang ống nghiệm thạch đứng PDA.
2) Cấy nấm mốc vào ống nghiệm bằng cách đâm thẳng đứng vào chính giữa
môi trường (2/3 chiều sâu của môi trường)
3) Đưa que cấy ra khỏi ống nghiệm sao cho không chạm vào thành và miệng
ống nghiệm. Sau đó hơ ống nghiệm dưới ngọn lửa đèn cồn để vô trùng
4) Đậy miệng ống nghiệm và đặt ống nghiêm lên giá đỡ, ủ ở nhiệt độ phù hợp
trong 24-48 giờ. Sau đó kiểm tra sự phát triển của vi sinh vật tạo một đường đục theo vết cấy đâm sâu.
5) Ghi nhận kết quả.
(File đính kèm: THẠCH NGHIÊNG, THẠCH ĐỨNG.)
IV. Kết quả
Hình: Môi trường thạch nghiêng nấm mốc Hình: Môi trường thạch đứng nấm mốc IV. Nhận xét và giải thích 1. Ưu điểm
Phân lập giống vi sinh vật thuần khiết và bảo quản chúng trong một thời gian dài. Kỹ thuật bảo quản tốt sẽ giảm thiểu số lần phải cấy chuyền vi sinh vật.