Dựng thạch Agar để tạo mụi trường đặc: phần đặc chỉ chiếm 1- 2% khối lượng, 98 - 99% là chất lỏng. Thạch cú cấu trỳc dạng sợi nờn tạo được một cấu trỳc lưới trong khụng gian chứa được rất nhiều chất lỏng.
Nguyờn tắc: Trong mụi trường gel, khỏng nguyờn và khỏng thể cỏch nhau một khoảng, chỳng sẽ khuếch tỏn về phớa nhau, rồi gặp nhau. Nếu khỏng nguyờn, khỏng thể tương ứng sẽ kết hợp tạo phức hợp khỏng nguyờn - khỏng thể.
Tại vựng cú lượng khỏng nguyờn, khỏng thể thớch hợp đường tủa sẽ xuất hiện. Cú thể quan sỏt được hoặc muốn rừ hơn thi nhuộm được.
Phản ứng kết tủa trong thạch trong ống nghiệm (kỹ thuật Oudin)
Cú thể chia làm 2 loại:
Phản ứng kết tủa khuếch tỏn trong thạch đơn:
• Dựng một ống nghiệm cú đường kớnh nhỏ, cho vào đú một lượng khỏng thể đó trộn lẫn với thạch.
• Trờn mặt thạch cho một lượng dung dịch khỏng nguyờn. Khỏng nguyờn từ mụi trường lỏng sẽ khuếch tỏn vào thạch, càng xuống sõu lượng khỏng nguyờn càng loóng. • Ở nơi tỷ lệ khỏng nguyờn và khỏng thể tương ứng sẽ xuất
hiện đường tủa dễ quan sỏt khụng bị tan khi lắc, thuận lợi khi di chuyển hoặc chụp ảnh.
• Độ nhạy của phản ứng tăng gấp 2 - 3 lần so với khi thực hiện phản ứng trong mụi trường lỏng.
Phản ứng kết tủa khuếch tỏn trong thạch kộp
• Dựng một ống nghiệm cú đường kớnh nhỏ, cho khỏng thể vào trước,
• Rồi cho vào bờn trờn khỏng thể một lượng thạch.
• Sau đú cho lờn trờn mặt thạch một lượng dung dịch khỏng nguyờn.
• Khỏng nguyờn bờn trờn từ mụi trường lỏng sẽ khuếch tỏn đi vào trong thạch, khỏng thể bờn dưới khuếch tỏn lờn trờn cũng đi vào trong thạch.
• Ở nơi tỷ lệ khỏng nguyờn, khỏng thể tương ứng sẽ xuất hiện đường kết tủa.
• Trong cựng một ống nghiệm nếu dựng nhiều cặp khỏng nguyờn, khỏng thể khỏc nhau để chẩn đoỏn sẽ xuất hiện nhiều đường kết tủa riờng rẽ ở độ nụng sõu khỏc nhau.