- Coenzym: NAD+, NADP+, FAD, FMN hoạt hoá các enzym oxi hoá khử
Cỏc phương phỏp tỏch chiết và tinh sạch enzyme
sạch enzyme
Enzyme cú trong t b o ế à động v t, th c v t ho c vi sinh v t. Mu n thu nh n enzyme c n rỳt chi t chỳng ra ậ ự ậ ặ ậ ố ậ ầ ế kh i t b o.ỏ ế à
Phương phỏp chung:
Enzyme khụng cú kh n ng t i ra kh i t b o do ú ph i phỏ v c u trỳc c a t b o b ng cỏch:ả ă ự đ ỏ ế à đ ả ỡ ấ ủ ế à ằ - Nghi n xay v i b t th y tinh, cỏt th ch anh, xay ề ớ ộ ủ ạ đồng hoỏ.
- Dựng dung mụi h u c : butanol, aceton, glycerin, etyl acetat ..v. vữ ơ … - B ng súng siờu õm ằ …
Sau khi phỏ v c u trỳc t b o c nỡ ấ ế à ầ dựng dung d ch ị đệm thớch h p ho c mu i trung tớnh chi t rỳt enzymeợ ặ ố ế , s n ph m thu ả ẩ được là dung d ch enzyme ị cú l n cỏcẫ t p ch t (mu i, gluạ ấ ố cide, )…
Tinh ch :ế
- Lo i mu i v t p ch t cú phõn t lạ ố à ạ ấ ử ượng nh kh i d ch enzyme: s d ng phỏ ỏ ị ử ụ ương phỏp th m tớch qua m ng ẩ à bỏn th m ch t p ch t cú phõn t nh cú th i qua.ấ ỉ ạ ấ ử ỏ ể đ
- Lo i protein l v t p ch t cú phõn t lạ ạ à ạ ấ ử ượng l n, cú th ph i h p nhi u phớ ể ố ợ ề ương phỏp: s c ký h p th , s c ắ ấ ụ ắ ký trao đổi ion i n ly, l c gel, k t t a phõn đ ệ ọ ế ủ đọan, bi n tớnh ch n l cế ọ ọ …
- K t t a b ng dung mụi h u c : aceton, iso – propanol, etanol, (ph thu c v o nhi t ế ủ ằ ữ ơ … ụ ộ à ệ độ, th i gian x lý ờ ử ng n).ắ
- S c ký h p th : thắ ấ ụ ường dựng hydrooxy apatit l m ch t h p th .à ấ ấ ụ - S c ký trao ắ đổi ion: s d ng nh a trao ử ụ ự đổi ion
- D n xu t este c a cellulose (carboxyl – metyl – cellulose, dietyl – aminol etyl – cellulose )ẫ ấ ủ … - L c gel: dựng sephadex (d n xu t c a polysaccharid – dextran)ọ ẫ ấ ủ