1. Chiết dựa vào dung môi
Bột dược liệu được chiết với ether dầu hỏa để loại chất béo rồi chiết saponin bằng methanol – nước (tỷ lệ 4:1). Loại methanol dưới áp suất giảm. Hòa cặn trong nước để có dung dịch 10% rồi lắc với n – butanol. Tách lớp n – butanol, bốc hơi butanol dưới áp suất giảm rồi hòa cặn với methanol để có dung dịch chấm sắc ký. Có thể tinh chế thêm bằng cách rót từ từ dung dịch methanol vào ehter có lượng lớn gấp 10 – 15 lần (có khi dùng aceton hoặc hexan thay ether).
Chiết với cồn -Hexan,benzen, PE để loại tạp Bộ t rễ ca m thả o
-Ethanol (50-90%),MeOH, nước Dị ch chi ết cồ n -Cô thu hồi dung môi
-Lắc với n-Butanol -Cô quay Cao cồn Saponin thô / n- butanol Cao saponin thô
2. Chiết saponin bằng cách tủa trong môi trường axit
Cho nguyên liệu thực vật cần chiết xuất saponin vào dung dịch cồn 70° bằng phương pháp ngấm kiệt. Dịch chiết cồn thu được sẽ đem cô thu hồi còn khoảng 1 lít, sau đó pha loãng với 5 lít nước
-Chiết với este dầu hỏa
(Giàu axit Glycyrrhizar)
Rễ và thân cây ngâm
-Cắt bỏ rễ con, ủ đống -Thái mỏng, sấy khô, tán bột
Bột dược liệu -Loại chất béo
Bột dược liệu đã loại béo
-Chiết hồi lưu với cồn 75o Bã dược liệu -Rửa với cồn, bốc hơi cồn
-Hòa tan trong nước, tủa GA trong nước bằng H2SO4 Tủa GA
-Ly tâm lấy tủa
-Lấy tủa bằng nước đá, hòa tan lại trong 95o sôi, bốc hơi cồn GA
-Chiết với cồn 70%
-Cô thu hồi dung môi, hòa cắn với nước
-Rót axit HCl đến pH=2, khuấy đều 5
3. Chiết xuất Saponin bằng sắc ký cột Diaion HP-20
Dung dịch mẫu trong nước được nạp lên cột có chứa Diaion HP – 20, sau đó triển khai bằng (H20 – MeOH) với nồng độ MeOH tăng dần:
Hình 8: Ảnh hưởng của độ phân cực