Áp d映pi"8k隠u ki羽n quy trình phân tích trên kh違o sát m瓜t s嘘 s違n ph育m có trên th鵜 vt逢運ng: chi院t xu医t trà xanh vtqpi"p逢噂c u嘘pi"Vt "Zcpj"Mj»pi"A瓜 (a), th詠c ph育m ch泳c
p<pi"Itggp"Eqhhgg"*b), th詠c ph育m ch泳e"p<pi"Uycpuqp"Itggp"Vgc"(c)
Hình 3.12: Chi院t xu医t t瑛 trà xanh và th詠c ph育m ch泳e"p<pi
M磯u (a): cân 50 mg chi院t xu医t hòa tan trong MeOH 70 % v瑛c"8栄 100 ml có n欝ng
8瓜 0,5 mg/ml
M磯u (b): cân 0,2 g m磯u th穎 hòa tan trong MeOH 70% v瑛c"8栄 100 ml. M磯u (c): cân 0,2 g m磯u th穎 hòa tan trong MeOH 70 % v瑛c"8栄 100 ml
Cân m瓜v"n逢嬰ng v瑛c"8栄 ch院 ph育m (X1.1), (X2.1+"j”c"vcp"vtqpi"OgQJ"92"'"8吋 8逢嬰c n欝pi"8瓜 kh臼ang 0,5 mg/ml.
Trang | 44
Hình 3.13: S逸e"m#"8欝 c栄a h厩n h嬰p chu育n
L員p l衣i 6 l亥n tiêm m磯u chu育p"8吋 zƒe"8鵜nh các thông s嘘 h羽 s嘘8嘘i x泳ng, s嘘8 c"n#"
thuy院v."8瓜 l羽ch chu育n c栄a th運k"ikcp"n逢w"x "fk羽n tích pic.
B違ng 3.20: K院t qu違v pj"v逢挨pi"vj ej"j羽 th嘘ng c栄a (+/-) catechin
STT Vj運k"ikcp"n逢w Fk羽p"v ej"8雨pj U嘘"8 c"n#"vjw{院v J羽"u嘘"8嘘k"z泳pi
1 9,089 6358055 10765 1,082 2 9,102 6370080 10860 1,092 3 9,098 6372082 10903 1,090 4 9,148 6379874 11006 1,091 5 9,181 6351470 10950 1,089 6 9,217 6368728 11073 1,100 TB 9,14 6366715 10926 1,091 RSD (%) 0,57 0,16 1,00 0,53
Trang | 45
B違ng 3.21: K院t qu違v pj"v逢挨pi"vj ej"j羽 th嘘ng c栄a EGCG
STT Vj運k"ikcp"n逢w Fk羽p"v ej"8雨pj U嘘"8 c"n#"vjw{院v J羽"u嘘"8嘘k"z泳pi
1 12,520 13016535 16245 1,464 2 12,537 13007405 16227 1,467 3 12,540 13008229 16215 1,459 4 12,606 13001243 16152 1,467 5 12,650 12993335 16103 1,469 6 12,694 13000966 16195 1,473 TB 12,591 13004619 16190 1,467 RSD (%) 0,56 0,06 0,33 0,32
K院t lu壱n: các thông s嘘8隠w"8衣t yêu c亥w"s"rj逢挨pi"rjƒr"rj¤p"v ej"e„"v pj"v逢挨pi"
thích h羽 th嘘ng.
Trang | 46
Hình 3.15: S逸e"m#"8欝 c栄a m磯u th穎 (b)
Hình 3.16: S逸e"m#"8欝 m磯u th穎 (c)
A吋zƒe"8鵜nh s詠 có m員t c栄a EGCG và (+/-) catechin trong m磯u th穎 ta ti院n hành thêm chu育n vào dung d鵜ch th穎. T瑛 k院t qu違 di羽p"v ej"uw{"tc"n逢嬰ng ph映c h欝i c栄a chu育n
Trang | 47 B違ng 3.22: K院t qu違 t益 l羽 ph映c h欝i c栄a (+/-) catechin và EGCG Ejw育p"vj‒o vào (mg) Ejw育p"v·o"n衣k"vjgq" vj詠e"v院"*oi+ V益"n羽"rj映e"j欝k RSD (%) (+/- )catechin 2,016 2,010 99,70 % 0,38 2,016 2,012 99,80 % 2,016 1,998 99,11 % TB 99,54 % 1,998 1,992 99,70 % EGCG 1,998 1,990 99,60 % 0,08 1,998 1,993 99,75 % TB 99,68 % Nh壱n xét: t益 l羽 ph映c h欝i c栄a 2 chu育p"8隠u l噂p"j挨p";;.2"'"s""vtqpi"o磯u th穎 có EGCG và (+/-) catechin
B違ng 3.23: K院t qu違j o"n逢嬰ng EGCG và (+/-) catechin có trong m磯u th穎
D衣ng s違n ph育m EGCG (+/-) catechin
Aおnh tính '"J o"n⇔ぢng Aおnh tính '"J o"n⇔ぢng
M磯u th穎 (a) X 19,04 % X 37,22 %
M磯u th穎 (b) O X 93,11 %
M磯u th穎 (c) X 86,58 % X 85,45 %
Nh壱n xét: D詠c" x q" j o" n逢嬰ng c栄a hai chu育p" 8嘘i chi院u EGCG và (+/-)
ecvgejkp"vc"zƒe"8鵜pj"8逢嬰e"j o"n逢嬰ng c栄a hai ch医t này có trong các s違n ph育m có ch泳a chi院t xu医t trà xanh. Vì v壱y, ta c亥n ph違i có s詠 gi噂i h衣p"sw{"8鵜pj"j o"n逢嬰ng c栄a các TPCN.
Trang | 48
EJ姶愛PI"6<""M蔭V"NW一P"XÉ"A陰"PIJ卯
4.1 K院t lu壱n
Quy trình chi院t xu医t, phân l壱p EGCG, (+/-) catechin, acid gallic t瑛 trà xanh b茨ng
rj逢挨pi"rjƒr"vt ej"n{"e„"j厩 tr嬰 siêu âm s穎 d映ng ethanol 600 và tinh ch院 b茨ng s逸c ký c瓜t silica gel k院t h嬰p s逸c ký l臼pi"8k隠u ch院vjw"8逢嬰c s違n ph育o"e„"8瓜 tinh khi院v"ecq"œ" ;7.2"'"8衣t yêu c亥u cho ch医v"8嘘i chi院u chi院t t瑛f逢嬰c li羽ụ
Rj逢挨pi"rjƒr"p {"8挨p"ik違n, d宇 áp d映pị"8«"v衣q"tc"8逢嬰c s違n ph育o"8衣t tiêu chu育n làm ch医t 8嘘i chi院ụ C医u trúc hóa h丑c c栄a các h嬰p ch医v" p {" 8逢嬰e" zƒe" 8鵜nh b茨ng
rj逢挨pi"rjƒr"rj鰻 nghi羽m và so sánh v噂i tài li羽w"8«"e»pi"d嘘.
Xây d詠pi" 8逢嬰e" sw{" vt·pj" 8ƒpj" ikƒ" ejw育n EGCG, (+/-) catechin b茨pi" rj逢挨pi"
pháp s逸c ký l臼ng hi羽w"p<pi"ecq0"M院t qu違 th育o"8鵜nh cho th医{"rj逢挨pi"rjƒr"8ƒr"泳ng yêu c亥w"8鵜pj"n逢嬰ng v噂k"8瓜 l員p l衣k."8瓜8¿pi"x "e„"v pj"8員c hi羽u caọ
Thi院t l壱r"8逢嬰c hai ch医v"8嘘i chi院u EGCG, (+/-) catechin t瑛 trà xanh. S穎 d映ng các ch医t phân l壱p ki吋m tra các s違n ph育m có chi院t xu医t trà xanh trên th鵜 vt逢運ng.
Trong quá trình th詠c hi羽p."fq"8k隠u ki羽n th詠c nghi羽m phù h嬰p, tôi chi院t tách và phân l壱r"8逢嬰c acid gallic và (+/-) catechin t瑛 vt "zcpj0"Pj逢"x壱y, sau khi k院t thúc quá trình th詠c nghi羽m phân l壱r"8逢嬰c 3 ch医t: acid gallic, (+/-) catechin và EGCG.
4.2 A隠 ngh鵜
Kh違o sát eƒe"rj¤p"8丑an còn l衣i 8吋 ti院p t映c phân l壱p các h嬰p ch医t epicatechin, epicatechin gallat,..
Ti院p t映c thi院t l壱p epicatechin, epicatechin gallat, acid gallic làm ch医v"8嘘i chi院u
f逢嬰c li羽ụ
Trang | 49
Xây d詠ng gi噂i h衣p"sw{"8鵜nh v隠j o"n逢嬰ng cho các th詠c ph育m ch泳e"p<pi"e„"ej泳a chi院t xu医t trà xanh trên th鵜vt逢運ng.
Nghiên c泳w"eƒe"rj逢挨pi"rjƒr"8吋zƒe"8鵜nh các nhóm catechin và polyphenol chi院t xu医t trà xanh t瑛 m悦 ph育m.
Trang | 50
TÀI LI烏U THAM KH謂O
1. Ngô X<p"Vjw."Bài giＶpi"f⇔ぢc liうu."DO"F逢嬰c li羽w"["F逢嬰c TP.HCM, 1998. 2. Nguy宇n Kim Phi Ph映ng, Rj⇔￢pi"rjƒr"rj¤p"nｆp hぢp chＸt hのw"e￢."A衣i h丑c Khoa
H丑c T詠 Nhiên, Nhà Xu医t B違p"AJ"Sw嘘c Gia TP.HCM
3. L映e"X<p"Vj映, Nghiên cとu hiうu とpi"x "e￢"ejｘ chぐpi"<p"o”p"mko"nがai cてa mじt sぐ
chＸt chiｘt tな phつ phｂm cây chè, Lu壱n án Ti院p"u ."Xk羽n Hóa H丑c Công Nghi羽p Vi羽t Nam, 2012.
4. Nguy宇n H違i Hà, Nghiên cとu trích ly polyphenol tな trà, Lu壱p"x<p"Vj衣e"u ."A衣i h丑c Bách Khoa TP.HCM, 2006
5. F逢挨pi" Jq pi" Nqpị"Nghiên cとu chiｘt xuＸt EGCG tな trà xanh (Camellia
ukpgpuku"N0+"f́pi"rj⇔￢pi"rjƒr"uｈc ký cじt vずi hう fwpi"o»k"gvjcpqn1p⇔ずc, Lu壱n
x<p"Vj衣e"u ."A衣i h丑c Bách Khoa TP.HCM, 2010
6. L. David, T. Angelo, B. Laurent, Effect of brewing temperature and duration on green tea catechin solubilization: Basis for production of EGC and EGCG- enriched fractions, Separation and Purification Technology, Vol 49 (2006), 1Î9 7. L. Alschuler, Green Tea: Healing tonic, Am J Natur Med, Vol 5 (1998), 28-31. 8. H.N. Graham , Green tea composition, consumption, and polyphenol chemistry,
Prev Med, Vol 21 (1992), 334-350
9. G.N Dalẹ, F. Daneel, Z. Yu-Dong, Epigallocatechin-3-gallat (EGCG): Chemical and biomedical perspectives, Phytochemistry, Vol 67 (2006), 1849- 1855.
10. S. Mandel, M.B.H. Youdim, Catechin polyphenols: neurodegeneration and neuroprotection in neurodegenerative diseases, Free Radical Biology and Medicine, Vol 37 (2004), 304-317
11. B. N. Singh, S. Shankar, R. K. Srivastava, Green tea catechin, epigallocatechin- 3-gallat (EGCG): Mechanisms, perspectives and clinical applications, Biochemical Pharmacology, Vol 82 (2011), 1807-1821
12. T. Yamimotọ, L.R. Juneja, C. Djoing-Chu, M. Kim, Chemistry and Applications of Green Tea, Boca Raton, FL: CRC Press, (1997), 51-52
Trang | 51
13. K. Imai , K. Suga , K. Nakachi, Cancer-preventative effects of drinking tea among a Japanese population, Prev Med, Vol 26 (1997), 769-775.
14. DIONEX,Sensitive determination of catechins in tea by HPLC, Application Note 275 (2007)
15. W. Helmut, Z. Monikạ, B. Waldemar, F. Mirosalwa, New compounds from
Rhodiola kirilowii, Scientia Pharmaceutica, Vol 75 (2007), 29-34
16. W. Shuang, L. Mingyan., Z. Zhenjie, Ỵ Weifan, T. Qiushi, W. Minjie, EGCG and nimodipine improve the symptoms of AD by inhibiting [Ca2+ ] in hippocampal neurons of APP/PS1 transgenic mice, Mol Neurodegeneration, (2012), 7(Suppl 1):S30.
17. Z. Qi, F. Huijing, P. Jing, H. Jun, R. Seto, H. Yukihiko, W. Yian, ẠL.Ronald, M. You, Effect of Dietary Polyphenon E and EGCG on Lung Tumorigenesis in A/J Mice, Pharm Res, Vol 27 (2010), 1066Î1071
18. S. Amitava, S. Triparna , Epigallocatechin-3-gallat (EGCG) downregulates EGF-induced MMP-9 in breast cancer cells: involvement of integrin receptor
g7 3"kp"vjg"rtqeguu, Eur J Nutr, Vol 50 (2011), 465Î478
19. N. Baruch, L. Yishai, Ạ Dror., Z.R. Abraham, Green Tea and Its Major Polyphenol EGCG Increase the Activity of Oral Peroxidases, Advances in Experimental Medicine and Biology, Vol (756), 99 - 104.
20. L. Hong, M. Xiaofeng., L. Chuan, Sh. Shengmin, P. Christopher, S. Shuqun, H. Jungil., B. Naisheng, W. Bozena, H. Chi-Tang, S.Ỵ Chung., Glucuronides of tea catechins: enzymology of biosynthesis and biological activities, Drug Metabolism And Disposition,Vol 31 (2003), 452Î461
21. Ẹ Elizabeth, Identification of digallatd and methylated catechins using UPLC/MS/MS and development of rapid analysis method for theanine in tea, University of Pretoria, 2009
22. Ỵ Ling-Ling, C. Chia-Chen, C. Lih-Geeng, W. Ching-Chiung, Antitumor Principle Constituents of Myrica rubra Var.acuminata, J.Agric Food Chem, Vol 51 (2003), 2974-2979
Trang | 52
23. Ạ Maria, Z. Athina, M. Prokopios, ẠH. Serkos, L.S.Alexios, M. Emmanuel,
1H- NMR-based metabonomics for the classification of greekwines according to variety, region, and vintagẹ Comparison with HPLC data, Journal of Agricultural and Food Chemistry Article, Vol 57 (2009), 11067-11074
24. Ạ Ryszard., Sh. Fereidoon , W. Wieslaw, Separation of individual catechins from green tea using silica gel column chromatography and HPLC, Journal of Food Lipids, Vol 10 (2003), 165-177
25. J. He-yuan, Sh. Takuya , M. Yosuke, T.Takashi, J. Zhi-Hong, K.Isao, A new catechin oxidation product and polymeric polyphenols of post-fermented tea, Food Chemistry, Vol 129 (2011), 830-836.
26. Ỵ Zhou, H. Chen, Ỵ Deng, Simultaneous determination of catechins, caffeine and gallic acids in green, Oolong, black and pu-erh teas using HPLC with a photodiode array detector, Talanta, Vol 57 (2002), 07 - 316
27.M. Ạ Hye, M. Ạ Taher, M.Ỵ Ali, M.Ụ Ali, Sh.Zaman, Isolation of (+ )- Catechin from Acacia Catechu (Cutch Tree) by a Convenient Method, J. Scị Res, Vol 1 (2009), 300 -305
28. ỌẠ Eldahshan, Isolation and Structure Elucidation of Phenolic Compounds of Carob Leaves Grown in Egypt, Current Research Journal of Biological Sciences Vol 3 (2011), 52-55
29. ÐVtwpi"v¤o"Ikƒo"A鵜nh Và Ch泳ng Nh壱n H嬰p Chu育n H嬰r"Sw{Ñ0"Kpvgtpgv<"
http://www.vietcert.org.
30. Hu pj"V"Ock"Vtcpị"X "V"Mko"J逢挨pị"J "Fk羽u Ly, Chiｘt xuＸt tinh chｘ
hispanon và leoheteronin B tな ích mｄu (Leonurus heterophyllus Sw.) 8あ làm chＸv"8ぐi chiｘu, T衣r"ej "F逢嬰c H丑c T.52, S.12(2012), 15-19
31. Nguy宇n H英u L衣c Th栄y, Nghiên cとu thành phＺn hóa hがc, thiｘt lｆp chＸv"8ぐi chiｘu và xây dばng quy trình kiあm nghiうm thành phＺn alkaloid và flavonoid cho cây trinh nの hoàng cung (Crinum latifolium L., Amaryllidaceae), Lu壱n án ti院n
Trang | 53
32. Hà Minh Hi吋n, Nghiên cとw"zƒe"8おnh hぢp chＸt phenol tな nhばa và vぎ quＶó"w"8あ とng dつng trong kiあm nghiうm, Lu壱n án ti院p"u ."A衣i h丑e"["F逢嬰c TP.HCM, 2014
Trang | 1
DANH M影C PH影 L影C
Ph映 l映c 1: K院t qu違 chi院t xu医t, phân l壱p
Hình 1.1: cao EtOAc (h羽 dung môi clorofrom - aceton: 4,5 Î 5,5)
Hình 1.2<""rj¤p"8丑an ch泳a acid gallic, catechin ( h羽 dung môi MeOH Î CHCl3: 3 Î 7)
Hình 1.3: ch院 ph育m (X2.1) và EGCG (Sigma)
Ph映 l映c 2: Ph鰻 IR c栄a các ch院 ph育m
Hình 2.1: Ph鰻 IR c栄a (X2.1) Î EGCG
Hình 2.2: Ph鰻 IR c栄a (X1.2) Î acid gallic
Hình 2.3: Ph鰻 IR c栄a (X1.1) Î (±) catechin
Ph映 l映c 3: Ph鰻1H, 13C Î NMR c栄a (X2.1) Î EGCG trong aceton d-6
Hình 3.1: Ph鰻1H Î NMR c栄a (X2.1) Î EGCG
Hình 3.2: Ph鰻1H Î NMR c栄a (X2.1) Î EGCG
Hình 3.3: Ph鰻1H Î NMR c栄a (X2.1) Î EGCG
Hình 3.4: Ph鰻13C Î NMR c栄a (X2.1) Î EGCG
Ph映 l映c 4: Ph鰻1H, 13C Î NMR c栄a (X1.2) Î acid gallic trong aceton d-6
Hình 4.1: Ph鰻1H Î NMR c栄a (X1.2) Î acid gallic
Trang | 2
Ph映 l映c 5: Ph鰻1H, 13C Î NMR c栄a (X1.1) Î (±) catechin trong aceton d-6
Hình 5.1: Ph鰻1H Î NMR c栄a (X1.1) Î (±) catechin Hình 5.2: Ph鰻1H Î NMR c栄a (X1.1) - (±) catechin Hình 5.3: Ph鰻1H Î NMR c栄a (X1.1) - (±) catechin Hình 5.4: Ph鰻13C Î NMR c栄a (X1.1) - (±) catechin Hình 5.5: Ph鰻13C Î NMR c栄a (X1.1) - (±) catechin Ph映 l映c 6: S逸e"m#"8欝 các ch院 ph育m Hình 6.1: S逸e"m#"8欝 m磯u tr逸ng Hình 6.2: s逸e"m#"8欝 c栄a ch院 ph育m (X1.1) Î (±) catechin
Hình 6.3: s逸e"m#"8欝 c栄a ch院 ph育m (X1.2) Î acid gallic
Hình 6.4: Ph鰻WX"x "8瓜 tinh khi院t c栄a (X1.2) - acid gallic
Hình 6.5: Ph鰻WX"x "8瓜 tinh khi院t c栄a (X1.1) - (±) catechin
Hình 6.6: Ph鰻WX"x "8瓜 tinh khi院t c栄a (X2.1) Î EGCG
Ph映c l映c 7: Các s嘘 li羽u tham kh違o
B違ng 7.1<""J o"n逢嬰ng catechin riêng bi羽t trong t瑛ng b瓜 ph壱n c栄a búp trà
B違ng 7.2<""J o"n逢嬰ng m瓜t s嘘 kim l丑ai có trong trà (rj逢挨pi"rjƒr"CƯ
Trang | 3
Ph映 l映c 9: Tiêu chu育n ch医v"n逢嬰pi"8ƒpj"ikƒ"ej医v"8嘘i chi院u EGCG Ph映 l映e"32<""D k"8<pi"vt‒p"V衣r"Ej "F逢嬰c H丑e"p<o"42360
Trang | 4 Ph映 l映c 1: K院t qu違 chi院t xu医t, phân l壱p
(1) (2) (3)
Hình 1.1: cao EtOAc (h羽 dung môi chlorofrom - aceton: 4,5 Î 5,5)
Hình 1.2<""rj¤p"8丑an ch泳a acid gallic, catechin ( h羽 dung môi MeOH Î CHCl3: 3 Î 7)
Trang | 5
PH影 L影C 2: Ph鰻 IR c栄a các ch院 ph育m
Trang | 6
Trang | 7
Trang | 8 PH影 L影C 3: Ph鰻 1H, 13C Î NMR c栄a (X2.1) - EGCG
Trang | 9
Trang | 10
Trang | 11
Trang | 12 PH影 L影C 4: Ph鰻 1H, 13C Î NMR c栄a (X1.2) Î acid gallic trong aceton d-6
Trang | 13
Trang | 14 PH影 L影C 5: PH蔚1H, 13C Î NMR c栄a (±) catechin
Trang | 15
Trang | 16
Trang | 17
Trang | 18
Trang | 19
PH影 L影C 6: S溢E"M""A唄 CÁC CH蔭 PH域M
Trang | 20
Trang | 21
Trang | 22
Trang | 23
Trang | 24
Trang | 25
PH影 L影C 7: CÁC S渦 LI烏U THAM KH謂O
B違ng 7.3<""J o"n逢嬰ng catechin riêng bi羽t trong t瑛ng b瓜 ph壱n c栄a búp trà
catechin Lá 1 Lá 2 Lá 3 Lá già C丑ng EGC 122,10 152,27 206,42 232,36 222,08 GC 0 0 0 0 68,79 EC 45,53 47,84 45,16 45,16 65,65 EGCG 580,54 577,93 431,14 431,14 292,93 ECG 138,52 132,27 103,09 103,09 87,98 T鰻ng catechin 886,69 910,31 786,11 701,82 737,40
A挨p"x鵜: mg/g ch院 ph育m chi院t b茨ng EtOAc
B違ng 7.4<""J o"n逢嬰ng m瓜t s嘘 kim l丑ck"e„"vtqpi"vt "*"rj逢挨pi"rjƒr"CƯ
STT M磯u Al Ca Cu Fe
1 PH1 163±10 3802±152 12.6±1.1 57.2±5.1 2 LDP1 251±15 4881±222 11.4±1.2 156.8±11.3
Trang | 26 3 LD97 262±12 4272±258 13.1±1.2 72.3±4.1 4 HAT 302±18 5598±265 13.6±1.2 59.9±5.4 5 TB14 129±11 3662±189 12.0±0.9 58.4±5.6 STT M磯u Mg Mn Pb Zn 1 PH1 658±32 152±11 1.1±0.1 15.8±1.2 2 LDP1 675±32 212±18 1.2±0.1 14.1±1.1 3 NA9 670±41 144±12 3.5±0.2 12.6±1.2 4 HAT 703±51 206±14 4.4±0.2 17.0±1.4 5 TB14 648±36 188±15 0.9±0.1 13.1±1.3
Trang | 27
Ph映 l映c 8: Tiêu chu育n ch医t n逢嬰pi"8ƒpj"ikƒ"ej医v"8嘘i chi院u (+/-) catechin hydrat
C15H14O6 , M = 290,27 1. Tính ch医t: B瓜t màu tr逸ng
2. A鵜nh tính:
/ Ph鰻 IR: ph鰻 c栄a m磯u th穎 trong KBr ph違i gi嘘ng v噂i m磯u chu育n ho員c phù h嬰p v噂i ph鰻8嘘i chi院u trong d英 li羽u chu育n
/ WX<"e„"d逢噂c sóng h医p thu c詠e"8衣i t衣i 280 nm
/ 1H, 13C Î NMR: ph違i gi嘘ng m磯u chu育n ho員c phù h嬰p v噂i ph鰻8嘘i chi院u trong b瓜 d英 li羽u chu育n 3. Ak吋m ch違y: 2010C
4. Góc quay c詠c: + 1,20
5. A瓜 tinh khi院t *JRNE+<""Mj»pi"8逢嬰e" v"j挨p";7.2"'"v pj"vt‒p"ej院 ph育m nguyên tr衣ng
/ Dung d鵜ch th穎: chu育n b鵜 dung d鵜ch có n欝pi"8瓜 0,1 mg/ml trong methanol 70 %, l丑c qua màng l丑c 0,45 µm
/ Ak隠u ki羽n s逸c ký
C瓜t Agilent C18 (250 x 4,6 mm 5 µm)
Fgvgevqt"RFC"d逢噂c sóng 280 nm T嘘e"8瓜 dòng 1,0 ml/phút
Trang | 28
Th吋 tích tiêm 10 µl
Rjc"8瓜ng: A - dung d鵜ch H3PO4 0,1 %; B Î Acetonitril
Cách ti院n hành:
/ Ki吋o"vtc"v pj"v逢挨pi"vj ej"j羽 th嘘ng: cân b茨ng c瓜t b茨pi"rjc"8瓜ng ít nh医t 30 phút. Tiêm dung d鵜ch vào h羽 th嘘ng, h羽 s嘘
kéq"8w»k"e栄a pic catechin không quá 1,5, s嘘8 c"n#"vjw{院v"mj»pi"8逢嬰c nh臼j挨p"72220
/ Tiêm riêng bi羽t 6 l亥n dung d鵜ej."8瓜 l羽ch chu育p"v逢挨pi"8嘘i (RSD) c栄a di羽n tích pic 6 l亥n tiêm không l噂p"j挨p"4.2"'0"D臼
qua các pic trong s逸c ký trong s逸e"m#"8欝 m磯u tr逸ng.
/ Công th泳c tính:
A瓜 tinh khi院t (%) = 100
V噂i: ST: di羽n tích pic catechin; S: di羽n tích các pic còn l衣i tr瑛 pic catechin và các pic trong s逸e"m#"8欝 m磯u tr逸ng.
Th運i gian A B
0 Ñ 10 90 Ñ 85 10 Ñ 15 10 Ñ 20 85 Ñ 75 15 Ñ 25 15 Ñ 30 75 Ñ 90 25 Ñ 10
Trang | 29
Ph映 l映c 9: Tiêu chu育n ch医v"n逢嬰pi"8ƒpj"ikƒ"ej医v"8嘘i chi院u EGCG
C22H18O11 , M = 458,37 1. Tính ch医t: B瓜t màu tr逸ng ngà
2. A鵜nh tính
/ Ph鰻 IR: ph鰻 c栄a m磯u th穎 trong KBr ph違i gi嘘ng v噂i m磯u chu育n ho員c phù h嬰p v噂i ph鰻8嘘i chi院u trong d英 li羽u chu育n