I. Mục tiêu:
1.Nêu được nguyên tắc của phương pháp thêm trong định lượng đo quang.
2.Làm được phép định lượng một chất trong hỗn hợp phức tạp bằng đo quang theo phương pháp thêm.
II. Xác định nồng độ dung dịch trong phương pháp đo quang theo phương phápthêm: thêm:
Là phương pháp có cùng nguyên tắc với phương pháp so sánh, đòi hỏi dung dịch đo phải tuân theo đinh luật Lambert-Beer và hai dung dịch đo có nồng độ không nên khác nhau nhiều .Phương pháp được tiến hành bằng cách:
Đo Dx của dung dịch có nồng độ Cx cần xác định,sau đó tiến hành đo D ' của dung dịch có nồng độ Cx xác định nhưng có thêm một lượng chất chuẩn ứng với nồng độ Cch thêm vào.Khi ấy ta có:
Dx = ε.l.Cx và D ' = ε.l.(C + C )
( ở đây bằng nhau vì là cùng một chất, cùng bước sóng đo, l bằng nhau vì đo cùng 1 loại cuvet).Do đó: DX CX D' C C DX CX Cch . D' D X X ch X X
Phương pháp này thường được áp dụng khi dung dịch chất cần xác định có thành phần phức tạp ,lúc đó sẽ loại trừ được một số yếu tố ảnh hưởng mà nhiều khi chưa biết được.
x
III.Định lượng Berberin trong viên nén Berberin: O O + O N H3C O - Cl .2H2O CH3 Berberin hydroclorid [C20H18NO4 .Cl-].2H2O = 388,92. 3.1.Nguyên tắc:
Dung dịch Berberin trong nước có cực đại hấp thụ ánh sáng ở bước sóng 263nm và 345 nm,vì thế có thể áp dụng phương pháp đo quang để định lượng berberin.nhưng vì trong viên nén, thành phần phức tạp, ngoài berberin còn có tá dược,do đó có thể dùng phương pháp thêm để khắc phục được một số yếu tố ảnh hưởng.
3.2.Dụng cụ,hóa chất:
- Máy quang phổ UV-VIS. - Cân phân tích.
- Cối chày sứ.
- Các bình định mức. - Các cốc thủy tinh. - Giấy lọc băng xanh. - Phễu lọc.
- Berberin.HCl dùng làm chuẩn. - Mẫu viên nén Berberin.
3.3.Tiến hành:
3.3.1. Pha dung dịch Berberin 1% (dùng làm chuẩn):Cân chính xác trên cân phân tích một lượng cần thiết để pha (qua tính toán),hòa tan bằng nước nóng.
3.3.2.Định lượng Berberin trong viên nén:
- Cân chính xác 20 viên nén Berberin cần định lượng.Tính khối lượng trung bình của 1 viên .Nghiền trong cối sứ thành bột mịn.
- Cân chính xác m gam một lượng bột viên (tương ứng với khoảng 0,1g Berberin) cho vào cốc có mỏ loại 100ml.Thêm 20ml nước sôi khuấy kỹ.Để lắng nguội 15 phút,gạn chuyển dung dịch vào bình đinh mức 100ml.Phần còn lại them 30ml nước sôi và khuấy kỹ.Để lắng nguội 15 phút,gạn chuyển dung dịch vào tiếp ở bình định mức trên.Phần cặn lại thêm tiếp nước sôi, khuấy kỹ sau đó tập trung hết vào bình định mức 100ml trên ,them nước đến vạch,lắc kỹ.Lọc qua giấy khô, bỏ 20ml dịch lọc đầu.Lấy chính xác 10ml dịch lọc trên cho vào bình định mức 100ml khác ,them nước đến vạch ,lắc kỹ.Đem đo mật độ quang ở bước sóng 263nm(hoặc 345nm) với dung dịch so sánh là nước được Dx.
-Song song tiến hành một thí nghiệm như trên nhưng sau khi cân chính xác mg bột viên có them một lượng chính xác dung dịch Berberin 1% làm chuẩn (tương ứng 0,02g Berberin)vào trước khi hòa tan,các giai đoạn sau tiến hành tương tự.Kết quả đo mật độ quang được D ’.
’
Từ Dx, Dx và lượng berberin đã biết thêm vào ,tính hàm lượng berberin trong một viên.
IV.Câu hỏi lượng giá:
4.1.Cách xác định nồng độ dung dịch theo phương pháp theemtrong phương pháp đo quang.
4.2.Thiết lập công thức tính kết quả ra số gam Berberin trong một viên Berbrin.
4.3.Nếu dung dịch chất cần xác định không tuân theo định luật Lambert –Beer, có thể áp dụng định lượng theo phương pháp thêm được không?
BÀI 6. PHƯƠNG PHÁP ĐIỆN HÓA :ĐO pH VÀ CHUẨN ĐỘ ĐO THẾ
I. Mục tiêu:
1.Trình bày được bản chất của phép đo pH bằng đo thế và phương pháp chuẩn độ đo thế. 2.Thực hành được động tác đo pH. Đo đạt sai không quá ± 0,2 đơn vị pH.
3.Làm được phép chuẩn độ đo thế.