Ho t tắnh gi9 l i % Ngày Enzyme t_ do
1.2.4.1 Tái sP dlng
M t trong nh9ng ưu ựiam c-a enzyme cC ự'nh là d/ dàng thu h&i tS môi trư ng ph*n 0ng và ti p tfc tái s8 dfng, giúp làm ựơn gi*n quá trình s*n xu t và gi*m tác ự ng chi phắ enzyme ự n giá thành s*n phpm. Theo các nghiên c0u trư c
ựây, CLEAs có kh* năng tái s8 dfng cao. Vắ df, enzyme CLEAs (R)-oxynitrilase, thu nh n tS Prunusamygdalus, sau mư i l,n tái s8 dfng chuyan hóa acid hydrocyanic thành o-chlorobenzaldehyde (hình 1.8) nhưng ho t tắnh CLEAs enzyme v n không suy gi*m [4][11]. Tương t_, enzyme NHaseỜCLEAs trên ựư c tái s8 dfng 36 l,n ựa hydrat hóa n-hexyl cyanide [9]. Nhưng v n ự` là s_ m t tắnh ch n l c c-a enzyme do tác ự ng cơ h c, ựi`u này chcc chcn x*y khi b{ sung nhd
gi t d'ch n{i sau khi tách CLEAs enzyme [4].
Hình 1.8 Tái s8 dfng CLEAs (R)-hydroxynitrile lyase trong o-chlor-obenzaldehyde hydrocyanic
% Ho t tắnh gi9 l i
1.2.4.2. Thu h>i CLEAs
M t ưu ựiam khác c-a kY thu t CLEAs là d/ dàng thu h&i tS môi trư ng ph*n 0ng. Trái ngư c v i enzyme t_ do, CLEAs enzyme d/ dàng thu h&i bWng phương pháp ly tâm houc l c. Kắch thư c c-a CLEAs hay khCi CLEAs sẶ quy t ự'nh s_ thành công c-a quá trình l c. V i các khCi CLEAs l n d/ dàng ựư c l c trên ph/u l c th m chắ có tha l c ựư c ngay c* trên ph/u l c th-y tinh có lk l n v i các CLEAs ựơn có kắch thư c Ớm có tha l c trên màng MW nhd. Các khCi CLEAs có kắch thư c trung bình thư ng ựư c tách b7i các ph/u l c có ựư ng kắnh lk7 m0c Ớm. Khi th_c hi+n l c CLEAs v i các ph/u l c có kắch thư c tS 0.2 ự n 5Ớm, Candida antarctica
lipase CLEAs có kắch thư c 1Ớm không ựư c thu h&i v i các ph/u l c có kắch thư c tS 1 ự n 5Ớm. đáng ng c nhiên hơn, CLEAs Candida antarctica lipase v n không tha ựư c thu h&i khi l c v i ph/u l c có kắch thư c 0.2 Ớm. đi`u này ch0ng minh v` tắnh co gi*n c-a khCi enzyme cCự'nh theo kY thu t CLEAs, và mki enzyme trong khCi CLEAs có m t s_ t_ do di chuyan nh t ự'nh mà không c0ng nhcc góp ph,n tăng ho t tắnh enzyme cC ự'nh. Thu h&i CLEAs enzyme nhd hơn như CLEAs
Candida rugosa lipase ch'u tác ự ng c-a hi+n tư ng k t khCi. CLEAs Candida rugosa lipase có kắch thư c thông thư ng 0.1 Ớm nhưng l i có thaựư c l c b7i các ph/u l c 0.5Ớm. Muc dù, ph/u l c polypropylene có tha b' nghỖt hoàn toàn, nhưng ph/u l c có tha th_c hi+n ựư c v i ph/u l c Zeta Plus, giúp thu h&i và ựóng bánh enzyme cCự'nh tCt hơn. Do ựó, kiam soát ựư c kắch thư c c-a quá trình k t khCi sẶ
kiam soát ựư c quá trình l c c-a CLEAs [8].
1.2.5. Thivt b< sQn xuAt
Trong công nghi+p s*n xu t dư c phpm và hóa ch t tinh khi t có 0ng dfng enzyme cC ự'nh quy trình s*n xu t thư ng áp dfng theo d ng tSng mỔ, sau ph*n
0ng enzyme cCự'nh ựư c thu h&i bWng quá trình l c houc ly tâm. Các nghành công nghi+p khác có quá trình chuyan hóa d,u và mb, thi t b' d ng tháp ự+m s8 dfng enzyme cCự'nh theo kY thu t CLEAs thắch h p v i mô hình s*n xu t liên tfc. V n
ự` thư ng ựư c quan tâm là cân bWng kắch thư c khCi CLEAs enzyme ựa tránh s_
ự*m b*o ho t tắnh cao hơn khi s8 dfng khCi CLEAs enzyme có kắch thư c l n b'
hi+n tư ng khu ch tán gi i h n. đCi v i thi t b' t,ng sôi có tha s8 dfng CLEAs enzyme cCự'nh có kắch thư c nhd nhưng chúng ph*i ựư c gi97 trong Ộl&ngỢ, m t b ph n c-a thi t b'. Thi t b' d ng này 0ng dfng r t thành công khi s8 dfng CLEAs penicillin amidase ựa th-y phân liên tfc penicillin G [10]. đi`u ựáng quan tâm hi+n nay phát trian CLEAs tS tắnh bWng cách b{ sung h t nano có tS tắnh vào quá trình cC ự'nh. BWng cách này CLEAs enzyme tS tắnh sẶựư c thu h&i, s8 dfng và kiam soát d/ dàng bWng thi t b' kiam soát tS tắnh [4].
1.2.6. kng dlng cYa ks thu t CLEAs
KY thu t CLEAs ựư c 0ng dfng ngày càng r ng rãi trong cC ự'nh các lo i enzyme như hydrolase, oxidoreductase và lyase [11]. đuc bi+t nhóm enzyme hydrolase ựư c nghiên c0u cC ự'nh theo kY thu t CLEAs, nhóm enzyme này có nhi`u 0ng dfng trong s*n xu t công nghi+p và d/ dàng cC ự'nh bỲng kY thu t CLEAs. Ngoài ra, CLEAs có tha th_c hi+n cC ự'nh tS d'ch enzyme ch0a nhi`u enzyme khác nhau. Như khi thu nh n và cC ự'nh enzyme bWng kY thu t CLEAs tS
tfy heo ch0a ba enzyme lipase, phospholipase A2 và α-amylase thì ho t tắnh c-a c*
ba enzyme ự`u ựư c gi9 l i [15]
1.2.6.1. CLEAs hydrolase a- CLEAs protease
KY thu t CLEAs th_c hi+n cC ự'nh trên các enzyme protease khác nhau, bao
g&m (chymo) trypsin (E.C. 3.4.21.1), papain (E.C.3.4.22.2), và c* các enzyme
protease ki`m thu nh n tSBacillus licheniformis (alcalase, E.C. 3.4.21.62) s8 dfng trong b t giut. Alcalase ựư c s8 dfng r ng rãi trong t{ng h p h9u cơ, vắ df như
phân gi*i (amino acid) ester, t{ng h p amine và peptide. Ưu ựiam c-a CLEAs alcalase có s_ {n ự'nh cao trong b*o qu*n và s*n xu t. Do ựó, không ng c nhiên rWng CLEAs alcalase ựư c s8 dfng t{ng h p d n xu t c-a amino acid và peptide trong dung môi h9u cơ, ựuc bi+t là methyl tertỜbutyl ether [16].
gian dài, là gi*i pháp thân thi+n môi trư ng thay th cho tác nhân chCng ge