CHƯƠNG 2 : NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
c. Phân tích một số chỉ tiêu vi sinh vật:
Đối với nấm Fusarium: Đất được nghiền nhỏ, trộn đều, lấy 5gr đất sau đó pha 45ml nước vơ trùng được nồng độ pha lỗng là 10-1, sau đó lấy 1 ml dung dịch trên hoà với 9 ml nước cất được nồng độ pha lỗng 10-2, sau đó lấy 1ml dung dịch 10-2 trang đều vào đĩa môi trường PPA (đối với Fusarium), sau 5-7 ngày đếm số lượng tản nấm nấm hình thành trên đĩa petri.
Cơng thức tính số lượng bào tử nấm/ g đất: ∑C
N = –––– d.V.n
Trong đó: N là số vi sinh vật trong một đơn vị kiểm tra (được tính bằng CFU/g, ml); ∑C là tổng số khuẩn lạc đếm được trên các đĩa Petri; d độ pha loãng; n là số đĩa Petri; V là thể tích dung dịch pha lỗng cho vào mỗi đĩa.
Đối với nấm Phytophthora: Sử dụng phương pháp bẫy du động bào tử bằng cánh hoa. Theo dõi số cánh hoa bị mất màu; Phương pháp sử dụng mồi bẫy: Phương pháp phân lập nấm Phytophthora từ đất và rễ hồ tiêu bằng sử dụng mồi bẫy cánh hoa hồng. Phương pháp của Erwin, D.C. and Riberrio O.K (1996).
Lấy mẫu đất ở gốc của cây bị bệnh. Cho đất vào 1/3 cốc, thêm nước cất vơ trùng vào tới khi đạt ¾ cốc. Khuấy nhẹ đất trong cốc bằng đũa thuỷ tinh, để đất lắng xuống (qua đêm). Cắt cánh hoa có màu sắc 0,5 x 0,5 cm (1 mồi bẫy) thả vào cốc nước trên.
Mỗi cốc thả 50 mồi. Để cốc bẫy bào tử qua đêm ở nhiệt độ 20-250C. Quan sát cánh hoa sau: 1 ngày, 2 ngày. Khi thấy cánh hoa bị mất màu đem lên kinh hiển vi soi, quan sát thấy bào tử nấm Phytophthora. Đếm số mồi bẫy mất màu. Các môi trường phân lập, nuôi cấy: Môi trường PPA cho nấm Fusarium; Môi trường PSM, PDA cho nấm Phytophthora.
2.2.3 Phương pháp xử lý thống kê kết quả nghiên cứu.
Tính các thơng số thống kê: số trung bình, biên độ biến động, độ lệch tiêu chuẩn, các giá trị cực đại và cực tiểu. Nhập số liệu, tính các đặc trưng mẫu và vẽ biểu đồ bằng chương trình Microsoft Excel 2010, từ đó quan sát và phân tích mối quan hệ giữa các chỉ tiêu bằng phần mền XLSTAT 2012.
Đối chiếu kết quả từ mẫu thu thập được với điểm chưa bị tác động (hồ tiêu trồng mới, nơi chưa chịu tác động).