một số xã thuộc huyện Sơn Dương - tỉnh Tuyên Quang
3.5.1.1. Phương pháp thu thập mẫu phân trâu, bò
Số lượng trâu, bò thu thập mẫu phân được tính theo công thức:
Với tỷ lệ nhiễm sán lá gan dự kiến là 20% và độ tin cậy 95% thì số trâu, bò thu mẫu ở mỗi xã là 60 con.
Như vậy, tổng số trâu, bò cần lấy mẫu phân tại 5 xã tính theo công thức trên là 300 con.
Trong đó có:
Số lượng trâu: 200 con Số lượng bò: 100 con
Thu thập mẫu phân trâu, bò theo phương pháp lấy mẫu chùm nhiều bậc cắt ngang: lấy ở 1 huyện; tại huyện này lấy mẫu ở 5 xã, mỗi xã lấy mẫu ở 4 thôn. Tại mỗi thôn lấy mẫu phân ngẫu nhiên của những trâu, bò nuôi tại các nông hộ, các trại chăn nuôi.
Mỗi trâu, bò lấy mẫu phân được ghi lại các đặc điểm như: loại gia súc (trâu/bò), tính biệt (đực/cái), tuổi (kết hợp hỏi chủ hộ và xem độ mòn răng để xác định tuổi), khối lượng cơ thể (ước đoán), trạng thái phân, các biểu hiện lâm sàng (nếu có), các đặc điểm riêng khác, họ tên chủ hộ, ngày lấy mẫu.
Mẫu phân được lấy lúc trâu, bò vừa thải ra hoặc lấy trực tiếp từ trực tràng con vật. Mỗi trâu, bò lấy khoảng 30 gam phân. Để riêng mỗi mẫu phân vào một túi nilon nhỏ, mỗi túi có kèm theo nhãn ghi những thông tin trên.
n: Số mẫu cần lấy
p1: Xác suất để phát hiện được bệnh (0,95) d: Số con mắc bệnh (d = N x p2)
p2: Tỷ lệ mắc dự đoán N: Tổng đàn vật nuôi
Quy định về tuổi trâu, bò: có 4 lứa tuổi trâu, bò được nghiên cứu: - Từ 1 - 2 năm tuổi.
- Từ 2 - 5 năm tuổi. - Từ 5 - 8 năm tuổi. - Trên 8 năm tuổi.
3.5.1.2. Phương pháp xét nghiệm mẫuphân
- Sử dụng phương pháp lắng cặn Benedek (1943) để xét nghiệm mẫu phân tìm trứng sán lá gan.
Nguyên lý: Dùng lực khuấy mẫu trong nước để tách trứng sán lá gan ra khỏi phân, do tỷ trọng của trứng sán nặng hơn tỷ trọng của nước nên trứng sẽ lắng xuống. Vì vậy, có thể tìm trứng sán trong cặn lắng.
- Quan sát tiêu bản cặn lắng của từng mẫu phân dưới kính hiển vi quang học, độ phóng đại 100 lần để tìm trứng sán lá gan.
Đánh giá kết quả: Những mẫu phân tìm thấy trứng sán lá gan được xác định là có nhiễm, ngược lại là không nhiễm. Cường độ nhiễm sán lá gan được xác định bằng phương pháp đếm trứng Mc. Master (đếm số trứng/gam phân trên buồng đếm Mc. Master theo tài liệu của Jorgen Hansen và Brian Perry, 1994).
- Quy định cường độ nhiễm sán lá gan ở trâu, bò. Có ba mức quy định: + ≤ 300 trứng/g phân
+ > 300 - 600 trứng/g phân + > 600 trứng/g phân